摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 综述 | 第9-15页 |
第一节 干细胞简介 | 第9-11页 |
第二节 小鼠生殖系统发育的过程简介 | 第11-13页 |
第三节 生殖细胞的标志基因 | 第13-15页 |
第二章 实验材料和方法 | 第15-35页 |
第一节 实验材料 | 第15-20页 |
1. 细胞株 | 第15页 |
2. 细胞培养 | 第15页 |
3. 质粒和shRNA序列 | 第15-16页 |
4. 引物序列 | 第16-19页 |
5. 实验仪器 | 第19-20页 |
第二节 实验方法 | 第20-35页 |
1. 质粒的小量抽提技术 | 第20-21页 |
2. 质粒的大量抽提技术 | 第21-22页 |
3. MES细胞的培养,Embryonic Body(EB)培养和SSEA1染色 | 第22-25页 |
4. 逆转录PCR技术和实时荧光定量PCR技术 | 第25-30页 |
5. 稳转细胞株的建立与筛选 | 第30-33页 |
6. 流式细胞技术(Fluorescence Activating Cell Sorter) | 第33页 |
7 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)染色 | 第33-35页 |
第三章 实验结果与分析 | 第35-56页 |
第一节 小鼠胚胎干细胞向原始生殖细胞(PGC)的分化模型的建立 | 第35-37页 |
第二节 候选基因在成体组织、PGC及ESC分化过程中的表达检测 | 第37-40页 |
第三节 候选基因在EB分化模型中的功能检测 | 第40-51页 |
第四节 Asz1促进原始生殖细胞生成的机理探索 | 第51-56页 |
第四章 总结与讨论 | 第56-57页 |
附录 | 第57-59页 |
References | 第59-62页 |
感谢 | 第62页 |