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猪瘟病毒细胞入侵途径及GBF1和Rab2调控其增殖的研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
文献综述第13-36页
    第一章 哺乳动物病毒非经典传播方式的研究进展第13-24页
        1.1 病毒在细胞间的传播第13-21页
            1.1.1 病毒自由扩散传播的条件及可能存在的屏障第13-14页
            1.1.2 病毒胞外自由扩散和胞间传播的利与弊第14页
            1.1.3 能够通过细胞间传播方式扩散的病毒的特征第14-15页
            1.1.4 病毒细胞间传播的机制第15-16页
            1.1.5 通过细胞间传播的病毒及其传播机制第16-21页
        1.2 外泌体依赖的病毒传播第21-22页
            1.2.1 外泌体概述第21-22页
            1.2.2 外泌体调控RNA病毒传播第22页
        1.3 展望第22-24页
    第二章 病毒通过内吞方式入侵细胞的研究进展第24-36页
        2.1 内吞途径为病毒感染提供便利第24页
        2.2 病毒内吞需要受体的介导第24-25页
        2.3 病毒内化所依赖的内吞途径第25-30页
            2.3.1 网格蛋白介导的内吞途径第26页
            2.3.2 网格蛋白和小窝非依赖的内吞途径第26-27页
            2.3.3 小窝依赖的内吞途径第27-28页
            2.3.4 病毒触发的大胞饮途径第28页
            2.3.5 其他途径第28-30页
        2.4 囊膜病毒膜突破机制第30-35页
            2.4.1 囊膜病毒膜融合概述第30-31页
            2.4.2 囊膜病毒膜融合诱导机制第31-35页
        2.5 展望第35-36页
试验研究第36-95页
    第三章 猪瘟病毒体外培养系统中传播方式的研究第36-50页
        3.1 材料第36-37页
            3.1.1 病毒、细胞和主要试剂第36-37页
            3.1.2 主要仪器设备第37页
        3.2 方法第37-39页
            3.2.1 细胞培养与传代第37页
            3.2.2 细胞总RNA提取、cDNA合成及real-time PCR第37-38页
            3.2.3 间接免疫荧光试验第38页
            3.2.4 病毒滴度检测第38-39页
            3.2.5 低熔点琼脂糖扩散限制试验第39页
            3.2.6 抗体扩散限制试验第39页
            3.2.7 数据分析第39页
        3.3 结果第39-47页
            3.3.1 CSFV间接免疫荧光法的建立第39-40页
            3.3.2 CSFV在ST细胞上增殖的检测第40-41页
            3.3.3 低熔点琼脂糖限制CSFV在体外培养系统中的传播第41-44页
            3.3.4 中和抗体对CSFV在体外培养系统中的限制作用第44页
            3.3.5 CSFV增殖与细胞增殖的关系第44-47页
        3.4 讨论第47-49页
        3.5 小结第49-50页
    第四章 猪瘟病毒通过网格蛋白介导的内吞途径入侵细胞第50-65页
        4.1 材料第50-51页
            4.1.1 病毒、细胞和主要试剂第50-51页
            4.1.2 主要仪器设备第51页
        4.2 方法第51-54页
            4.2.1 抑制剂细胞安全浓度检测第51页
            4.2.2 病毒入侵细胞的抑制剂干扰试验第51-52页
            4.2.3 细胞总RNA提取、cDNA合成及real-time PCR第52页
            4.2.4 干扰载体的构建第52-53页
            4.2.5 细胞转染和阳性细胞筛选第53页
            4.2.6 间接免疫荧光试验第53页
            4.2.7 数据分析第53-54页
        4.3 结果第54-62页
            4.3.1 抑制剂CPZ和dynasore在ST细胞上安全浓度的检测第54页
            4.3.2 网格蛋白组装抑制剂CPZ对CSFV入侵ST细胞的抑制效果检测第54-57页
            4.3.3 动力蛋白抑制剂dynasore对CSFV入侵ST细胞的抑制效果检测第57-59页
            4.3.4 网格蛋白重链和动力蛋白2型shRNA干扰细胞的建立和检测第59-60页
            4.3.5 CSFV在CHC和dynamin-2干扰细胞上的入侵检测第60-62页
        4.4 讨论第62-64页
        4.5 小结第64-65页
    第五章 猪瘟病毒入侵对内体依赖性的研究第65-76页
        5.1 材料第65页
        5.2 方法第65-67页
            5.2.1 NH_4Cl抑制试验第65-66页
            5.2.2 Real-time PCR第66页
            5.2.3 干扰载体的构建和细胞转染第66-67页
            5.2.4 间接免疫荧光试验(IFA)第67页
            5.2.5 数据分析第67页
        5.3 结果第67-73页
            5.3.1 CSFV感染ST细胞依赖于酸性环境诱导第67-68页
            5.3.2 Rab5基因干扰细胞的构建及鉴定第68-69页
            5.3.3 Rab5基因下调抑制CSFV感染ST细胞第69-70页
            5.3.4 Rab7基因干扰细胞的构建及鉴定第70-71页
            5.3.5 Rab7基因下调抑制CSFV对ST的细胞的侵染第71-72页
            5.3.6 Rab9基因干扰细胞的构建及鉴定第72-73页
            5.3.7 CSFV感染ST细胞依赖于Rab9第73页
        5.4 讨论第73-75页
        5.5 小结第75-76页
    第六章 GBF1和Rab2对猪瘟病毒复制的影响第76-95页
        6.1 材料第76-77页
        6.2 方法第77-79页
            6.2.1 抑制剂病毒增殖干扰试验第77页
            6.2.2 Real-time PCR第77-78页
            6.2.3 干扰载体的构建和细胞转染第78页
            6.2.4 间接免疫荧光试验第78页
            6.2.5 病毒滴度检测第78-79页
            6.2.6 Western blot第79页
            6.2.7 慢病毒表达载体的构建及病毒包装第79页
            6.2.8 数据分析第79页
        6.3 结果第79-92页
            6.3.1 BFA能够抑制CSFV增殖第79-81页
            6.3.2 CSFV增殖对GCA敏感第81页
            6.3.3 GBF1表达量下调抑制CSFV的增殖第81-85页
            6.3.4 Rab2表达量下调抑制CFSV的增殖第85-88页
            6.3.5 CSFV增殖不依赖于ARF1第88-90页
            6.3.6 过表达GBF1和Rab2促进CSFV增殖第90-92页
        6.4 讨论第92-94页
        6.5 小结第94-95页
结论第95页
本论文的创新点第95页
有待进一步研究的问题第95-96页
参考文献第96-115页
主要缩略词和中英文对照表第115-117页
致谢第117-118页
作者简介第118-119页

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