基于实时荧光定量PCR的大豆内参基因筛选
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| 1.1 实时荧光定量PCR | 第8-12页 |
| 1.1.1 RT-qPCR背景 | 第8-9页 |
| 1.1.2 RT-qPCR技术原理 | 第9-12页 |
| 1.2 内参基因 | 第12-15页 |
| 1.2.1 内参基因研究背景 | 第12-13页 |
| 1.2.2 内参基因筛选方法 | 第13-14页 |
| 1.2.3 内参基因筛选研究国内外进展 | 第14-15页 |
| 1.3 本研究的内容、目的及意义 | 第15-16页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第15页 |
| 1.3.2 目的及意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-29页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 供试植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 设备及仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要试验试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.2 取材及材料处理方法 | 第18-21页 |
| 2.2.1 种子 | 第18页 |
| 2.2.2 子叶、胚轴 | 第18页 |
| 2.2.3 营养器官 | 第18-19页 |
| 2.2.4 逆境胁迫处理 | 第19-21页 |
| 2.3 试验方法 | 第21-29页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第21-23页 |
| 2.3.2 引物稀释及质量检测、退火温度筛选 | 第23-25页 |
| 2.3.3 大豆RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.3.4 RNA质量检测 | 第26-27页 |
| 2.3.5 cDNA合成及检测 | 第27-28页 |
| 2.3.6 荧光定量PCR及引物扩增效率测定 | 第28-29页 |
| 2.3.7 数据分析 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-51页 |
| 3.1 引物测试结果 | 第29-32页 |
| 3.2 RNA提取结果 | 第32页 |
| 3.3 cDNA质量测试 | 第32-33页 |
| 3.4 候选内参基因实时荧光定量PCR数据分析 | 第33-36页 |
| 3.4.1 引物扩增效率测试结果 | 第33-35页 |
| 3.4.2 扩增特异性分析 | 第35页 |
| 3.4.3 候选内参基因表达分析 | 第35-36页 |
| 3.5 geNorm软件分析结果 | 第36-41页 |
| 3.5.1 种子发育及萌发过程 | 第36-37页 |
| 3.5.2 营养器官 | 第37-38页 |
| 3.5.3 逆境胁迫 | 第38页 |
| 3.5.4 综合分析 | 第38-41页 |
| 3.6 NormFinder软件分析结果 | 第41-46页 |
| 3.6.1 种子发育及萌发过程 | 第41-42页 |
| 3.6.2 营养器官 | 第42-43页 |
| 3.6.3 逆境胁迫 | 第43-44页 |
| 3.6.4 综合分析 | 第44-46页 |
| 3.7 BestKeeper结果分析 | 第46-51页 |
| 3.7.1 种子发育及萌发过程 | 第46-47页 |
| 3.7.2 营养器官 | 第47-48页 |
| 3.7.3 逆境胁迫 | 第48-49页 |
| 3.7.4 综合分析 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-57页 |
| 4.1 内参基因筛选结果分析 | 第51-54页 |
| 4.1.1 种子发育及萌发过程 | 第51-52页 |
| 4.1.2 营养器官 | 第52页 |
| 4.1.3 逆境胁迫 | 第52页 |
| 4.1.4 全部材料结果分析 | 第52-53页 |
| 4.1.5 淘汰候选内参基因原因分析 | 第53-54页 |
| 4.2 软件计算差异 | 第54-55页 |
| 4.3 影响RT-qPCR试验结果准确性的因素 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| Abstract | 第65-66页 |
| 附录 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
