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锈赤扁谷盗对磷化氢产生抗性的机理研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第11-18页
    1.1 锈赤扁谷盗研究现状第11-12页
        1.1.1 锈赤扁谷盗简介第11页
        1.1.2 锈赤扁谷盗磷化氢抗性问题第11-12页
    1.2 昆虫抗药性机理研究第12-13页
        1.2.1 靶标抗性第12-13页
        1.2.2 代谢抗性第13页
    1.3 磷化氢研究现状第13-15页
        1.3.1 磷化氢熏蒸应用第13-14页
        1.3.2 昆虫产生磷化氢抗性的机制第14-15页
    1.4 高通量测序技术第15-18页
        1.4.1 转录组及转录组学第15-16页
        1.4.2 高通量测序平台第16-17页
        1.4.3 高通量测序的应用第17-18页
第二章 锈赤扁谷盗不同品系磷化氢抗性测定第18-26页
    2.1 材料与方法第18-22页
        2.1.1 供试昆虫第18页
        2.1.2 试虫培养第18-19页
        2.1.3 主要仪器第19页
        2.1.4 试验用具第19页
        2.1.5 实验试剂第19页
        2.1.6 磷化氢气体的发生第19-20页
        2.1.7 FAO推荐方法毒力测定第20-21页
            2.1.7.1 熏蒸瓶准备第20-21页
            2.1.7.2 有效浓度系列的确定第21页
            2.1.7.3 熏蒸试验设计第21页
            2.1.7.4 施药熏蒸第21页
        2.1.8 敏感品系致死终浓度及抗性鉴别浓度的确定第21页
        2.1.9 数据处理第21-22页
    2.2 结果与分析第22-24页
        2.2.1 不同地区锈赤扁谷盗磷化氢生物测定第22-24页
    2.3 讨论第24页
    2.4 结论第24-26页
第三章 锈赤扁谷盗转录组分析第26-40页
    3.1 材料与方法第26-30页
        3.1.1 供试昆虫第26页
        3.1.2 试剂与仪器第26-27页
        3.1.3 试验方法第27-30页
            3.1.3.1 总RNA提取第27页
            3.1.3.2 cDNA文库建立与Illumina测序第27-28页
            3.1.3.3 De novo组装与功能注释第28-29页
            3.1.3.4 SSRs与SNPs鉴定第29-30页
    3.2 结果与分析第30-38页
        3.2.1 锈赤扁谷盗总RNA提取质量第30页
        3.2.2 转录组序列从头组装结果第30-32页
        3.2.3 预测蛋白质的注释第32-33页
        3.2.4 Unigene的GO,COG和KEGG功能注释第33-36页
        3.2.5 分子标记的预估第36-38页
            3.2.5.1 微卫星位点(SSRs)第36-37页
            3.2.5.2 单核苷酸多态性(SNPs)第37-38页
    3.3 讨论第38-39页
    3.4 结论第39-40页
第四章 锈赤扁谷盗不同品系基因表达谱分析第40-56页
    4.1 材料与方法第40-42页
        4.1.1 供试昆虫第40页
        4.1.2 试剂与仪器第40页
        4.1.3 试验方法第40-42页
            4.1.3.1 DGE库的总RNA提取第40页
            4.1.3.2 DGE库的建立与测序第40-41页
            4.1.3.3 DGE序列标签的分析与注释第41页
            4.1.3.4 差异表达基因的qRT-PCR验证第41-42页
    4.2 结果与分析第42-53页
        4.2.1 测序质量统计第42-47页
        4.2.2 差异表达基因筛选第47-48页
        4.2.3 差异表达基因GO功能注释第48-50页
        4.2.4 差异表达基因Pathway分析第50-51页
        4.2.5 差异表达基因表达模式的聚类分析第51-52页
        4.2.6 差异表达基因qRT-PCR验证第52-53页
    4.3 讨论第53-55页
    4.4 结论第55-56页
第五章 锈赤扁谷盗抗逆性相关功能基因的鉴定第56-63页
    5.1 材料与方法第56页
        5.1.1 目的基因的筛选第56页
        5.1.2 基因序列及系统发育分析第56页
    5.2 结果与分析第56-60页
        5.2.1 基因筛选结果第56-57页
        5.2.2 细胞色素P450的鉴定及系统发育分析第57-58页
        5.2.3 谷胱甘肽转移酶GSTs相关基因的鉴定及系统发育分析第58-59页
        5.2.4 羧酸酯酶CarEs相关基因的鉴定及系统发育分析第59-60页
    5.3 讨论第60-62页
    5.4 结论第62-63页
第六章 磷化氢诱导下锈赤扁谷盗实时定量PCR内参基因的筛选第63-75页
    6.1 材料与方法第63-66页
        6.1.1 供试昆虫第63-64页
        6.1.2 试验方法第64-66页
            6.1.2.1 总RNA提取与第一链cDNA的合成第64页
            6.1.2.2 内参基因选择及定量引物设计第64页
            6.1.2.3 qRT-PCR分析第64-66页
            6.1.2.4 内参基因稳定性评价第66页
    6.2 结果与分析第66-73页
        6.2.1 总RNA质量第66-67页
        6.2.2 qRT-PCR引物特异性与扩增效率第67-68页
        6.2.3 内参基因的表达水平第68-69页
        6.2.4 内参基因稳定性分析第69-72页
            6.2.4.1 GeNorm分析第69-70页
            6.2.4.2 NomFinder分析第70-71页
            6.2.4.3 BestKeeper分析第71-72页
        6.2.5 内参基因稳定性验证第72-73页
    6.3 讨论第73-74页
    6.4 结论第74-75页
第七章 主要结论第75-78页
    7.1 锈赤扁谷盗不同品系磷化氢抗性测定第75页
    7.2 锈赤扁谷盗转录组分析第75-76页
    7.3 锈赤扁谷盗不同品系基因表达谱分析第76页
    7.4 锈赤扁谷盗抗逆性相关功能基因的鉴定第76-77页
    7.5 磷化氢诱导下锈赤扁谷盗实时定量PCR内参基因的筛选第77-78页
展望第78-79页
参考文献第79-84页
致谢第84-85页
攻读硕士期间发表论文情况第85页

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