摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 锈赤扁谷盗研究现状 | 第11-12页 |
1.1.1 锈赤扁谷盗简介 | 第11页 |
1.1.2 锈赤扁谷盗磷化氢抗性问题 | 第11-12页 |
1.2 昆虫抗药性机理研究 | 第12-13页 |
1.2.1 靶标抗性 | 第12-13页 |
1.2.2 代谢抗性 | 第13页 |
1.3 磷化氢研究现状 | 第13-15页 |
1.3.1 磷化氢熏蒸应用 | 第13-14页 |
1.3.2 昆虫产生磷化氢抗性的机制 | 第14-15页 |
1.4 高通量测序技术 | 第15-18页 |
1.4.1 转录组及转录组学 | 第15-16页 |
1.4.2 高通量测序平台 | 第16-17页 |
1.4.3 高通量测序的应用 | 第17-18页 |
第二章 锈赤扁谷盗不同品系磷化氢抗性测定 | 第18-26页 |
2.1 材料与方法 | 第18-22页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第18页 |
2.1.2 试虫培养 | 第18-19页 |
2.1.3 主要仪器 | 第19页 |
2.1.4 试验用具 | 第19页 |
2.1.5 实验试剂 | 第19页 |
2.1.6 磷化氢气体的发生 | 第19-20页 |
2.1.7 FAO推荐方法毒力测定 | 第20-21页 |
2.1.7.1 熏蒸瓶准备 | 第20-21页 |
2.1.7.2 有效浓度系列的确定 | 第21页 |
2.1.7.3 熏蒸试验设计 | 第21页 |
2.1.7.4 施药熏蒸 | 第21页 |
2.1.8 敏感品系致死终浓度及抗性鉴别浓度的确定 | 第21页 |
2.1.9 数据处理 | 第21-22页 |
2.2 结果与分析 | 第22-24页 |
2.2.1 不同地区锈赤扁谷盗磷化氢生物测定 | 第22-24页 |
2.3 讨论 | 第24页 |
2.4 结论 | 第24-26页 |
第三章 锈赤扁谷盗转录组分析 | 第26-40页 |
3.1 材料与方法 | 第26-30页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第26页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第26-27页 |
3.1.3 试验方法 | 第27-30页 |
3.1.3.1 总RNA提取 | 第27页 |
3.1.3.2 cDNA文库建立与Illumina测序 | 第27-28页 |
3.1.3.3 De novo组装与功能注释 | 第28-29页 |
3.1.3.4 SSRs与SNPs鉴定 | 第29-30页 |
3.2 结果与分析 | 第30-38页 |
3.2.1 锈赤扁谷盗总RNA提取质量 | 第30页 |
3.2.2 转录组序列从头组装结果 | 第30-32页 |
3.2.3 预测蛋白质的注释 | 第32-33页 |
3.2.4 Unigene的GO,COG和KEGG功能注释 | 第33-36页 |
3.2.5 分子标记的预估 | 第36-38页 |
3.2.5.1 微卫星位点(SSRs) | 第36-37页 |
3.2.5.2 单核苷酸多态性(SNPs) | 第37-38页 |
3.3 讨论 | 第38-39页 |
3.4 结论 | 第39-40页 |
第四章 锈赤扁谷盗不同品系基因表达谱分析 | 第40-56页 |
4.1 材料与方法 | 第40-42页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第40页 |
4.1.2 试剂与仪器 | 第40页 |
4.1.3 试验方法 | 第40-42页 |
4.1.3.1 DGE库的总RNA提取 | 第40页 |
4.1.3.2 DGE库的建立与测序 | 第40-41页 |
4.1.3.3 DGE序列标签的分析与注释 | 第41页 |
4.1.3.4 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第41-42页 |
4.2 结果与分析 | 第42-53页 |
4.2.1 测序质量统计 | 第42-47页 |
4.2.2 差异表达基因筛选 | 第47-48页 |
4.2.3 差异表达基因GO功能注释 | 第48-50页 |
4.2.4 差异表达基因Pathway分析 | 第50-51页 |
4.2.5 差异表达基因表达模式的聚类分析 | 第51-52页 |
4.2.6 差异表达基因qRT-PCR验证 | 第52-53页 |
4.3 讨论 | 第53-55页 |
4.4 结论 | 第55-56页 |
第五章 锈赤扁谷盗抗逆性相关功能基因的鉴定 | 第56-63页 |
5.1 材料与方法 | 第56页 |
5.1.1 目的基因的筛选 | 第56页 |
5.1.2 基因序列及系统发育分析 | 第56页 |
5.2 结果与分析 | 第56-60页 |
5.2.1 基因筛选结果 | 第56-57页 |
5.2.2 细胞色素P450的鉴定及系统发育分析 | 第57-58页 |
5.2.3 谷胱甘肽转移酶GSTs相关基因的鉴定及系统发育分析 | 第58-59页 |
5.2.4 羧酸酯酶CarEs相关基因的鉴定及系统发育分析 | 第59-60页 |
5.3 讨论 | 第60-62页 |
5.4 结论 | 第62-63页 |
第六章 磷化氢诱导下锈赤扁谷盗实时定量PCR内参基因的筛选 | 第63-75页 |
6.1 材料与方法 | 第63-66页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第63-64页 |
6.1.2 试验方法 | 第64-66页 |
6.1.2.1 总RNA提取与第一链cDNA的合成 | 第64页 |
6.1.2.2 内参基因选择及定量引物设计 | 第64页 |
6.1.2.3 qRT-PCR分析 | 第64-66页 |
6.1.2.4 内参基因稳定性评价 | 第66页 |
6.2 结果与分析 | 第66-73页 |
6.2.1 总RNA质量 | 第66-67页 |
6.2.2 qRT-PCR引物特异性与扩增效率 | 第67-68页 |
6.2.3 内参基因的表达水平 | 第68-69页 |
6.2.4 内参基因稳定性分析 | 第69-72页 |
6.2.4.1 GeNorm分析 | 第69-70页 |
6.2.4.2 NomFinder分析 | 第70-71页 |
6.2.4.3 BestKeeper分析 | 第71-72页 |
6.2.5 内参基因稳定性验证 | 第72-73页 |
6.3 讨论 | 第73-74页 |
6.4 结论 | 第74-75页 |
第七章 主要结论 | 第75-78页 |
7.1 锈赤扁谷盗不同品系磷化氢抗性测定 | 第75页 |
7.2 锈赤扁谷盗转录组分析 | 第75-76页 |
7.3 锈赤扁谷盗不同品系基因表达谱分析 | 第76页 |
7.4 锈赤扁谷盗抗逆性相关功能基因的鉴定 | 第76-77页 |
7.5 磷化氢诱导下锈赤扁谷盗实时定量PCR内参基因的筛选 | 第77-78页 |
展望 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第85页 |