中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-32页 |
·花青苷的结构和基本性质 | 第14-15页 |
·花青苷在植物体中的作用及其生物活性 | 第15-16页 |
·花青苷在植物体中的作用 | 第15-16页 |
·花青苷的生物活性 | 第16页 |
·花青苷的提取、纯化和定性、定量分析 | 第16-19页 |
·花青苷的提、纯化 | 第16-17页 |
·花青苷的定性定量分析 | 第17-19页 |
·花青苷的生物合成及其调控机制 | 第19-28页 |
·花青苷生物合成途径及其关键酶 | 第19-20页 |
·关键结构基因的表达调控 | 第20-22页 |
·花青苷生物合成的转录调控 | 第22-24页 |
·园艺植物花青苷合成的转录调控 | 第24-26页 |
·花青苷生物合成的其它影响因素 | 第26-28页 |
·转录组测序(RNA-Seq)技术及其在果树生物学研究中的应用 | 第28-31页 |
·转录组及RNA-Seq概述 | 第28-29页 |
·RNA-Seq在果树上的应用 | 第29-31页 |
·本研究的目的意义 | 第31-32页 |
2 材料与方法 | 第32-45页 |
·试验材料 | 第32-33页 |
·植物材料及样品采集 | 第32页 |
·菌株和载体 | 第32页 |
·主要药品、试剂盒和仪器 | 第32-33页 |
·PCR引物 | 第33页 |
·试验方法 | 第33-45页 |
·叶绿素与类胡萝素含量的测定 | 第33-34页 |
·PAL和CHI酶活性测定 | 第34页 |
·DFR和UFGT酶活性测定 | 第34-35页 |
·果皮中花青苷的提取、纯化、含量和组分测定 | 第35-36页 |
·可溶性糖和有机酸的HPLC分析 | 第36页 |
·总RNA的提取和检测 | 第36-37页 |
·甜樱桃果实转录组文库构建及高通量测序 | 第37-38页 |
·转录组的生物信息学分析 | 第38-40页 |
·数字基因表达谱分析 | 第40-41页 |
·qRT-PCR分析 | 第41-42页 |
·目的基因克隆 | 第42-44页 |
·序列分析和同源性比较 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-77页 |
·不同色泽甜樱桃果实发育期间叶绿素、花青苷及相关酶活性变化 | 第45-48页 |
·叶绿素与类胡萝卜素含量变化 | 第45页 |
·花青苷含量变化 | 第45-46页 |
·PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性变化 | 第46-48页 |
·不同色泽甜樱桃果实发育期间花青苷、可溶性糖、有机酸组分和含量变化 | 第48-59页 |
·甜樱桃花青苷类物质UPLC/MS/MS定性定量检测方法的建立 | 第48-53页 |
·不同色泽甜樱桃果实发育期间花青苷组分及含量测定 | 第53-55页 |
·不同色泽甜樱桃果实发育期间可溶性糖组份及含量测定 | 第55-56页 |
·不同色泽甜樱桃果实发育期间有机酸组分及含量的测定 | 第56-59页 |
·甜樱桃果实转录组测序及生物信息学分析 | 第59-65页 |
·RNA提取及质量评价 | 第59页 |
·转录组测序及De novo组装 | 第59-61页 |
·Unigene的功能注释和分类 | 第61-65页 |
·注释汇总及在 Nr 中的数据分析 | 第61-62页 |
·GO功能分类 | 第62-63页 |
·KOG分类 | 第63-64页 |
·KEGG代谢通路分析 | 第64-65页 |
·数字基因表达谱分析及花青苷生物合成途径相关基因筛选 | 第65-71页 |
·数字基因表达谱测序及注释 | 第65-66页 |
·差异基因表达分析 | 第66-67页 |
·与花青苷生物合成相关的差异表达基因筛选 | 第67-69页 |
·差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第69-71页 |
·花青苷合成转录因子基因的克隆和表达分析 | 第71-77页 |
·花青苷合成相关MYB、bHLH和WD40转录因子基因的克隆和序列分析 | 第71-72页 |
·氨基酸序列的同源性和系统进化分析 | 第72-75页 |
·花青苷合成相关转录因子基因在不同组织中的表达分析 | 第75-77页 |
4 讨论 | 第77-83页 |
·甜樱桃果实发育期间花青苷积累与PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性之间的关系 | 第77-78页 |
·甜樱桃果实发育期间花青苷组分、可溶性糖和有机酸代谢及其之间的关系 | 第78-79页 |
·甜樱桃果实转录组和表达谱测序及花青苷合成相关结构基因的筛选 | 第79-81页 |
·甜樱桃花青苷合成相关转录因子的筛选、克隆及表达 | 第81-83页 |
5 结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-103页 |
附录 | 第103-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第112页 |