| 符号说明 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-31页 |
| ·奇异变形杆菌病原学 | 第14-16页 |
| ·培养特性 | 第14-15页 |
| ·生化特性 | 第15页 |
| ·药敏特性 | 第15页 |
| ·抗原构造 | 第15-16页 |
| ·鸡奇异变形杆菌研究进展 | 第16-19页 |
| ·流行病学调查 | 第16页 |
| ·发病机理 | 第16-18页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第18-19页 |
| ·诊断防治 | 第19页 |
| ·革兰氏阴性菌外膜蛋白研究进展 | 第19-21页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第21-29页 |
| ·毕赤酵母简介 | 第21页 |
| ·巴斯德毕赤酵母的优缺点 | 第21-23页 |
| ·毕赤酵母表达菌株 | 第23页 |
| ·毕赤酵母表达载体 | 第23-24页 |
| ·外源基因整合方式 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白高效表达 | 第25-29页 |
| ·选择高效表达的启动子 | 第25页 |
| ·表达盒的自主复制以及与染色体上的融合整合位点 | 第25-26页 |
| ·表达菌株的甲醇利用表型 | 第26页 |
| ·信号肽的选择 | 第26页 |
| ·A+T含量 | 第26-27页 |
| ·外源基因拷贝数 | 第27页 |
| ·发酵条件 | 第27-29页 |
| ·产物稳定性 | 第29页 |
| ·槐花多糖研究进展 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-47页 |
| ·材料 | 第31-34页 |
| ·菌种、质粒 | 第31页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·试剂配制 | 第31-34页 |
| ·各种贮存液配方 | 第31-32页 |
| ·毕赤酵母培养基 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE及Western-blot相关试剂 | 第33-34页 |
| ·试验仪器 | 第34页 |
| ·奇异变形杆菌OmpA毕赤酵母表达 | 第34-42页 |
| ·OmpA基因的扩增、克隆与测序 | 第34-39页 |
| ·OmpA基因PCR引物设计与合成 | 第34-39页 |
| ·表达载体pPIC9-OmpA 的构建与鉴定 | 第39页 |
| ·毕赤酵母转化及阳性转化子筛选 | 第39-41页 |
| ·重组蛋白OmpA的诱导表达 | 第41页 |
| ·Western blot鉴定重组OmpA | 第41-42页 |
| ·重组蛋白OmpA的大量表达及纯化 | 第42页 |
| ·槐花多糖对鸡奇异变形杆菌重组亚单位疫苗的免疫增强效果 | 第42-47页 |
| ·试验菌株Q1的LD50测定 | 第42-43页 |
| ·槐花多糖的提取 | 第43页 |
| ·奇异变形杆菌重组OmpA亚单位疫苗的制备 | 第43页 |
| ·动物试验 | 第43页 |
| ·外周血抗体效价的测定 | 第43-44页 |
| ·鸡外周血IL-2 浓度的检测 | 第44-45页 |
| ·外周血T淋巴细胞增殖率的测定 | 第45页 |
| ·外周血CD4+、CD8+细胞百分比的测定 | 第45页 |
| ·疫苗免疫保护效果的检测 | 第45-46页 |
| ·数据处理 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-56页 |
| ·奇异变形杆菌OmpA毕赤酵母表达 | 第47-51页 |
| ·OmpA基因的扩增、克隆与测序 | 第47页 |
| ·表达载体pPIC9-OmpA的构建与鉴定 | 第47-48页 |
| ·毕赤酵母转化及阳性转化子筛选 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白OmpA的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白OmpA的大量表达及纯化 | 第50-51页 |
| ·槐花多糖对鸡奇异变形杆菌重组亚单位疫苗的免疫增强效果 | 第51-56页 |
| ·试验菌株Q1的LD50测定 | 第51页 |
| ·奇异变形杆菌重组OmpA亚单位疫苗的制备 | 第51页 |
| ·外周血抗体效价的测定 | 第51-52页 |
| ·鸡外周血IL-2 浓度的检测 | 第52页 |
| ·外周血T淋巴细胞增殖率的测定 | 第52-53页 |
| ·外周血CD4+、CD8+细胞百分比的测定 | 第53-55页 |
| ·疫苗免疫保护效果的检测 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·奇异变形杆菌OmpA毕赤酵母表达 | 第56-57页 |
| ·槐花多糖对鸡奇异变形杆菌重组亚单位疫苗的免疫增强效果 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
