| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词 | 第12-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-30页 |
| 1 MDR现象及其研究意义 | 第16-17页 |
| 2 MDR的形成机制 | 第17-24页 |
| 3 MDR逆转剂的研究现状及发展动态 | 第24-25页 |
| 4 天然产物MDR逆转剂的研究现状及发展动态 | 第25-27页 |
| 5 对叶大戟中大环二萜类化合物的研究进展 | 第27-29页 |
| 6 论文研究目标与整体设计 | 第29-30页 |
| 第二章 对叶大戟大环二萜类化合物的发现及生物学活性评价 | 第30-50页 |
| 1 实验材料 | 第30-33页 |
| ·化合物及试剂 | 第30-31页 |
| ·细胞株及培养液 | 第31页 |
| ·主要耗材 | 第31-32页 |
| ·主要实验仪器 | 第32-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-36页 |
| ·细胞培养 | 第33-34页 |
| ·体外肿瘤细胞生长抑制实验 | 第34-35页 |
| ·Rho123蓄积实验 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-48页 |
| ·大戟属萜类化合物对肿瘤细胞生长抑制作用弱、有抗肿瘤耐药活性 | 第36-41页 |
| ·ES2显著增加了KBv200细胞内Rho123的蓄积量,活性最强 | 第41-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 ES2逆转肿瘤多药耐药的作用研究 | 第50-73页 |
| 1 实验材料 | 第50-52页 |
| ·细胞株及培养液 | 第50页 |
| ·主要耗材及实验仪器 | 第50-51页 |
| ·化合物及试剂 | 第51-52页 |
| 2 实验方法 | 第52-55页 |
| ·细胞培养 | 第52页 |
| ·蛋白免疫印迹实验 | 第52-54页 |
| ·体外肿瘤细胞生长抑制实验、肿瘤耐药逆转实验(MTT法) | 第54页 |
| ·Rho123、DOX蓄积实验 | 第54-55页 |
| ·Rho123外排实验 | 第55页 |
| ·统计分析 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-70页 |
| ·MDR肿瘤细胞Pgp蛋白呈高表达状态 | 第55-56页 |
| ·ES2对肿瘤细胞的生长无明显抑制作用 | 第56-57页 |
| ·ES2具有很强的肿瘤多药耐药逆转活性 | 第57-65页 |
| ·ES2抑制了外排,增加了耐药株细胞中Rho123或DOX的蓄积量 | 第65-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| 第四章 ES2逆转肿瘤MDR作用的分子机制研究 | 第73-88页 |
| 1 实验材料 | 第73-74页 |
| ·化合物及试剂 | 第73-74页 |
| ·细胞株及培养液 | 第74页 |
| ·主要耗材及仪器 | 第74页 |
| 2 实验方法 | 第74-77页 |
| ·Pgp ATP酶活力实验(Pgp-Glo~(TM) Assay Systems) | 第74-75页 |
| ·Docking分析 | 第75页 |
| ·实时荧光定量PCR实验 | 第75-76页 |
| ·蛋白免疫印迹实验 | 第76页 |
| ·MTT实验 | 第76-77页 |
| ·统计分析 | 第77页 |
| 3 实验结果 | 第77-84页 |
| ·ES2增强了Pgp ATP酶活力 | 第77-78页 |
| ·ES2可能作为Pgp底物竞争性抑制药物的外排 | 第78-79页 |
| ·ES2下调了耐药株细胞中Pgp的蛋白表达水平 | 第79-81页 |
| ·ES2不影响耐药株细胞内Pgp的mRNA表达水平 | 第81-82页 |
| ·泛素-蛋白酶体降解途径可能参与ES2诱导的Pgp降解过程 | 第82页 |
| ·ES2诱导的Pgp蛋白水平的下调与自噬无关 | 第82-83页 |
| ·ES2不影响细胞内p-AKT、AKT、p-ERK、ERK的表达 | 第83页 |
| ·ES2耐药逆转活性的持续性 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-88页 |
| 总结 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-98页 |
| 附录 | 第98-104页 |
| 常用实验试剂的配制 | 第98-102页 |
| 攻读硕士学位研究生期间参加会议及摘要 | 第102-103页 |
| 在学期间参与的项目 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
