| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| ·猪传染性胃肠炎（TGE）研究现状 | 第11-13页 |
| ·病原学 | 第11-12页 |
| ·TGEV S 蛋白研究进展 | 第12-13页 |
| ·临床症状 | 第13页 |
| ·猪流行性腹泻（PED）研究现状 | 第13-15页 |
| ·病原学 | 第13-14页 |
| ·PEDV S 蛋白研究进展 | 第14-15页 |
| ·临床症状 | 第15页 |
| ·疫苗研究现状 | 第15-17页 |
| ·灭活疫苗 | 第15页 |
| ·弱毒疫苗 | 第15-16页 |
| ·基因工程疫苗 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-40页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·菌种与载体 | 第19页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第19页 |
| ·标准参照物 | 第19页 |
| ·主要生化试剂 | 第19-20页 |
| ·大提质粒主要溶液的配制 | 第20页 |
| ·培养基的配制 | 第20页 |
| ·间接ELISA 检测主要试剂 | 第20-21页 |
| ·间接免疫荧光主要试剂 | 第21页 |
| ·感受态菌的制备 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-39页 |
| ·真核表达载体构建 | 第22-32页 |
| ·pIRES-T1-P1; pIRES-T1-P2 重组真核质粒体外瞬间转染及其表达产物检测 | 第32页 |
| ·pIRES-T1-P1; pIRES-T1-P2 重组质粒免疫小鼠及其免疫效果的检测 | 第32-39页 |
| ·数据处理 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-58页 |
| ·重组质粒pIRES-T1-P1 和pIRES-T1-P2 PCR 及酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pIRES-T1 单酶切和PCR 鉴定 | 第40页 |
| ·重组质粒pIRES-T1-P1 双酶切和PCR 鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pIRES-T1-P2 双酶切和PCR 鉴定 | 第41页 |
| ·间接免疫荧光检测真核表达质粒体外瞬时转染效果 | 第41-43页 |
| ·小鼠脾脏及外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第43-47页 |
| ·小鼠脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第43-45页 |
| ·小鼠外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第45-47页 |
| ·小鼠脾脏及外周血不同亚型T 淋巴细胞动态变化 | 第47-51页 |
| ·小鼠脾脏及外周血CD4~+T 淋巴细胞动态变化 | 第47-49页 |
| ·小鼠脾脏及血液CD8~+T 淋巴细胞动态变化 | 第49-51页 |
| ·免疫小鼠脾脏及血液特异性细胞毒性T 淋巴细胞活性检测 | 第51-52页 |
| ·免疫小鼠脾脏特异性细胞毒性T 淋巴细胞活性检测 | 第51页 |
| ·免疫小鼠外周血特异性细胞毒性T 淋巴细胞活性检测 | 第51-52页 |
| ·小鼠外周血抗TGEV S /PEDV S IgG 抗体含量动态变化 | 第52-54页 |
| ·小鼠外周血抗TGEV S IgG 抗体含量动态变化 | 第52-53页 |
| ·小鼠外周血抗PEDV S IgG 抗体含量动态变化 | 第53-54页 |
| ·小鼠外周血IFN-γ的检测 | 第54页 |
| ·小鼠外周血IL-4 的检测 | 第54-55页 |
| ·小鼠外周血中和抗体的检测 | 第55-58页 |
| ·TGEV 中和抗体检测 | 第55-56页 |
| ·PEDV 中和抗体检测 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-65页 |
| ·TGEV S 和PEDV S 的重组质粒联合免疫设计 | 第58-59页 |
| ·表达载体对核酸疫苗免疫效果的影响 | 第59页 |
| ·重组真核表达载体体外瞬时转染结果分析 | 第59-60页 |
| ·小鼠免疫重组二联核酸疫苗后T 淋巴细胞增殖效果及活性的评估 | 第60-63页 |
| ·T 淋巴细胞增殖情况 | 第60-61页 |
| ·T淋巴细胞CD4~+，CD8~+亚群动态变化及特异性T 淋巴细胞毒性检测 | 第61-62页 |
| ·细胞因子IFN-γ，IL-4 生成水平 | 第62-63页 |
| ·小鼠免疫重组二联核酸疫苗后抗TGEV/PEDV IgG 抗体含量动态变化 | 第63-64页 |
| ·小鼠免疫重组二联核酸疫苗后中和抗体测定 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第74页 |
