致谢 | 第1-5页 |
目录 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-12页 |
·线粒体概述 | 第8页 |
·mtDNA的遗传特性 | 第8-9页 |
·母系遗传 | 第8页 |
·进化特征 | 第8-9页 |
·异质性 | 第9页 |
·阈值效应 | 第9页 |
·mtDNA异质性的产生机制 | 第9-10页 |
·异质性的研究方法 | 第10页 |
·异质性的研究现状 | 第10-11页 |
·油脂源和能量限制对基因表达及线粒体功能的影响 | 第11-12页 |
2 引言 | 第12-13页 |
·研究的目的意义 | 第12页 |
·研究内容和方法 | 第12-13页 |
3 材料与方法 | 第13-24页 |
·试验材料 | 第13-15页 |
·试验样品 | 第13页 |
·试验主要仪器 | 第13-14页 |
·试验主要试剂与溶液配制 | 第14-15页 |
·工具酶及试剂盒 | 第15页 |
·试验方法 | 第15-23页 |
·提取各个组织中的总 RNA | 第15-16页 |
·RNA 的检测 | 第16页 |
·反转录方法 | 第16-17页 |
·反转录所得 cDNA 检测方法 | 第17页 |
·克隆测序 | 第17-20页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第17页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第17-19页 |
·目的片段产物的回收与纯化 | 第19页 |
·目的片段的克隆测序 | 第19-20页 |
·焦磷酸测序 | 第20-23页 |
·图像分析与数据录入 | 第23-24页 |
·SNP 的检读和数据录入 | 第23页 |
·氨基酸的分析 | 第23页 |
·单倍型的分析 | 第23页 |
·焦磷酸测序结果的分析 | 第23-24页 |
4 结果与分析 | 第24-36页 |
·线粒体 ND2 基因 5703A>T、5727T>G 突变的异质性定量分析 | 第24-30页 |
·组织总 RNA 完整性检测和 cDNA 质量检测 | 第24页 |
·5703A>T、5727T>G 位点不同等位基因的克隆测序 | 第24-25页 |
·焦磷酸测序(Pyrosequencing PCR) | 第25-27页 |
·鸡线粒体 ND2 在同一个体不同组织的异质性差异 | 第27-28页 |
·添加不同油脂对肉鸡线粒体 ND2 基因异质性的影响 | 第28-29页 |
·日粮 30%能量限制对肉鸡线粒体 ND2 异质性的影响 | 第29-30页 |
·ND2 基因变异/异质性的潜在丰富性 | 第30-36页 |
·目的片段扩增与胶回收 | 第30-31页 |
·阳性克隆的检测与表达条带的测序 | 第31-32页 |
·mtND2 基因的变异位点及对氨基酸的预测分析 | 第32页 |
·单倍型的分析 | 第32-36页 |
5 讨论 | 第36-38页 |
·RNA 质量的要求和其对后期试验的影响 | 第36页 |
·焦磷酸测序技术 | 第36页 |
·鸡线粒体 ND2 基因在同一个体不同组织间的异质性差异 | 第36-37页 |
·30%能量限饲对鸡线粒体 ND2 基因异质性的影响 | 第37页 |
·日粮中添加不同油脂对鸡线粒体 ND2 基因异质性的影响 | 第37-38页 |
6 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
Abstract | 第45-46页 |