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鸡线粒体ND2基因异质性及能量限制和油脂源对其影响

致谢第1-5页
目录第5-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-12页
   ·线粒体概述第8页
   ·mtDNA的遗传特性第8-9页
     ·母系遗传第8页
     ·进化特征第8-9页
     ·异质性第9页
     ·阈值效应第9页
   ·mtDNA异质性的产生机制第9-10页
   ·异质性的研究方法第10页
   ·异质性的研究现状第10-11页
   ·油脂源和能量限制对基因表达及线粒体功能的影响第11-12页
2 引言第12-13页
   ·研究的目的意义第12页
   ·研究内容和方法第12-13页
3 材料与方法第13-24页
   ·试验材料第13-15页
     ·试验样品第13页
     ·试验主要仪器第13-14页
     ·试验主要试剂与溶液配制第14-15页
     ·工具酶及试剂盒第15页
   ·试验方法第15-23页
     ·提取各个组织中的总 RNA第15-16页
     ·RNA 的检测第16页
     ·反转录方法第16-17页
     ·反转录所得 cDNA 检测方法第17页
     ·克隆测序第17-20页
       ·PCR 扩增目的片段第17页
       ·琼脂糖凝胶电泳第17-19页
       ·目的片段产物的回收与纯化第19页
       ·目的片段的克隆测序第19-20页
     ·焦磷酸测序第20-23页
   ·图像分析与数据录入第23-24页
     ·SNP 的检读和数据录入第23页
     ·氨基酸的分析第23页
     ·单倍型的分析第23页
     ·焦磷酸测序结果的分析第23-24页
4 结果与分析第24-36页
   ·线粒体 ND2 基因 5703A>T、5727T>G 突变的异质性定量分析第24-30页
     ·组织总 RNA 完整性检测和 cDNA 质量检测第24页
     ·5703A>T、5727T>G 位点不同等位基因的克隆测序第24-25页
     ·焦磷酸测序(Pyrosequencing PCR)第25-27页
     ·鸡线粒体 ND2 在同一个体不同组织的异质性差异第27-28页
     ·添加不同油脂对肉鸡线粒体 ND2 基因异质性的影响第28-29页
     ·日粮 30%能量限制对肉鸡线粒体 ND2 异质性的影响第29-30页
   ·ND2 基因变异/异质性的潜在丰富性第30-36页
     ·目的片段扩增与胶回收第30-31页
     ·阳性克隆的检测与表达条带的测序第31-32页
     ·mtND2 基因的变异位点及对氨基酸的预测分析第32页
     ·单倍型的分析第32-36页
5 讨论第36-38页
   ·RNA 质量的要求和其对后期试验的影响第36页
   ·焦磷酸测序技术第36页
   ·鸡线粒体 ND2 基因在同一个体不同组织间的异质性差异第36-37页
   ·30%能量限饲对鸡线粒体 ND2 基因异质性的影响第37页
   ·日粮中添加不同油脂对鸡线粒体 ND2 基因异质性的影响第37-38页
6 结论第38-39页
参考文献第39-45页
Abstract第45-46页

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