| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 大豆花叶病毒 | 第12-13页 |
| ·大豆花叶病毒的特性研究 | 第12页 |
| ·大豆花叶病毒的症状和危害 | 第12-13页 |
| 2 抗病基因 | 第13-18页 |
| ·抗病基因的结构特征 | 第13-15页 |
| ·LRR | 第14页 |
| ·NBS | 第14页 |
| ·LZ | 第14-15页 |
| ·TIR | 第15页 |
| ·STK | 第15页 |
| ·抗病基因的研究进展 | 第15-17页 |
| ·SMV抗病基因的研究 | 第17-18页 |
| 3 病毒诱导的基因沉默 | 第18-23页 |
| ·VIGS的原理 | 第18页 |
| ·VIGS载体的发展史 | 第18-21页 |
| ·VIGS的优点及局限性 | 第21页 |
| ·VIGS在植物基因功能研究中的应用 | 第21-23页 |
| ·VIGS在大豆抗病基因中的研究进展 | 第23页 |
| 4 本研究的内容及意义 | 第23-26页 |
| 第二章 大豆抗大豆花叶病毒候选基因的克隆及分析 | 第26-36页 |
| 2 材料和方法 | 第26-36页 |
| ·试验材料 | 第26-28页 |
| ·大豆品种和SMV株系 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-29页 |
| ·SMV接种及采样 | 第28页 |
| ·大豆总RNA的提取 | 第28页 |
| ·配制PCR反应液 | 第28页 |
| ·扩增产物连接 | 第28页 |
| ·挑取、鉴定和测序单克隆 | 第28-29页 |
| ·序列及定量分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-33页 |
| ·总RNA提取检测 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增产物检测 | 第30页 |
| ·菌液PCR检测 | 第30-31页 |
| ·测序结果分析 | 第31-32页 |
| ·基因GmZ15和GmR42表达量的比较分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 基于BPMV的VIGS体系验证 | 第36-44页 |
| 3 材料与方法 | 第36-44页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·试验品种及载体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·溶液及培养基的配制 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37-38页 |
| ·质粒提取 | 第37页 |
| ·体外转录 | 第37-38页 |
| ·体外侵染 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·体外转录检测 | 第38-40页 |
| ·侵染检测 | 第40-41页 |
| ·沉默植株的检测 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 利用VIGS验证大豆抗SC3候选基因的功能 | 第44-58页 |
| 4 材料与方法 | 第44-58页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·试验品种 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-46页 |
| ·候选基因引物的设计 | 第44-45页 |
| ·载体的构建 | 第45-46页 |
| ·VIGS过程 | 第46页 |
| ·沉默表型的鉴定 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-55页 |
| ·重组病毒载体的验证 | 第46-48页 |
| ·沉默植株的定量分析 | 第48-51页 |
| ·基因沉默后的表型 | 第51-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第五章 全文结论与创新点 | 第58-60页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 本文创新点 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 附录 | 第70-74页 |
| 附录1 RNA提取步骤 | 第70页 |
| 附录2 溶液及培养基的配制 | 第70-71页 |
| 附录3 质粒提取步骤及实验前准备 | 第71-74页 |
| 文章发表情况 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |