多糖降解菌的筛选鉴定及培养条件优化—褐藻胶和菊芋降解菌的分离纯化
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| ·褐藻胶和菊芋简介 | 第10-12页 |
| ·褐藻胶的来源 | 第10页 |
| ·褐藻胶的结构 | 第10-11页 |
| ·菊芋 | 第11-12页 |
| ·褐藻胶降解方法和菊粉制备方法 | 第12-13页 |
| ·褐藻胶的降解方法 | 第12-13页 |
| ·菊粉的制备 | 第13页 |
| ·褐藻寡糖和低聚果糖的研究 | 第13-16页 |
| ·褐藻寡糖的生物活性研究 | 第13-14页 |
| ·低聚果糖的生物活性 | 第14-15页 |
| ·果糖的生理活性 | 第15-16页 |
| ·多糖水解酶的研究现状 | 第16-18页 |
| ·褐藻胶裂解酶 | 第16-17页 |
| ·褐藻胶裂解酶的降解机制和分类 | 第16页 |
| ·褐藻胶裂解酶的来源 | 第16-17页 |
| ·菊粉酶 | 第17-18页 |
| ·菊粉酶的降解机制及分类 | 第17页 |
| ·菊粉酶的来源 | 第17-18页 |
| ·多糖降解酶酶活的测定 | 第18-19页 |
| ·褐藻胶裂解酶的酶活测定方法 | 第18-19页 |
| ·菊粉酶酶活测定方法 | 第19页 |
| ·课题来源和研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 褐藻胶降解菌株的筛选及鉴定 | 第20-33页 |
| ·实验试剂与仪器设备 | 第20-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·菌株的筛选 | 第23-28页 |
| ·取样 | 第23页 |
| ·样品预处理 | 第23页 |
| ·初筛 | 第23页 |
| ·复筛 | 第23页 |
| ·葡萄糖标准曲线的绘制 | 第23-24页 |
| ·DNS 法测定褐藻胶裂解酶的酶活 | 第24页 |
| ·试剂盒法提取细菌 DNA | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶观察 DNA | 第25页 |
| ·应用 PCR 技术鉴定细菌 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物的胶回收，连接，转化及挑斑 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的 T 克隆 | 第27-28页 |
| ·结果分析 | 第28-32页 |
| ·葡萄糖标准曲线及吸光度与酶活关系曲线的绘制 | 第28-29页 |
| ·初筛及复筛结果 | 第29-30页 |
| ·菌落形体观察 | 第30页 |
| ·菌株的 16S rDNA 分析 | 第30-32页 |
| ·结论 | 第32-33页 |
| 第三章 菊粉酶的筛选及降解产物的分析 | 第33-45页 |
| ·材料与方法 | 第33-35页 |
| ·实验常用仪器 | 第33-34页 |
| ·实验常用试剂 | 第34-35页 |
| ·褐藻胶降解菌筛选方法 | 第35-37页 |
| ·菊芋全粉的制备 | 第35页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第35-36页 |
| ·采集样品及预处理 | 第36页 |
| ·平板初筛及菌种纯化 | 第36页 |
| ·菌株保藏 | 第36页 |
| ·种子液的制备 | 第36-37页 |
| ·酶活的测定 | 第37页 |
| ·HPLC 法分析酶解底物 | 第37-38页 |
| ·分析检测设备 | 第37页 |
| ·葡萄糖、果糖、蔗糖单标储备液的配制 | 第37页 |
| ·低聚果糖混合标准工作溶液的配制 | 第37页 |
| ·样品的预处理 | 第37-38页 |
| ·检测条件 | 第38页 |
| ·标准曲线 | 第38页 |
| ·精密度实验 | 第38页 |
| ·加标回收率实验 | 第38页 |
| ·筛菌结果 | 第38-41页 |
| ·涂布结果与分析 | 第38-39页 |
| ·划线结果与分析 | 第39页 |
| ·镜检结果 | 第39-40页 |
| ·微生物酶活的测定结果与分析 | 第40-41页 |
| ·酶解产物结果 | 第41-44页 |
| ·蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的 HPLC 谱图 | 第41页 |
| ·2%的菊粉底物液相色谱图 | 第41-42页 |
| ·马克斯克鲁维的 HPLC 谱图分析 | 第42页 |
| ·菌株 JY30 谱图分析 | 第42-43页 |
| ·标准曲线 | 第43页 |
| ·精密度测定结果 | 第43-44页 |
| ·回收率测定结果 | 第44页 |
| ·结论 | 第44-45页 |
| 第四章 响应面法优化发酵条件 | 第45-55页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·实验常用仪器 | 第45-46页 |
| ·实验常用试剂 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-48页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第47页 |
| ·菌悬液的制备 | 第47页 |
| ·果糖标准曲线的制备 | 第47页 |
| ·单因素实验 | 第47页 |
| ·中心组合实验 | 第47-48页 |
| ·验证实验 | 第48页 |
| ·结果分析 | 第48-54页 |
| ·果糖标准曲线的绘制 | 第48页 |
| ·不同氮源单因素实验结果 | 第48-49页 |
| ·不同浓度碳源单因素实验结果 | 第49-50页 |
| ·不同 pH 单因素实验结果 | 第50页 |
| ·中心组合实验结果 | 第50-52页 |
| ·响应面交互作用分析及最佳培养成分确定 | 第52-54页 |
| ·响应面验证试验 | 第54页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| 结论及展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第63-64页 |
