| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 生物节律 | 第9页 |
| 2 生物钟 | 第9页 |
| 3 生物钟的特点 | 第9-10页 |
| 4 生物钟与光周期 | 第10页 |
| 5 生物钟的分布 | 第10-11页 |
| 6 生物钟基因 | 第11-13页 |
| ·Period | 第11页 |
| ·Cryptochrome | 第11-12页 |
| ·Bmall | 第12页 |
| ·Clock | 第12-13页 |
| 7 生物钟分子调控信号途径 | 第13页 |
| 8 生物钟环路模型 | 第13-14页 |
| 9 生物钟研究现状 | 第14-16页 |
| 10 生物钟与激素的关系 | 第16-19页 |
| ·褪黑激素 | 第16-18页 |
| ·甲状腺激素 | 第18页 |
| ·皮质酮 | 第18-19页 |
| 11 两栖类生物节律研究进展 | 第19-21页 |
| 12 研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 中华大蟾蜍生物钟等相关基因的克隆及实时荧光定量表达分析方法的建立 | 第23-43页 |
| 1 材料与方法 | 第23-29页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·主要试剂与配制方法 | 第23-24页 |
| ·分子克隆 | 第24-28页 |
| ·简并引物设计 | 第24页 |
| ·总RNA提取 | 第24-25页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第25页 |
| ·普通PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR产物纯化与检测 | 第26-27页 |
| ·连接与转化 | 第27页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第27-28页 |
| ·DNA测序与分析 | 第28页 |
| ·SYBR Green荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第28-29页 |
| ·荧光定量RT-PCR引物设计 | 第28页 |
| ·总RNA提取 | 第28页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28页 |
| ·PCR产物纯化与检测 | 第28页 |
| ·连接与转化 | 第28页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第28页 |
| ·DNA測序与分析 | 第28-29页 |
| ·Real-time PCR | 第29页 |
| 2 结果和分析 | 第29-43页 |
| ·中华大蟾蜍组织总RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·PCR引物设计和cDNA序列分析 | 第30-40页 |
| ·SYBR Green荧光定量RT-PCR分析方法的建立 | 第40-43页 |
| ·Real-time PCR引物设计 | 第40页 |
| ·SYBR Green荧光定量RT-PCR扩增特异性验证 | 第40-43页 |
| 第三章 中华大蟾蜍生物钟基因表达及外周激素水平的昼夜节律研究 | 第43-56页 |
| 1 材料与方法 | 第43-44页 |
| ·动物收集与驯化 | 第43页 |
| ·取样 | 第43页 |
| ·褪黑激素、甲状腺激素T3和T4的测定 | 第43-44页 |
| ·生物钟基因和甲状腺激素受体表达的定量分析 | 第44页 |
| ·数据分析 | 第44页 |
| 2 结果 | 第44-52页 |
| ·中华大蟾蜍神经视网膜组织内生物钟基因的表达模式 | 第44-47页 |
| ·中华大蟾蜍脑组织内生物钟基因的表达模式 | 第47-49页 |
| ·中华大蟾蜍血浆中褪黑素(MT)水平的昼夜变化 | 第49-50页 |
| ·中华大蟾蜍血浆中皮质酮(CORT)水平的昼夜变化 | 第50-51页 |
| ·中华大蟾蜍脑和神经视网膜组织甲状腺激素受体β(THRβ)表达及血浆甲状腺激素(T3和T4)水平的昼夜变化 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-56页 |
| ·生物钟相关基因mRNA表达的昼夜节律 | 第52-54页 |
| ·外周激素水平的昼夜节律 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第71-75页 |
