| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-33页 |
| ·氨基酸受体研究简介 | 第16-26页 |
| ·充当氨基酸受体的功能要素 | 第16-17页 |
| ·已经鉴定出的氨基酸受体简介 | 第17-24页 |
| ·消化道中表达的味觉受体的研究进展 | 第24-26页 |
| ·小肽转运蛋白载体 1 简介 | 第26-29页 |
| ·pepT1 的分子结构 | 第27-28页 |
| ·PepT1mRNA在动物组织中的表达 | 第28页 |
| ·PepT1 的转运机制 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR简介 | 第29-33页 |
| ·实时荧光定量PCR的过程 | 第29页 |
| ·一步法与两步法实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
| ·荧光染料的种类 | 第30-31页 |
| ·实时荧光定量PCR的类型 | 第31-33页 |
| 2 实验技术路线、材料和方法 | 第33-47页 |
| ·实验技术路线 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·实验样本的采集 | 第34页 |
| ·实验试剂剂 | 第34页 |
| ·实验所用溶液与培养基的配制 | 第34-35页 |
| ·实验仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-45页 |
| ·提取各组织的总RNA | 第36-37页 |
| ·所提取的总RNA的检测 | 第37页 |
| ·反转录反应 | 第37-38页 |
| ·引物和TaqMan探针的设计 | 第38-40页 |
| ·普通梯度PCR | 第40-41页 |
| ·实时荧光定量PCR条件的摸索 | 第41页 |
| ·质粒标准品的制作 | 第41-44页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第44-45页 |
| ·实验统计分析 | 第45-47页 |
| ·2-△△Ct 方法的数学推导 | 第45-46页 |
| ·内标及相关参照因子的选择 | 第46-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-63页 |
| ·提取的总RNA | 第47页 |
| ·所研究基因T1R1、T1R3、pepT1 和管家基因β-actin最佳退火温度 | 第47-49页 |
| ·T1R1、T1R3、pepT1 和β-actin特异性目的片段的回收 | 第49页 |
| ·菌液PCR鉴定阳性重组子 | 第49-50页 |
| ·提取质粒测序 | 第50-54页 |
| ·目的基因和管家基因扩增效率的验证 | 第54-55页 |
| ·鲁西牛消化道各段中T1R1、T1R3 及pepT1 mRNA的相对表达结果 | 第55-62页 |
| ·鲁西牛消化道各段T1R1 基因mRNA的相对表达 | 第55-57页 |
| ·鲁西牛消化道各段T1R3 基因mRNA的相对表达 | 第57-59页 |
| ·鲁西牛消化道各段pepT1 基因mRNA的相对表达 | 第59-61页 |
| ·T1R1、T1R3、pepT1 基因mRNA在鲁西牛消化道同一段的相对表达 | 第61-62页 |
| ·T1R1、T1R3、pepT1 基因与氨基酸吸收调控的相关性分析 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| ·相关实验方法的改进探讨 | 第63-65页 |
| ·牛消化组织总RNA的提取、检测 | 第63页 |
| ·反转录引物的选择 | 第63-64页 |
| ·小片段DNA的回收、纯化 | 第64页 |
| ·重组子的转化、鉴定 | 第64-65页 |
| ·实验结果的分析与讨论 | 第65-66页 |
| 5 结论与创新点 | 第66-68页 |
| ·结论 | 第66-67页 |
| ·创新点 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-80页 |
| 作者简介 | 第80-82页 |
| 学位论文数据集 | 第82页 |
