| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| 1 前言 | 第13页 |
| 2 促卵泡素(FSH)研究进展 | 第13-17页 |
| ·FSH分子研究进展 | 第13-14页 |
| ·FSH分子结构 | 第13-14页 |
| ·FSH的分泌机制 | 第14页 |
| ·FSH基因研究进展 | 第14-17页 |
| ·FSH基因的结构特征 | 第14-15页 |
| ·FSH基因与动物繁殖性状的关系 | 第15页 |
| ·调控FSH的信号通路 | 第15-17页 |
| 3 融合基因的研究进展 | 第17-18页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 鹅FSH基因的克隆与生物信息学分析 | 第19-38页 |
| 1 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·实验样品的来源及组织样品采集 | 第19页 |
| ·实验试剂及药品 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·宿主菌和载体 | 第19-20页 |
| ·溶液配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-31页 |
| ·RNA提取 | 第20页 |
| ·RT-PCR扩增及产物克隆测序 | 第20-30页 |
| ·序列分析 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·总RNA提取检测结果 | 第31页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| ·RACE结果 | 第32-33页 |
| ·3'RACE结果 | 第32页 |
| ·5'RACE结果 | 第32-33页 |
| ·鹅FSHβ cDNA序列全长获得 | 第33-34页 |
| ·鹅FSHα、FSHβ基因的生物信息学分析 | 第34-36页 |
| ·鹅FSHα基因生物信息学分析 | 第34-35页 |
| ·鹅FSHβ基因生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| ·RACE技术的影响因素 | 第36页 |
| ·鹅FSHα基因克隆及序列分析 | 第36-37页 |
| ·鹅FSHβ基因克隆与序列分析 | 第37页 |
| ·鹅FSH基因的特征 | 第37-38页 |
| 第三章 鹅不同生殖时期FSHβ基因mRNA表达量变化 | 第38-46页 |
| 1 实验材料与方法 | 第38-41页 |
| ·实验材料及来源 | 第38-39页 |
| ·主要仪器和设备 | 第39页 |
| ·实验试剂 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·样品采集 | 第39页 |
| ·RNA的提取 | 第39页 |
| ·引物的设计与合成 | 第39-40页 |
| ·cDNA的合成 | 第40页 |
| ·半定量PCR反应 | 第40-41页 |
| ·荧光定量PCR反应 | 第41页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·不同组织鹅FSHβ mRNA RT-PCR检测 | 第41-42页 |
| ·荧光定量PCR反应 | 第42-44页 |
| ·荧光定量PCR扩增的溶解曲线 | 第42页 |
| ·浙东白鹅不同生殖时期FSHβ基因的表达变化 | 第42-43页 |
| ·浙东白鹅与扬州鹅产蛋期FSHβ mRNA表达差异 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| ·样本的选择 | 第44页 |
| ·影响荧光定量PCR的主要因素 | 第44页 |
| ·不同组织鹅FSHβ mRNA表达 | 第44-45页 |
| ·浙东白鹅不同生殖时期FSHβ基因的表达变化 | 第45页 |
| ·浙东白鹅与扬州鹅产蛋期FSHβ mRNA表达差异 | 第45-46页 |
| 第四章 鹅融合基因FSH在cos-7细胞中的表达 | 第46-65页 |
| 1 材料与方法 | 第46-57页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·实验质粒 | 第46页 |
| ·实验载体和菌株 | 第46页 |
| ·细胞株 | 第46页 |
| ·实验试剂 | 第46页 |
| ·实验仪器及设备 | 第46-47页 |
| ·溶液配制 | 第47页 |
| ·引物的合成和测序 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-57页 |
| ·CTP序列扩增 | 第47页 |
| ·鹅pVITRO_2-FSHβ载体的构建 | 第47-49页 |
| ·鹅异二聚体pPVITRO_2-FSHαβ-CTP载体的构建 | 第49-53页 |
| ·鹅单体pVITRO_2-FSHβ-CTP-α的构建 | 第53-56页 |
| ·转染COS-7细胞 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-63页 |
| ·CTP扩增结果 | 第57-58页 |
| ·FSHaβ-CTP的构建结果 | 第58页 |
| ·FSHβ-CTP的PCR扩增结果 | 第58页 |
| ·FSHα基因PCR扩增结果 | 第58页 |
| ·单体FSHβ-CTP-α的PCR扩增结果 | 第58-59页 |
| ·鹅异二聚体pVITRO_2-FSHαβ-CTP表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·pVITRO_2-FSHβ-CTP的构建 | 第59页 |
| ·pVITRO_2-FSHαβ-CTP的构建 | 第59-60页 |
| ·鹅单体pVITRO_2-FSHβ-CTP-α表达载体的构建 | 第60页 |
| ·转染细胞及表达结果 | 第60-63页 |
| ·放免检测 | 第60-61页 |
| ·转染融合基因重组质粒后,FSH信号通路中某些相关基因表达变化 | 第61-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| ·融合基因注意事项 | 第63页 |
| ·鹅FSH蛋白放免检测 | 第63-64页 |
| ·转染融合基因重组质粒后,FSH信号通路中相关基因表达变化 | 第64-65页 |
| ·FSHβ基因表达 | 第64页 |
| ·GnRH基因的表达 | 第64页 |
| ·GH基因的表达 | 第64页 |
| ·BMP基因的表达 | 第64-65页 |
| 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
| 攻读学位期间发表的会议论文 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
