| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 0 前言 | 第13-16页 |
| 1 有机磷农药生物降解的研究进展 | 第16-31页 |
| ·有机磷农药的污染和危害 | 第16-17页 |
| ·有机磷农药的微生物降解 | 第17-22页 |
| ·有机磷水解酶的表面展示 | 第22-27页 |
| ·表面展示有机磷水解酶的工程菌的固定化 | 第27-29页 |
| ·研究目的和技术路线 | 第29-31页 |
| 2 假单胞菌 WBC-3 甲基对硫磷水解酶在解脂耶罗威亚酵母上的表面展示 | 第31-60页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·方法 | 第33-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-56页 |
| ·Pseudomonas sp.WBC-3 甲基对硫磷水解酶基因的定点突变 | 第45-46页 |
| ·构建甲基对硫磷水解酶表面展示表达质粒 | 第46-49页 |
| ·Y. lipolytica Po1h 转化 | 第49-50页 |
| ·转化子筛选及验证 | 第50-52页 |
| ·转化子表面展示甲基对硫磷水解酶活力的测定 | 第52-53页 |
| ·表面展示甲基对硫磷水解酶表达的最佳时间 | 第53-54页 |
| ·免疫荧光检测 | 第54页 |
| ·蛋白酶敏感性分析 | 第54-55页 |
| ·表面展示甲基对硫磷水解酶对 Y. lipolytica Po1h 生长的影响 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 3 表面展示甲基对硫磷水解酶酶学性质和全细胞酶降解甲基对硫磷的研究 | 第60-73页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-69页 |
| ·表面展示甲基对硫磷水解酶酶学性质研究 | 第63-65页 |
| ·利用全细胞酶降解甲基对硫磷 | 第65-68页 |
| ·全细胞酶储存稳定性 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 4 假单胞菌 WBC-3 甲基对硫磷水解酶与绿色木霉内切葡聚糖酶 IV纤维素结合域的融合蛋白在解脂耶罗威亚酵母上的表面展示 | 第73-91页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·方法 | 第75-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-88页 |
| ·绿色木霉内切葡聚糖酶 IV (EG IV)基因的 PCR 扩增 | 第80-82页 |
| ·MPH-CBD 融合片段的构建 | 第82页 |
| ·质粒 pINA1317-YlCWP110-MPH-CBD 的构建 | 第82-84页 |
| ·转化片段的获得 | 第84-85页 |
| ·转化子的 PCR 检测 | 第85页 |
| ·高酶活转化子的筛选 | 第85-86页 |
| ·免疫荧光检测 | 第86-87页 |
| ·蛋白酶敏感性分析 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| ·小结 | 第90-91页 |
| 5 表面展示 MPH-CBD 融合蛋白的解脂耶罗威亚酵母的固定化及甲基对硫磷的降解研究 | 第91-101页 |
| ·材料 | 第91页 |
| ·方法 | 第91-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-98页 |
| ·纤维素吸附研究 | 第93-97页 |
| ·固定化全细胞酶对甲基对硫磷的降解特性 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-99页 |
| ·小结 | 第99-101页 |
| 6 结论与创新点 | 第101-104页 |
| ·结论 | 第101-102页 |
| ·创新点 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-111页 |
| 个人简历及发表的学术论文 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
