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桑树花青素生物合成相关基因的鉴定及功能研究

目录第1-8页
摘要第8-12页
ABSTRACT第12-17页
第一章 文献综述第17-33页
   ·概述第17页
   ·花青素的分布、结构及性质第17-19页
     ·花青素的分布第17-18页
     ·花青素的结构第18页
     ·花青素的理化性质第18-19页
   ·花青素的生物合成第19-26页
     ·花青素生物合成途径第19-20页
     ·花青素生物合成相关基因第20-26页
   ·花青素的生理功能及应用第26-28页
     ·花青素的生理功能第27页
     ·花青素的应用第27-28页
   ·桑树花青素研究进展第28-31页
     ·桑树花青素的分离鉴定第28-29页
     ·桑树花青素的生物学活性分析第29-31页
   ·结语第31-33页
第二章 引言第33-35页
   ·研究目的及意义第33页
   ·主要研究内容第33-34页
   ·研究路线第34-35页
第三章 桑树花青素生物合成相关基因的鉴定、克隆及信息学分析第35-57页
   ·材料与数据第35-37页
     ·材料第35页
     ·序列信息的获得第35页
     ·主要使用软件第35-36页
     ·主要使用试剂及溶液配制方法第36-37页
     ·主要使用仪器第37页
   ·实验方法第37-41页
     ·桑树花青素生物合成相关基因的鉴定第37-38页
     ·RNA提取及质量检测第38页
     ·cDNA第一链合成第38-39页
     ·花青素生物合成相关基因的克隆第39-41页
     ·花青素生物合成相关基因的多序列比对与系统发生分析第41页
   ·结果与分析第41-54页
     ·桑树花青素生物合成相关基因的预测第41-44页
     ·桑树花青素生物合成相关基因的克隆及信息学分析第44-53页
     ·桑树花青素生物合成相关基因上游转录调控位点分析第53-54页
   ·总结与讨论第54-57页
第四章 桑树花青素生物合成相关基因的表达分析和花青素含量测定第57-91页
   ·材料第57-64页
     ·生物材料第57-58页
     ·主要使用试剂及溶液配制方法第58-64页
     ·主要使用仪器第64页
   ·实验方法第64-76页
     ·RNA提取及质量检测第64页
     ·cDNA第一链的合成第64页
     ·桑树基因组DNA提取第64-65页
     ·Southern blotting第65-68页
     ·荧光定量PCR(qRT-PCR)第68-70页
     ·DFR和ANS的原核表达、蛋白纯化和抗体制备第70-74页
     ·桑树蛋白质的提取第74页
     ·Western blotting第74-75页
     ·桑树花青素的提取及UPLC检测第75-76页
   ·结果与分析第76-87页
     ·花青素生物合成相关基因在川桑中的组织表达分析第76-77页
     ·花青素生物合成相关基因在三个桑树品种中的拷贝数分析第77-80页
     ·花青素生物合成相关基因在两种不同果色桑椹成熟过程中的表达分析第80-81页
     ·DFR和ANS的原核表达、蛋白纯化和抗体制备第81-84页
     ·ANS和DFR的Western blotting第84-85页
     ·桑椹花青素的提取和UPLC检测第85-87页
   ·总结与讨论第87-91页
第五章 桑树花青素生物合成相关基因的功能研究第91-109页
   ·材料与试剂第91-96页
     ·生物材料第91页
     ·主要使用试剂及溶液配制方法第91-96页
     ·主要使用仪器第96页
   ·实验方法第96-100页
     ·MnDFR启动子-GUS报告载体的构建第96-97页
     ·转基因过表达载体的构建第97-98页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第98页
     ·烟草叶盘转化法第98-99页
     ·拟南芥浸花法转化第99-100页
     ·转基因植株中日的基因表达水平的检测第100页
   ·结果与分析第100-107页
     ·MnDFR启动子表达模式及受调控分析第100-102页
     ·桑树花青素生物合成相关基因的转基因载体构建第102-104页
     ·桑树ANS和DFR在拟南芥中的异源表达分析第104-105页
     ·桑树花青素生物合成相关基因在烟草中的异源表达分析第105-107页
   ·总结与讨论第107-109页
第六章 综合与结论第109-113页
论文创新点第113-115页
参考文献第115-125页
缩略词表第125-127页
附录第127-133页
在读期间发表文章及参研课题第133-135页
致谢第135页

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