| 縮略语表 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 脂肪生成(Adipogenesis) | 第13-15页 |
| 2 胚胎干细胞(ESCs)研究进展 | 第15-17页 |
| ·胚胎干细胞 | 第15-16页 |
| ·孤雌胚胎干细胞(pESCs) | 第16-17页 |
| 3 糖组学研究进展 | 第17-18页 |
| 4 糖芯片技术研究进展 | 第18-21页 |
| ·凝集素芯片技术 | 第18-21页 |
| ·糖基转移酶芯片技术 | 第21页 |
| 5 本实验的设计与意义 | 第21-23页 |
| 正文 | 第23-62页 |
| 第一部分 胚胎干细胞(ESCs)及孤雌胚胎干细胞(pESCs)的培养及基本特性检测 | 第23-31页 |
| 1 材料 | 第23-24页 |
| ·细胞来源及实验动物 | 第23页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·主要试剂配制 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-26页 |
| ·ESCs和pESCs的培养 | 第24-25页 |
| ·拟胚体的制备 | 第25页 |
| ·免疫荧光检测胚胎干细胞全能性 | 第25-26页 |
| ·畸胎瘤形成实验 | 第26页 |
| ·细胞增殖能力检测 | 第26页 |
| 3 实验结果 | 第26-29页 |
| ·ESCs及pESCs的形态学观察及比较 | 第26-27页 |
| ·胚胎干细胞及孤雌胚胎干细胞体外检测 | 第27-28页 |
| ·胚胎干细胞及孤雌胚胎干细胞体内检测 | 第28页 |
| ·胚胎干细胞及孤雌胚胎干细胞细胞增殖的比较 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 小结 | 第30-31页 |
| 第二部分 胚胎干细胞(ESCs)及孤雌胚胎干细胞(pESCs)的三系分化能力 | 第31-40页 |
| 1 材料 | 第31-32页 |
| ·细胞来源 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| ·主要试剂配制 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-35页 |
| ·胚胎干细胞及拟胚体的培养 | 第32页 |
| ·间充质样干细胞的获得 | 第32页 |
| ·成骨诱导 | 第32页 |
| ·软骨诱导 | 第32页 |
| ·脂肪诱导 | 第32-33页 |
| ·条件培养基诱导培养下相关基因表达的检测 | 第33-35页 |
| ·茜素红染色 | 第35页 |
| ·番红O染色 | 第35页 |
| ·油红O染色 | 第35页 |
| 3 实验结果 | 第35-38页 |
| ·胚胎干细胞三系分化形态学的观察 | 第35-37页 |
| ·胚胎干细胞三系分化基因水平检测 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 5 小结 | 第39-40页 |
| 第三部分 胚胎干细胞(ESCs)及孤雌胚胎干细胞(pESCs)向脂肪细胞分化的研究 | 第40-49页 |
| 1 材料 | 第40-41页 |
| ·细胞来源 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40-41页 |
| 2 方法 | 第41-42页 |
| ·胚胎干细胞向脂肪细胞的诱导步骤 | 第41页 |
| ·实时定量(real time)PCR检测 | 第41-42页 |
| ·油红O阳性率统计 | 第42页 |
| 3 实验结果 | 第42-46页 |
| ·胚胎干细胞向脂肪细胞分化过程中形态学的观察 | 第42-44页 |
| ·胚胎干细胞向脂肪细胞分化过程中蛋白水平的检测 | 第44页 |
| ·胚胎干细胞向脂肪细胞分化过程中基因水平的检测 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 5 小结 | 第47-49页 |
| 第四部分 胚胎干细胞(ESCs)及孤雌胚胎干细胞(pESCs)在向脂肪细胞分化过程中蛋白糖基化变化的研究 | 第49-62页 |
| 1 材料 | 第49-50页 |
| ·细胞来源 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-52页 |
| ·胚胎干细胞培养及向脂肪细胞的分化 | 第50页 |
| ·总蛋白的提取 | 第50页 |
| ·凝集素芯片制备 | 第50页 |
| ·蛋白样本的标记与孵育 | 第50-51页 |
| ·凝集素芯片结果获取与分析 | 第51页 |
| ·凝集素组化 | 第51页 |
| ·实时定量pcr检测糖基转移酶表达水平 | 第51-52页 |
| 3 实验结果 | 第52-56页 |
| ·凝集素芯片实验结果 | 第52-53页 |
| ·凝集素组化检测糖链在细胞中的分布 | 第53-56页 |
| ·糖基转移酶实时定量pcr检测结果 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 小结 | 第57-62页 |
| 全文总结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
