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小麦应答农杆菌转化相关基因的筛选及TaUGT在小麦与农杆菌互作过程中的功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
图目录第13-15页
表目录第15-16页
英文缩略表第16-17页
第一章 引言第17-27页
   ·植物响应微生物侵染的基本机制第17-19页
     ·植物非寄主抗性第17页
     ·植物的先天免疫系统第17-18页
     ·基因对基因假说第18页
     ·植物响应微生物的主要生化过程及信号通路第18-19页
   ·植物与农杆菌互作的分子生物学研究进展第19-22页
     ·农杆菌致病机制的研究第19-20页
     ·植物对农杆菌的应答反应第20-22页
   ·农杆菌介导的小麦遗传转化机制的研究进展第22页
   ·筛选差异表达基因的方法第22-24页
     ·抑制性差减杂交(SSH)第23页
     ·蛋白质组分析(proteome analysis)第23页
     ·数字化表达谱测序(RNA-seq)第23-24页
   ·植物中葡萄糖基转移酶(UGT)的研究进展第24页
   ·研究目的和意义第24-25页
   ·技术路线第25-27页
第二章 小麦应答农杆菌转化相关基因的筛选第27-61页
   ·研究材料与方法第27-42页
     ·小麦幼胚的预培养第27-28页
     ·质粒 DNA 提取第28页
     ·农杆菌的培养及转化第28-29页
     ·农杆菌侵染小麦幼胚第29页
     ·抑制性差减杂交第29-34页
     ·蛋白质组分析第34-37页
     ·数字化表达谱测序第37-39页
     ·三种方法所得差异表达基因的综合分析第39-40页
     ·Real-time PCR 验证差异基因相对表达量第40-42页
   ·研究结果第42-57页
     ·抑制性差减杂交结果第42-44页
     ·蛋白质组研究结果第44-48页
     ·数字化表达谱测序结果第48-55页
     ·三种方法的综合对比分析结果第55-57页
     ·实时定量 PCR 验证差异表达基因的相对表达量第57页
   ·讨论第57-61页
第三章 TaUGT 在小麦与农杆菌互作过程中的功能研究第61-101页
   ·研究材料与方法第62-78页
     ·Real-time PCR 验证 TaUGT 基因在小麦幼胚经农杆菌侵染不同时间后的相对表达量第62-63页
     ·TaUGT 基因的克隆第63-64页
     ·TaUGT 基因的进化分析第64页
     ·TaUGT 基因的染色体定位预测第64页
     ·TaUGT 基因拷贝数分析第64-66页
     ·小麦 TaUGT 亚细胞定位第66-67页
     ·TaUGT 基因转化拟南芥第67-68页
     ·T1 代转 TaUGT 拟南芥筛选第68-69页
     ·T2 代转 TaUGT 拟南芥阳性株筛选第69-70页
     ·农杆菌侵染表达 TaUGT 基因拟南芥植株效率的检测第70-71页
     ·GUS 基因瞬时表达检测第71页
     ·TaUGT 转入烟草第71-72页
     ·T0 代阳性植株筛选第72页
     ·过表达 TaUGT 烟草农杆菌转化效率检测第72页
     ·载体上的 TaUGT 在转化过程中所起作用的研究第72页
     ·农杆菌在过表达 TaUGT 烟草根系吸附状况观察第72-73页
     ·小麦中瞬时过表达 TaUGT 及利用反义 RNA 瞬时抑制 TaUGT第73-74页
     ·TaUGT 瞬时过表达及抑制效果的检测第74页
     ·农杆菌转化轰击后的小麦愈伤组织第74-76页
     ·TaUGT 在真核细胞中的体外表达第76-78页
   ·研究结果第78-98页
     ·与农杆菌共培养不同时间后小麦幼胚中 TaUGT 的表达量分析第78页
     ·TaUGT 基本分子信息第78-80页
     ·TaUGT 在染色体上定位预测第80-81页
     ·TaUGT 的亚细胞定位第81-84页
     ·TaUGT 拷贝数分析第84页
     ·过表达 TaUGT 对农杆菌转化拟南芥效果的影响第84-87页
     ·TaUGT 基因向烟草转化过程中对转化效率的影响第87-88页
     ·过表达 TaUGT 对农杆菌转化烟草效果的影响第88-89页
     ·瞬时过表达 TaUGT 对农杆菌转化小麦的影响第89-91页
     ·瞬时抑制 TaUGT 对农杆菌转化小麦的影响第91-97页
     ·TaUGT 体外对农杆菌生长的影响第97-98页
   ·讨论第98-101页
第四章 全文结论第101-103页
   ·构建了小麦应答农杆菌转化的差异表达基因(蛋白)文库第101页
   ·明确了 TAUGT 基因的分子信息第101页
   ·TAUGT 在农杆菌侵染小麦组织的初期起调控作用第101-102页
   ·过表达 TAUGT 可以增强植物对农杆菌的抗性第102页
   ·抑制 TAUGT 表达可以增加农杆菌转化后小麦成熟胚愈伤组织分化率第102-103页
参考文献第103-114页
附录第114-148页
致谢第148-149页
作者简历第149页

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