致病性坏死梭杆菌外膜蛋白提取和原核表达及免疫活性研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-21页 |
| ·坏死梭杆菌 | 第14-15页 |
| ·坏死梭杆菌的研究现状 | 第15-18页 |
| ·流行病学 | 第15页 |
| ·病理变化 | 第15页 |
| ·致病机理 | 第15-18页 |
| ·细菌外膜蛋白的研究现状 | 第18-20页 |
| ·OMP的结构 | 第18页 |
| ·OMP的致病机理 | 第18-19页 |
| ·OMP与 LPS | 第19页 |
| ·OMP的免疫原性 | 第19-20页 |
| ·结束语 | 第20-21页 |
| 第2章 坏死梭杆菌外膜蛋白的粗提取及免疫活性分析 | 第21-35页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·菌种的复苏 | 第22页 |
| ·OMP的提取 | 第22-23页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定 | 第23-24页 |
| ·非变性蛋白质电泳（ Native-page ） | 第24-25页 |
| ·OMP含量测定 | 第25-26页 |
| ·Western blot | 第26页 |
| ·小鼠体内接种试验 | 第26页 |
| ·接种小鼠病理学检测 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-33页 |
| ·坏死梭杆菌的培养 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定 | 第27-28页 |
| ·非变性蛋白质电泳 | 第28-29页 |
| ·OMP含量 | 第29页 |
| ·Western blot分析 | 第29-30页 |
| ·毒性检测 | 第30-32页 |
| ·肝脏病理组织学检测 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·坏死梭杆菌的培养 | 第33页 |
| ·OMP的提取 | 第33-34页 |
| ·OMP的免疫活性与毒性 | 第34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 坏死梭杆菌外膜蛋白的原核表达及特性鉴定 | 第35-51页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·数据来源 | 第35页 |
| ·菌种和载体 | 第35页 |
| ·工具酶、试剂盒及主要试剂 | 第35页 |
| ·主要设备 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-42页 |
| ·设计引物 | 第36页 |
| ·目的基因的扩增 | 第36页 |
| ·目的基因克隆与鉴定 | 第36-38页 |
| ·原核表达载体构建 | 第38-40页 |
| ·目的蛋白的诱导表达与检测 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白和提取 OMP 对细胞的毒性 | 第41-42页 |
| ·培养细胞 | 第41-42页 |
| ·MTS 试验 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-48页 |
| ·目的片段的克隆与鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·诱导表达 | 第44页 |
| ·Western blot | 第44-47页 |
| ·重组蛋白和提取 OMP 对细胞毒性试验 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·克隆质粒与表达质粒的构建 | 第48页 |
| ·阳性质粒的筛选 | 第48页 |
| ·诱导表达 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白的免疫活性和对细胞的毒性 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录 | 第59-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
