| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-6页 |
| 英文缩略词表 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述与研究内容 | 第10-14页 |
| ·土壤中弓形虫研究现状 | 第10-13页 |
| ·弓形虫 529 bp 基因序列的特征及其在研究中的应用 | 第13页 |
| ·研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 土壤中弓形虫检测方法的建立 | 第14-41页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·虫株、基因与载体 | 第14-15页 |
| ·主要实验试剂 | 第15页 |
| ·试验方法 | 第15-26页 |
| ·弓形虫 RH 株速殖子培养 | 第15页 |
| ·弓形虫 RH 株卵囊的培养、分离与纯化 | 第15-16页 |
| ·弓形虫卵囊基因组 DNA 提取 | 第16页 |
| ·引物设计 | 第16页 |
| ·引物 TX1 与 TX3 退火温度探索 | 第16-17页 |
| ·引物 TX2 与 TX3 退火温度探索 | 第17页 |
| ·引物 TX1 浓度探索 | 第17-18页 |
| ·模板浓度对普通 PCR 和半套式 PCR 反应的影响 | 第18-19页 |
| ·半套式 PCR 检测方法的初步建立 | 第19-20页 |
| ·普通 PCR 反应条件的优化 | 第20-21页 |
| ·半套式 PCR 反应条件的优化 | 第21页 |
| ·土壤中弓形虫检测方法的建立 | 第21-22页 |
| ·构建阳性重组质粒并测序 | 第22-24页 |
| ·特异性实验 | 第24页 |
| ·敏感性试验 | 第24-25页 |
| ·土壤样品检测试验 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-37页 |
| ·引物 TX1 和 TX3 在不同退火温度下的扩增结果 | 第26-27页 |
| ·引物 TX2 和 TX3 在不同退火温度下的扩增结果 | 第27页 |
| ·引物 TX1 在不同浓度下的扩增结果 | 第27-28页 |
| ·模板浓度对 PCR 反应的影响 | 第28-29页 |
| ·普通 PCR 反应条件的优化 | 第29-30页 |
| ·半套式 PCR 反应条件的优化 | 第30-31页 |
| ·重组阳性质粒 PCR 鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第32-33页 |
| ·反应特异性鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·敏感性检测结果 | 第34-35页 |
| ·土壤样品检测结果 | 第35-36页 |
| ·阳性土壤样品 DNA 测序结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-41页 |
| 第三章 半套式 PCR 检测方法在土壤检测中的应用 | 第41-46页 |
| ·材料和方法 | 第41-43页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·土壤样品采集 | 第42页 |
| ·土壤中基因组 DNA 提取 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 研究结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-56页 |
| 导师简介 | 第56-57页 |
