致谢 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
第一部分 文献综述及引言 | 第16-60页 |
第一章 文献综述 | 第16-56页 |
·鳞翅目昆虫性信息素的生物学研究 | 第16-22页 |
·鳞翅目昆虫性信息素的组成成分和化学结构 | 第16-17页 |
·鳞翅目昆虫性信息素的化学通讯系统 | 第17-20页 |
·释放系统 | 第17-19页 |
·传递系统 | 第19页 |
·接收系统 | 第19-20页 |
·鳞翅目昆虫性信息素的提取、鉴定和化学合成 | 第20-21页 |
·性信息素的提取 | 第20页 |
·化学结构的鉴定 | 第20页 |
·化学合成 | 第20-21页 |
·鳞翅目昆虫性信息素的生物合成 | 第21-22页 |
·鳞翅目昆虫性信息素生物合成的前体 | 第21页 |
·鳞翅目昆虫性信息素生物合成的一般途径 | 第21-22页 |
·鳞翅目昆虫性信息素生物合成的调控机制 | 第22-25页 |
·神经内分泌对鳞翅目昆虫性信息素生物合成的调控 | 第22-24页 |
·保幼激素和蜕皮激素对蛾子性信息素的调控作用 | 第24-25页 |
·PBAN 调控家蚕性信息素生物合成的分子机制 | 第25-34页 |
·PBAN 的相关研究 | 第25-26页 |
·PBAN 受体(PBANR) | 第26-28页 |
·细胞外钙离子的作用 | 第28-29页 |
·储存的可操作性通道(SOCs) | 第29页 |
·BmSTIM1 和 BmOrai1B | 第29-31页 |
·钙调蛋白(CaM) | 第31页 |
·钙调磷脂酶(calcineurin) | 第31-32页 |
·家蚕和棉铃虫 PBAN 信号传导途径的区别 | 第32-34页 |
·家蚕性信息素合成与释放过程中的关键性基因 | 第34-37页 |
·脂肪酰基去饱和酶(Bmpgdesat1) | 第34-35页 |
·性信息素腺体特异性的脂肪酰基还原酶(pgFAR) | 第35页 |
·脂肪酸转运蛋白(BmFATP) | 第35-36页 |
·酰基辅酶 A 结合蛋白(pgACBP 和 mgACBP) | 第36-37页 |
·家蚕性信息素腺体 lipases 的研究 | 第37-41页 |
·性信息素腺体细胞质脂滴(LD) | 第37-38页 |
·家蚕脂滴蛋白 1(BmLsd1) | 第38-39页 |
·蚕蛾醇前体三酰甘油(TAGs) | 第39-40页 |
·家蚕性信息素腺体 lipase 基因 | 第40-41页 |
·交配对家蚕性信息素生物合成影响的相关研究 | 第41-56页 |
·交配对昆虫生殖的影响 | 第41-42页 |
·昆虫性肽的相关研究 | 第42-44页 |
·保幼激素的研究 | 第44-52页 |
·保幼激素的生物学特性 | 第44页 |
·保幼激素的生物合成 | 第44-46页 |
·保幼激素的生物代谢 | 第46页 |
·保幼激素调控昆虫变态和生殖的作用 | 第46-50页 |
·幼虫蜕皮和变态的调控 | 第46-49页 |
·保幼激素在生殖成熟过程中的作用 | 第49-50页 |
·保幼激素的分子作用机制 | 第50-52页 |
·保幼激素候选受体 Met 基因的研究 | 第52-53页 |
·家蚕保幼激素的研究进展 | 第53-56页 |
第二章 引言 | 第56-60页 |
·研究背景及意义 | 第56-57页 |
·主要研究内容 | 第57-58页 |
·技术路线 | 第58-60页 |
·家蚕性信息素腺体 PBANR 基因的分子鉴定 | 第58页 |
·交配对家蚕性信息素生物合成的影响 | 第58-59页 |
·家蚕性信息素腺体胰腺脂肪酶类似基因的分子鉴定 | 第59-60页 |
第二部分 家蚕性信息素生物合成相关基因的分子鉴定 | 第60-116页 |
第三章 家蚕性信息素腺体 PBANR 基因的分子鉴定 | 第60-72页 |
·试验材料 | 第61-62页 |
·供试昆虫 | 第61页 |
·主要试剂 | 第61页 |
·仪器设备 | 第61页 |
·主要溶液的配制 | 第61-62页 |
·试验方法 | 第62-65页 |
·序列分析 | 第62页 |
·引物设计 | 第62页 |
·家蚕不同发育时期性信息素腺体总 RNA 的提取 | 第62-63页 |
·反转录 | 第63-64页 |
·Real-time PCR 检测 | 第64页 |
·断头试验 | 第64页 |
·体外 JH 类似物 methoprene 的处理 | 第64-65页 |
·交配处理实验 | 第65页 |
·统计分析 | 第65页 |
·结果与分析 | 第65-70页 |
·家蚕 PBANR 基因的序列分析 | 第65-67页 |
·家蚕 PBANR 基因的时间表达谱 | 第67页 |
·断头处理对家蚕 PBANR 基因转录水平的影响 | 第67页 |
·体外 JH 类似物 methoprene 的处理 | 第67-68页 |
·交配处理对家蚕 PBANR 基因的影响 | 第68-70页 |
·讨论 | 第70-72页 |
第四章 交配对家蚕性信息素生物合成的影响 | 第72-88页 |
·材料与方法 | 第73-74页 |
·试验昆虫 | 第73页 |
·主要试剂 | 第73-74页 |
·仪器设备 | 第74页 |
·主要溶液的配制 | 第74页 |
·试验方法 | 第74-81页 |
·数字基因表达谱的工作流程 | 第74-76页 |
·试验流程 | 第74页 |
·标准化信息分析流程 | 第74-76页 |
·JH 类似物 methoprene 的体内处理 | 第76页 |
·样品的准备和 RNA 的提取 | 第76页 |
·反转录 | 第76页 |
·荧光定量 PCR 分析 | 第76-77页 |
·PCR 反应 | 第77-78页 |
·PCR 产物的纯化 | 第78页 |
·体外转录合成 dsRNA | 第78-80页 |
·dsRNA 的注射和体内蚕蛾醇的分析 | 第80页 |
·统计分析 | 第80-81页 |
·结果 | 第81-85页 |
·DGE 结果中差异表达基因的统计 | 第81页 |
·DGE 结果中具体的差异表达基因 | 第81-82页 |
·JH 缺失后体内 methoprene 处理的结果 | 第82页 |
·JH 过量表达的结果 | 第82-83页 |
·家蚕羽化当天性信息素腺体内 Met1 和 Met2 基因的表达量 | 第83页 |
·Met1 的干涉效果 | 第83-84页 |
·RNAi 介导的 Met1 基因敲除效应对蚕蛾醇合成的影响 | 第84-85页 |
·讨论 | 第85-88页 |
第五章 家蚕性信息素腺体胰腺脂肪酶类似基因的分子鉴定 | 第88-116页 |
·试验材料 | 第88-92页 |
·供试昆虫 | 第88页 |
·菌种及质粒 | 第88-89页 |
·主要试剂 | 第89页 |
·仪器设备 | 第89页 |
·所需溶液 | 第89页 |
·培养基 | 第89-90页 |
·SDS-PAGE 主要试剂 | 第90-91页 |
·Western blot 主要试剂 | 第91-92页 |
·试验方法 | 第92-102页 |
·生物信息学分析 | 第92页 |
·引物设计 | 第92-93页 |
·BmPLLG 基因 RNAi 试验的引物设计 | 第92页 |
·BmPLLG 基因荧光定量分析的引物设计 | 第92-93页 |
·BmPLLG 基因原核表达的引物设计 | 第93页 |
·RNA 提取与 cDNA 合成 | 第93-94页 |
·不同发育时期和不同组织 RNA 的提取 | 第93-94页 |
·检测干涉效果所用 RNA 的提取 | 第94页 |
·PCR 反应的检测和纯化 | 第94页 |
·PCR 产物的纯化 | 第94-95页 |
·荧光定量 PCR | 第95页 |
·感受态细胞的制备(CaCl2 法) | 第95页 |
·克隆载体与 PCR 纯化产物的连接 | 第95-96页 |
·连接载体的转化 | 第96页 |
·质粒 DNA 提取 | 第96-97页 |
·阳性克隆的筛选 | 第97页 |
·基因克隆与表达载体构建 | 第97-98页 |
·重组表达载体的转化与鉴定 | 第98页 |
·融合蛋白诱导表达条件的优化 | 第98-99页 |
·融合蛋白可溶性检测 | 第99页 |
·原核表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第99-100页 |
·原核表达与多克隆抗体的制备 | 第100页 |
·不同发育时期的 Western blot 检测 | 第100页 |
·体外转录合成 dsRNA | 第100-102页 |
·dsRNA 的注射和体内蚕蛾醇的分析 | 第102页 |
·统计分析 | 第102页 |
·结果与分析 | 第102-113页 |
·生物信息学分析 | 第102-108页 |
·理化性质 | 第102-103页 |
·氨基酸序列多重联配和系统进化树分析 | 第103-106页 |
·疏水性分析 | 第106-107页 |
·跨膜分析 | 第107页 |
·蛋白质的二级结构预测 | 第107-108页 |
·蛋白定位的预测 | 第108页 |
·不同发育时期的表达 | 第108页 |
·不同组织的表达 | 第108-109页 |
·PCR 扩增和重组质粒载体的构建 | 第109-110页 |
·诱导表达条件的优化 | 第110页 |
·融合蛋白的可溶性检测 | 第110-111页 |
·融合蛋白的 Western blot 鉴定 | 第111-112页 |
·不同发育时期的 Western blot 检测 | 第112页 |
·RNAi 效果及其对蚕蛾醇产物的影响 | 第112-113页 |
·讨论 | 第113-116页 |
参考文献 | 第116-136页 |
在读期间论文发表情况 | 第136-137页 |
个人简历及硕士期间所获奖励情况 | 第137页 |