| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-18页 |
| ·插入突变在植物功能基因组学中作用 | 第8-9页 |
| ·植物突变体的获得途径 | 第8页 |
| ·植物突变体在功能基因组学研究中的作用 | 第8-9页 |
| ·插入突变在功能基因组学中的研究概况 | 第9-11页 |
| ·概述插入突变的分类 | 第9-10页 |
| ·T-DNA插入突变的研究进展 | 第10-11页 |
| ·杨树转基因研究现状 | 第11-13页 |
| ·非生物抗性方面 | 第11-12页 |
| ·生物抗性方面 | 第12-13页 |
| ·植物转录因子 | 第13页 |
| ·AP2/EREBP转录因子的研究概况 | 第13-16页 |
| ·AP2类转录因子现状 | 第14-15页 |
| ·ERF类转录因子现状 | 第15-16页 |
| ·RAV类转录因子现状 | 第16页 |
| ·研究目的意义及技术路线 | 第16-18页 |
| ·目的意义 | 第16-17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| 2. 转基因小黑杨矮化突变株鉴定及侧翼序列分析 | 第18-26页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·DNA提取及PCR扩增 | 第18页 |
| ·荧光定量PCR | 第18页 |
| ·石蜡切片 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-20页 |
| ·DNA的提取方法 | 第18-19页 |
| ·PCR扩增 | 第19页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第19-20页 |
| ·石蜡切片制片制作 | 第20页 |
| ·临时装片制备与切片观察 | 第20页 |
| ·叶面积测定 | 第20页 |
| ·生长性状调查 | 第20页 |
| ·数据分析 | 第20页 |
| ·结果与分析 | 第20-25页 |
| ·外源TaLEA基因稳定性分析 | 第20-21页 |
| ·外源TaLEA基因相对表达量比较 | 第21页 |
| ·转TaLEA小黑杨生长性状比较 | 第21-22页 |
| ·转TaLEA小黑杨叶片形态特征及解剖比较 | 第22-24页 |
| ·插入位点侧翼序列AP2/PthRAV的相对表达量 | 第24-25页 |
| ·小结 | 第25-26页 |
| 3. AP2/EREBP转录因子超家族表达谱分析 | 第26-37页 |
| ·试验材料 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-27页 |
| ·RNA的提取和用于数字基因表达谱(DGE)的文库制备 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-36页 |
| ·AP2/PthRAV转录因子结构特性,保守结构域分析 | 第27-28页 |
| ·AP2/PthRAV的同源性分析 | 第28-31页 |
| ·AP2/EREBP转录因子超家族的表达含量分析 | 第31-36页 |
| ·表达谱结果验证 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 4. AP2基因的载体构建 | 第37-43页 |
| ·材料与方法 | 第37-39页 |
| ·试验材料 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·引物设计与合成 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·载体PCR扩增反应策略 | 第39-40页 |
| ·TOPO克隆反应 | 第40页 |
| ·LR反应 | 第40-41页 |
| ·含有目的基因的农杆菌液制备方法 | 第41页 |
| ·试验结果 | 第41-43页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第41页 |
| ·TOPO克隆反应结果 | 第41-42页 |
| ·LR反应结果检测 | 第42页 |
| ·工程菌液制备结果 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43页 |
| 5. 转基因植株的获得及检测 | 第43-49页 |
| ·试验材料 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·小黑杨培养基 | 第43-44页 |
| ·试验试剂 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-45页 |
| ·小黑杨的叶片对Kana的敏感浓度测定 | 第44页 |
| ·根癌农杆菌介导的小黑杨遗传转化 | 第44-45页 |
| ·试验结果 | 第45-48页 |
| ·不同浓度的卡那霉素对出芽的影响 | 第45页 |
| ·转基因小黑杨植株的获得 | 第45-47页 |
| ·实时定量检测结果 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
