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猪链球菌2型重要膜相关蛋白免疫效力研究

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩略语表(Abbreviation)第12-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·前言第13页
   ·猪链球菌2型毒力因子研究进展第13-20页
     ·谷氨酸脱氢酶(GDH)第14页
     ·荚膜多糖(CPS)第14页
     ·溶血素(SLY)第14-15页
     ·纤连蛋白结合蛋白(Fbp)第15页
     ·溶菌酶释放蛋白(MRP)第15-16页
     ·表面抗原Sao蛋白(Sao)第16页
     ·双组份信号转导系统(SalK-salR)第16-17页
     ·催化脂磷壁酸D-烷化酶(dltA)第17页
     ·肽聚糖N-乙酰葡糖胺脱乙酰酶(pgdA)第17页
     ·转肽酶及分拣酶A(SrtA)第17-18页
     ·Di-肽基肽酶Ⅳ(dpp Ⅳ)第18页
     ·孤儿反应调节因子(covR)第18页
     ·烯醇酶(Enolase)第18-19页
     ·5-磷酸肌苷脱氢酶(impdh)第19页
     ·谷氨酰胺合成酶(GlnA)第19页
     ·浑浊因子(OFS)第19-20页
   ·猪链球菌2型疫苗的研究进展第20-23页
     ·6-磷酸葡萄糖脱氢酶第20页
     ·表面抗原HP0245第20-21页
     ·免疫原性蛋白HP0272第21页
     ·胞壁质相关蛋白第21页
     ·SsPepO第21-22页
     ·菌毛亚单位第22页
     ·HP0197第22-23页
第二章 研究目的和意义第23-24页
第三章 材料和方法第24-36页
   ·实验材料第24-26页
     ·所用质粒和细胞第24-25页
     ·主要试剂第25页
     ·缓冲液和试剂配方第25页
     ·实验动物第25-26页
   ·实验方法第26-36页
     ·外膜蛋白原核表达载体的构建第26-30页
       ·引物设计与合成第26-27页
       ·猪链球菌2型SC19基因组DNA的提取第27页
       ·PCR扩增编码膜相关蛋白的基因与目的片段的回收第27-28页
       ·目的基因片段的酶切、回收和pET-30a(+)连接第28-29页
       ·连接产物的转化第29页
       ·阳性克隆子鉴定第29-30页
     ·膜蛋白的表达和纯化第30-31页
       ·6个膜蛋白诱导表达条件的确定第30页
       ·膜蛋白的大量表达和纯化第30-31页
     ·SDS-PAGE第31-32页
     ·6个膜相关蛋白的免疫保护力研究第32页
     ·SSU0434、SSU0482和SSU1853免疫原性和保护效力研究第32-36页
       ·Western blot第32-33页
       ·血清抗体ELISA检测方法确立第33页
       ·ELISA检测小鼠血清抗体效价及抗体分型第33页
       ·小鼠主动免疫与攻毒第33页
       ·淋巴细胞增殖第33-34页
       ·细胞因子检测第34-35页
       ·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清被动免疫实验第35页
       ·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清的全血杀菌实验第35-36页
第四章 结果与分析第36-56页
   ·SSU0434、SSU0482、SSU0927、SSU1634、SSU1637和SSU1853六个膜蛋白表达载体的构建第36-37页
   ·蛋白的表达和纯化第37-39页
   ·6个蛋白对小鼠免疫保护力初筛实验第39页
   ·SSU0434、SSU0482和SSU1853的免疫原性和保护效力研究第39-56页
     ·Western blot第39-40页
     ·SSU0434、SSU0482和SSU1853血清抗体ELISA检测方法确立第40-42页
     ·ELISA检测抗体效价和抗体分型第42-47页
     ·小鼠的主动免疫与攻毒第47页
     ·淋巴细胞增殖第47-50页
     ·细胞因子检测第50-51页
     ·病理组织学观察第51-53页
     ·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清被动免疫实验第53-54页
     ·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清全血杀菌实验第54-56页
第五章 讨论第56-62页
   ·各蛋白功能特性研究第56-59页
   ·蛋白诱发的小鼠体内免疫反应类型分析第59-60页
   ·蛋白诱发的小鼠体内免疫保护反应分析第60-62页
第六章 结论第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69页

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