摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
·前言 | 第13页 |
·猪链球菌2型毒力因子研究进展 | 第13-20页 |
·谷氨酸脱氢酶(GDH) | 第14页 |
·荚膜多糖(CPS) | 第14页 |
·溶血素(SLY) | 第14-15页 |
·纤连蛋白结合蛋白(Fbp) | 第15页 |
·溶菌酶释放蛋白(MRP) | 第15-16页 |
·表面抗原Sao蛋白(Sao) | 第16页 |
·双组份信号转导系统(SalK-salR) | 第16-17页 |
·催化脂磷壁酸D-烷化酶(dltA) | 第17页 |
·肽聚糖N-乙酰葡糖胺脱乙酰酶(pgdA) | 第17页 |
·转肽酶及分拣酶A(SrtA) | 第17-18页 |
·Di-肽基肽酶Ⅳ(dpp Ⅳ) | 第18页 |
·孤儿反应调节因子(covR) | 第18页 |
·烯醇酶(Enolase) | 第18-19页 |
·5-磷酸肌苷脱氢酶(impdh) | 第19页 |
·谷氨酰胺合成酶(GlnA) | 第19页 |
·浑浊因子(OFS) | 第19-20页 |
·猪链球菌2型疫苗的研究进展 | 第20-23页 |
·6-磷酸葡萄糖脱氢酶 | 第20页 |
·表面抗原HP0245 | 第20-21页 |
·免疫原性蛋白HP0272 | 第21页 |
·胞壁质相关蛋白 | 第21页 |
·SsPepO | 第21-22页 |
·菌毛亚单位 | 第22页 |
·HP0197 | 第22-23页 |
第二章 研究目的和意义 | 第23-24页 |
第三章 材料和方法 | 第24-36页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·所用质粒和细胞 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·缓冲液和试剂配方 | 第25页 |
·实验动物 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-36页 |
·外膜蛋白原核表达载体的构建 | 第26-30页 |
·引物设计与合成 | 第26-27页 |
·猪链球菌2型SC19基因组DNA的提取 | 第27页 |
·PCR扩增编码膜相关蛋白的基因与目的片段的回收 | 第27-28页 |
·目的基因片段的酶切、回收和pET-30a(+)连接 | 第28-29页 |
·连接产物的转化 | 第29页 |
·阳性克隆子鉴定 | 第29-30页 |
·膜蛋白的表达和纯化 | 第30-31页 |
·6个膜蛋白诱导表达条件的确定 | 第30页 |
·膜蛋白的大量表达和纯化 | 第30-31页 |
·SDS-PAGE | 第31-32页 |
·6个膜相关蛋白的免疫保护力研究 | 第32页 |
·SSU0434、SSU0482和SSU1853免疫原性和保护效力研究 | 第32-36页 |
·Western blot | 第32-33页 |
·血清抗体ELISA检测方法确立 | 第33页 |
·ELISA检测小鼠血清抗体效价及抗体分型 | 第33页 |
·小鼠主动免疫与攻毒 | 第33页 |
·淋巴细胞增殖 | 第33-34页 |
·细胞因子检测 | 第34-35页 |
·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清被动免疫实验 | 第35页 |
·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清的全血杀菌实验 | 第35-36页 |
第四章 结果与分析 | 第36-56页 |
·SSU0434、SSU0482、SSU0927、SSU1634、SSU1637和SSU1853六个膜蛋白表达载体的构建 | 第36-37页 |
·蛋白的表达和纯化 | 第37-39页 |
·6个蛋白对小鼠免疫保护力初筛实验 | 第39页 |
·SSU0434、SSU0482和SSU1853的免疫原性和保护效力研究 | 第39-56页 |
·Western blot | 第39-40页 |
·SSU0434、SSU0482和SSU1853血清抗体ELISA检测方法确立 | 第40-42页 |
·ELISA检测抗体效价和抗体分型 | 第42-47页 |
·小鼠的主动免疫与攻毒 | 第47页 |
·淋巴细胞增殖 | 第47-50页 |
·细胞因子检测 | 第50-51页 |
·病理组织学观察 | 第51-53页 |
·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清被动免疫实验 | 第53-54页 |
·SSU0434、SSU0482和SSU1853单独或组合后免疫血清全血杀菌实验 | 第54-56页 |
第五章 讨论 | 第56-62页 |
·各蛋白功能特性研究 | 第56-59页 |
·蛋白诱发的小鼠体内免疫反应类型分析 | 第59-60页 |
·蛋白诱发的小鼠体内免疫保护反应分析 | 第60-62页 |
第六章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |