| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 英文縮略词一览表 | 第10-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-33页 |
| ·膜联蛋白A2与肿瘤研究现状 | 第13-24页 |
| ·膜联蛋白家族简介 | 第13-14页 |
| ·ANXA2的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·ANXA2的生物学功能 | 第15-19页 |
| ·ANXA2与肿瘤 | 第19-24页 |
| ·RNA干扰技术(RNAi) | 第24-33页 |
| ·RNA简介 | 第24-25页 |
| ·RNAi的发现及其基本机制 | 第25-26页 |
| ·常见的小RNAs | 第26-28页 |
| ·sh/siRNA的设计及其运载工具 | 第28-29页 |
| ·RNAi的应用前景 | 第29-33页 |
| 第2章 本课题的理论依据,目的意义及创新之处 | 第33-35页 |
| 第3章 靶向ANXA2的siRNA质粒的构建及caco2细胞转染 | 第35-47页 |
| ·实验材料、试剂及仪器设备 | 第35-37页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·相关药品与试剂配制 | 第35-37页 |
| ·相关仪器设备 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-42页 |
| ·靶向ANXA2的siRNA设计与合成 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的构建与保存 | 第38页 |
| ·质粒的小量制备 | 第38-40页 |
| ·质粒浓度及纯度测定 | 第40页 |
| ·质粒的1%琼脂糖凝胶电泳检测 | 第40页 |
| ·细胞培养 | 第40-42页 |
| ·细胞转染 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-44页 |
| ·重组质粒纯度、浓度检测 | 第42-43页 |
| ·细胞转染效率评估 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 第4章 ANXA2基因沉默对caco2细胞凋亡影响的初步研究 | 第47-55页 |
| ·实验材料、试剂以及仪器设备 | 第47-48页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验药品及试剂盒 | 第47页 |
| ·实验试剂的配制 | 第47-48页 |
| ·实验相关仪器设备 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·流式细胞仪检测caco2细胞的凋亡 | 第48-49页 |
| ·Caco2凋亡细胞的形态观察 | 第49-50页 |
| ·统计学分析 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-53页 |
| ·流式细胞仪检测caco2细胞凋亡水平 | 第50-51页 |
| ·Caco2凋亡细胞的形态学检测 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第5章 沉默caco2细胞ANXA2基因表达后对部分ANXA2相关基因表达的调节研究 | 第55-75页 |
| ·半定量RT-PCR检测ANXA2相关基因mRNA表达水平 | 第55-59页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·实验试剂 | 第55-56页 |
| ·实验相关仪器设备 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-59页 |
| ·Western Blot检测ANXA2相关基因蛋白水平表达 | 第59-66页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·实验试剂 | 第59-62页 |
| ·实验仪器设备 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-66页 |
| ·结果 | 第66-73页 |
| ·Caco2细胞总RNA检测 | 第66-67页 |
| ·各目的基因合适退火温度、循环参数的确定 | 第67-70页 |
| ·Caco2细胞总蛋白定量 | 第70页 |
| ·ANXA2-siRNA对其部分相关基因(S100A10、FAK、tPA、β-actin)mRNA和蛋白表达水平的影响 | 第70-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第93页 |
