摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-32页 |
1 银杏叶萜内酯类化合物的生物合成研究进展 | 第13-17页 |
·银杏萜内酯的化学结构、种类和分布 | 第13-14页 |
·萜内酯类化合物的药理作用 | 第14-15页 |
·对血小板活化因子的拮抗作用 | 第14-15页 |
·对缺血损伤及中枢神经系统具有保护作用 | 第15页 |
·萜内酯的生物合成过程及途径 | 第15-17页 |
·银杏萜内酯前体物(IPP/DMAPP)的生物合成 | 第16-17页 |
·前体物(IPP/DMAPP)缩合成银杏萜内酯 | 第17页 |
2 植物基因启动子结构与功能研究 | 第17-29页 |
·植物基因启动子的基本结构和特点 | 第18-20页 |
·转录起始位点 | 第18页 |
·核心元件 | 第18-19页 |
·上游元件 | 第19-20页 |
·CAAT 框(CAAT box) | 第19页 |
·GC 框(GC box) | 第19页 |
·其他元件 | 第19-20页 |
·植物基因启动子的类型 | 第20-23页 |
·组成型启动子 | 第20-21页 |
·诱导型启动子 | 第21-22页 |
·光诱导启动子 | 第21页 |
·热诱导启动子 | 第21页 |
·损伤诱导启动子 | 第21-22页 |
·激素诱导启动子 | 第22页 |
·组织特异型启动子 | 第22-23页 |
·植物基因启动子的克隆方法 | 第23-25页 |
·环状 PCR 技术 | 第23-24页 |
·反向 PCR 技术 | 第24页 |
·锅柄式 PCR 技术 | 第24页 |
·接头 PCR 技术 | 第24-25页 |
·TAIL-PCR 技术 | 第25页 |
·启动子的生物信息学分析 | 第25-26页 |
·植物基因启动子功能检测 | 第26-29页 |
·利用报告基因的检测 | 第26-28页 |
·gus 酶活性检测 | 第27页 |
·绿色荧光蛋白检测 | 第27-28页 |
·缺失突变分析 | 第28页 |
·瞬时表达分析 | 第28-29页 |
3 银杏萜内酯关键酶基因启动子克隆研究的目的和意义 | 第29-32页 |
第二章 银杏 MECT 基因启动子克隆及序列分析 | 第32-47页 |
1 材料及试剂 | 第32-33页 |
·实验材料 | 第32页 |
·酶与分子生物学试剂 | 第32-33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·DNA 提取试剂 | 第33页 |
2 试验方法 | 第33-39页 |
·银杏 DNA 提取 | 第33-34页 |
·琼脂糖电泳检测 | 第34页 |
·基因组酶切与连接 | 第34-35页 |
·引物设计及染色体步移扩增 | 第35-36页 |
·目的片段回收、片段与载体连接、转化及测序 | 第36-39页 |
·目的片段的回收 | 第36-37页 |
·目的片段与载体连接 | 第37页 |
·转化大肠杆菌 | 第37-38页 |
·重组子筛选鉴定及测序 | 第38-39页 |
·生物信息学分析 | 第39页 |
3 结果与分析 | 第39-44页 |
·银杏基因组 DNA 提取 | 第39页 |
·银杏 MECT 基因启动子序列克隆及验证 | 第39-41页 |
·GbMECT 基因启动子区域序列的生物信息学分析 | 第41-44页 |
·光调控元件 | 第41-42页 |
·抗逆境胁迫及与激素响应相关的调控元件 | 第42-43页 |
·其它类型调控元件 | 第43-44页 |
4 小结与讨论 | 第44-47页 |
第三章 银杏 MECPs 基因启动子克隆及植物表达载体构建 | 第47-57页 |
1 实验材料与方法 | 第47-50页 |
·实验材料和仪器 | 第47-48页 |
·银杏基因组 DNA 的提取 | 第48页 |
·引物设计及步移扩增 | 第48-49页 |
·扩增结果检测及目的条带回收 | 第49页 |
·表达载体 pBI121+GbMECPs 的构建 | 第49页 |
·植物表达载体向农杆菌转化 | 第49-50页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
·GbMECPs 表达载体向农杆菌感受态细胞的转化 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-55页 |
·GbMECPs 启动子区域序列克隆 | 第50-51页 |
·银杏 MECPs 基因启动子区域序列的生物信息学分析 | 第51-53页 |
·含 GbMECPs 启动子的植物表达载体 | 第53-54页 |
·GbMECPs 表达载体转化农杆菌 | 第54-55页 |
3 小结与讨论 | 第55-56页 |
4 结论与展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-71页 |
攻读硕士期间已发表的论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |