| 摘要 | 第1-9页 |
| 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 Q热概述 | 第9-14页 |
| ·病原学 | 第10页 |
| ·流行病学 | 第10-11页 |
| ·发病机理 | 第11-12页 |
| ·Q热的临床表现 | 第12页 |
| ·Q热的诊断 | 第12-14页 |
| ·Q热的鉴别诊断和治疗 | 第14页 |
| 2 Q热疫苗的研究进展 | 第14-18页 |
| ·灭活疫苗 | 第14页 |
| ·减毒疫苗 | 第14-15页 |
| ·亚单位疫苗 | 第15页 |
| ·基因工程亚单位疫苗 | 第15-18页 |
| 3 Q热保护性抗原研究进展 | 第18-21页 |
| ·蛋白质组学筛选主要Q热蛋白抗原 | 第19页 |
| ·全基因组蛋白芯片筛选Q热保护性抗原 | 第19页 |
| ·抗原刺激树突状细胞筛选Q热保护性抗原 | 第19-21页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 实验一 贝氏柯克斯体OmpH基因和ArgR基因的克隆及序列分析 | 第22-33页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| ·菌株与载体 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-27页 |
| ·引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| ·贝氏柯克斯体OmpH基因和ArgR基因的扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第25页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第26页 |
| ·重组质粒的提取 | 第26-27页 |
| 3 实验结果与分析 | 第27-31页 |
| ·PCR扩增电泳结果 | 第27-28页 |
| ·菌液PCR鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·菌液序列测定及相似性分析 | 第29-31页 |
| ·质粒浓度及纯度测定 | 第31页 |
| 4 小结 | 第31-33页 |
| 实验二 贝氏柯克斯体OmpH基因和ArgR基因的原核表达 | 第33-47页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| ·菌株与载体 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-39页 |
| ·原核表达载体pET-32a和PGEX-6P-1的制备 | 第34页 |
| ·重组质粒与目的基因的制备 | 第34-36页 |
| ·重组质粒的筛选鉴定 | 第36-38页 |
| ·重组质粒转化表达菌BL21(DE3)plysS感受态细胞 | 第38页 |
| ·重组质粒诱导表达 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-46页 |
| ·原核表达载体pET-32a,PGEX-6P-1的双酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·表达质粒pET-32a-OmpH和PGEX-6P-1-ArgR的鉴定 | 第40-43页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳结果 | 第43-46页 |
| 4 小结 | 第46-47页 |
| 实验三 贝氏柯克斯体OmpH蛋白和ArgR蛋白的免疫原性分析 | 第47-52页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·主要试剂及材料 | 第47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-49页 |
| ·抗原的制备 | 第48页 |
| ·BCA法测定蛋白的浓度 | 第48页 |
| ·免疫程序 | 第48-49页 |
| ·间接ELISA检测免疫动物的抗体水平 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-50页 |
| ·抗原工作浓度的确定 | 第49页 |
| ·OmpH蛋白的血清抗体效价的测定 | 第49-50页 |
| ·ArgR蛋白的血清抗体效价的测定 | 第50页 |
| 4 小结 | 第50-52页 |
| 讨论 | 第52-54页 |
| 1 Q热贝氏柯斯体抗原蛋白研究进展 | 第52-53页 |
| 2 ArgR和OmpH蛋白基因在原核表达中需要注意的问题 | 第53-54页 |
| ·目的基因与原核表达载体的连接 | 第53页 |
| ·融合表达条件的优化 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| Abstract | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
