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棉花GbCO和GbMFT基因的克隆、表达和功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
主要缩略表第11-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-22页
   ·控制植物发育时期转换的信号途径第13-18页
     ·光周期途径第13-16页
     ·自主途径第16页
     ·春化途径第16-17页
     ·赤霉素途径第17页
     ·年龄途径第17页
     ·环境温度途径第17页
     ·发育时期遗传转换途径的整合第17-18页
   ·CO 基因研究现状第18-19页
   ·FT 基因研究现状第19-20页
   ·MFT 基因的研究现状第20-21页
   ·本课题的研究意义第21-22页
第二章 海岛棉 GbCO 基因的克隆和生物信息学分析第22-35页
   ·植物材料第22页
   ·菌株与质粒第22页
     ·菌株第22页
     ·质粒第22页
   ·实验仪器和试剂第22-23页
     ·实验仪器第22页
     ·主要实验试剂第22-23页
   ·培养基、试剂配制第23-24页
     ·LB 培养基第23页
     ·1/2 MS 培养基第23页
     ·MS 培养基第23页
     ·提取质粒溶液的配置第23页
     ·X-gal (20 mg/mL)和 IPTG (24 mg/mL)第23页
     ·50 × TAE 母液配制第23页
     ·植物总 DNA 提取缓冲液第23-24页
     ·棉花 RNA 提取的试剂配制第24页
   ·实验引物第24页
   ·实验方法第24-28页
     ·棉花组织 RNA 的提取第24-25页
     ·棉花 cDNA 第一链的合成第25页
     ·引物设计第25页
     ·海岛棉 GbCO 基因的克隆和生物信息学分析第25-27页
     ·GbCO 基因的生物信息学分析第27页
     ·p35S:GbCO 表达载体的构建第27页
     ·农杆菌转化第27-28页
     ·农杆菌转化子的鉴定第28页
   ·结果与分析第28-34页
     ·海岛棉 GbCO 基因的克隆与分析第28-30页
     ·棉花 GbCO 基因的进化树分析第30-32页
     ·海岛棉 GbCO 蛋白的生物信息学分析第32-33页
     ·表达载体的构建及农杆菌转化第33-34页
   ·结论第34-35页
第三章 海岛棉 GbCO 基因的表达分析第35-38页
   ·材料与试剂第35页
     ·植物材料第35页
   ·实验方法第35页
     ·用改良的 CTAB 法提取棉花的 RNA第35页
     ·棉花 cDNA 第一链的合成第35页
     ·qRT-PCR 分析 GbCO 基因在新海 14 号的不同组织和纤维发育不同时期的表达情况第35页
   ·结果与分析第35-38页
     ·RNA 提取第35-36页
     ·棉花 GbCO 基因的组织表达分析第36-38页
第四章 海岛棉 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的克隆和生物信息学分析第38-54页
   ·材料和试剂第38页
     ·植物材料第38页
   ·菌株与质粒第38页
     ·菌株第38页
     ·质粒第38页
   ·实验方法第38-42页
     ·棉花组织 DNA 的提取第38页
     ·棉花组织 RNA 的提取第38页
     ·棉花 cDNA 第一链的合成第38页
     ·引物设计第38-39页
     ·棉花 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的克隆和序列分析第39-40页
     ·生物信息学分析第40页
     ·p35S: GbMFT 表达载体和 GFP 融合表达载体的构建第40页
     ·电击法农转化杆菌第40-41页
     ·农杆菌转化子的鉴定第41页
     ·棉花 GbMFT1 基因 3'RACE第41-42页
     ·棉花 GbMFT2 基因 5'RACE第42页
   ·结果与分析第42-53页
     ·海岛棉 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的克隆与分析第42-47页
     ·GbMFT1 和 GbMFT2 序列的生物信息学分析第47-51页
     ·表达载体和 GFP 融合载体的构建及农杆菌转化第51-53页
   ·结论第53-54页
第五章 海岛棉 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的表达分析第54-57页
   ·材料与试剂第54页
     ·植物材料第54页
   ·实验方法第54页
     ·用改良的 CTAB 法提取棉花的 RNA第54页
     ·棉花 cDNA 第一链的合成第54页
     ·qRT-PCR 分析 GbMFT1 和 GbMFT2 基因在新海 14 号的不同组织和纤维或胚珠发育不同时期的表达情况第54页
     ·GbMFT1 和 GbMFT2 基因在 ABA 胁迫下的表达分析第54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·GbMFT1 和 GbMFT2 基因的组织表达分析第54-56页
     ·GbMFT1 和 GbMFT2 基因在 ABA 胁迫下的表达分析第56-57页
第六章 转基因研究第57-64页
   ·材料与试剂第57页
     ·植物材料第57页
     ·主要试剂第57页
     ·培养基、溶液第57页
   ·主要设备和仪器第57页
   ·实验方法第57-59页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第57-58页
     ·转基因植株的筛选第58页
     ·转基因植株的 PCR 鉴定第58页
     ·烟草的遗传转化第58-59页
   ·结果与分析第59-64页
     ·转基因烟草植株的 PCR 鉴定第59-62页
     ·转基因拟南芥植株的筛选第62页
     ·GbMFT1 蛋白的亚细胞定位第62-63页
     ·GbMFT2 蛋白的亚细胞定位第63-64页
第七章 结论与讨论第64-67页
   ·GbCO 基因可能是棉花开花光周期途径的控制因子之一第64页
   ·GbMFT1 基因可能是棉花开花的促进因子之一第64-65页
   ·GbMFT2 基因可能是棉花开花的促进因子之一,并且受到 ABA 的调控控制种子的萌发第65页
   ·结论第65页
   ·下一步工作计划第65-67页
参考文献第67-73页
附录第73-77页
致谢第77-78页
作者简介第78-79页
导师评阅表第79页

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