摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
主要缩略表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
·控制植物发育时期转换的信号途径 | 第13-18页 |
·光周期途径 | 第13-16页 |
·自主途径 | 第16页 |
·春化途径 | 第16-17页 |
·赤霉素途径 | 第17页 |
·年龄途径 | 第17页 |
·环境温度途径 | 第17页 |
·发育时期遗传转换途径的整合 | 第17-18页 |
·CO 基因研究现状 | 第18-19页 |
·FT 基因研究现状 | 第19-20页 |
·MFT 基因的研究现状 | 第20-21页 |
·本课题的研究意义 | 第21-22页 |
第二章 海岛棉 GbCO 基因的克隆和生物信息学分析 | 第22-35页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·菌株 | 第22页 |
·质粒 | 第22页 |
·实验仪器和试剂 | 第22-23页 |
·实验仪器 | 第22页 |
·主要实验试剂 | 第22-23页 |
·培养基、试剂配制 | 第23-24页 |
·LB 培养基 | 第23页 |
·1/2 MS 培养基 | 第23页 |
·MS 培养基 | 第23页 |
·提取质粒溶液的配置 | 第23页 |
·X-gal (20 mg/mL)和 IPTG (24 mg/mL) | 第23页 |
·50 × TAE 母液配制 | 第23页 |
·植物总 DNA 提取缓冲液 | 第23-24页 |
·棉花 RNA 提取的试剂配制 | 第24页 |
·实验引物 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-28页 |
·棉花组织 RNA 的提取 | 第24-25页 |
·棉花 cDNA 第一链的合成 | 第25页 |
·引物设计 | 第25页 |
·海岛棉 GbCO 基因的克隆和生物信息学分析 | 第25-27页 |
·GbCO 基因的生物信息学分析 | 第27页 |
·p35S:GbCO 表达载体的构建 | 第27页 |
·农杆菌转化 | 第27-28页 |
·农杆菌转化子的鉴定 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-34页 |
·海岛棉 GbCO 基因的克隆与分析 | 第28-30页 |
·棉花 GbCO 基因的进化树分析 | 第30-32页 |
·海岛棉 GbCO 蛋白的生物信息学分析 | 第32-33页 |
·表达载体的构建及农杆菌转化 | 第33-34页 |
·结论 | 第34-35页 |
第三章 海岛棉 GbCO 基因的表达分析 | 第35-38页 |
·材料与试剂 | 第35页 |
·植物材料 | 第35页 |
·实验方法 | 第35页 |
·用改良的 CTAB 法提取棉花的 RNA | 第35页 |
·棉花 cDNA 第一链的合成 | 第35页 |
·qRT-PCR 分析 GbCO 基因在新海 14 号的不同组织和纤维发育不同时期的表达情况 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-38页 |
·RNA 提取 | 第35-36页 |
·棉花 GbCO 基因的组织表达分析 | 第36-38页 |
第四章 海岛棉 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的克隆和生物信息学分析 | 第38-54页 |
·材料和试剂 | 第38页 |
·植物材料 | 第38页 |
·菌株与质粒 | 第38页 |
·菌株 | 第38页 |
·质粒 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-42页 |
·棉花组织 DNA 的提取 | 第38页 |
·棉花组织 RNA 的提取 | 第38页 |
·棉花 cDNA 第一链的合成 | 第38页 |
·引物设计 | 第38-39页 |
·棉花 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的克隆和序列分析 | 第39-40页 |
·生物信息学分析 | 第40页 |
·p35S: GbMFT 表达载体和 GFP 融合表达载体的构建 | 第40页 |
·电击法农转化杆菌 | 第40-41页 |
·农杆菌转化子的鉴定 | 第41页 |
·棉花 GbMFT1 基因 3'RACE | 第41-42页 |
·棉花 GbMFT2 基因 5'RACE | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-53页 |
·海岛棉 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的克隆与分析 | 第42-47页 |
·GbMFT1 和 GbMFT2 序列的生物信息学分析 | 第47-51页 |
·表达载体和 GFP 融合载体的构建及农杆菌转化 | 第51-53页 |
·结论 | 第53-54页 |
第五章 海岛棉 GbMFT1 和 GbMFT2 基因的表达分析 | 第54-57页 |
·材料与试剂 | 第54页 |
·植物材料 | 第54页 |
·实验方法 | 第54页 |
·用改良的 CTAB 法提取棉花的 RNA | 第54页 |
·棉花 cDNA 第一链的合成 | 第54页 |
·qRT-PCR 分析 GbMFT1 和 GbMFT2 基因在新海 14 号的不同组织和纤维或胚珠发育不同时期的表达情况 | 第54页 |
·GbMFT1 和 GbMFT2 基因在 ABA 胁迫下的表达分析 | 第54页 |
·结果与分析 | 第54-57页 |
·GbMFT1 和 GbMFT2 基因的组织表达分析 | 第54-56页 |
·GbMFT1 和 GbMFT2 基因在 ABA 胁迫下的表达分析 | 第56-57页 |
第六章 转基因研究 | 第57-64页 |
·材料与试剂 | 第57页 |
·植物材料 | 第57页 |
·主要试剂 | 第57页 |
·培养基、溶液 | 第57页 |
·主要设备和仪器 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-59页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第57-58页 |
·转基因植株的筛选 | 第58页 |
·转基因植株的 PCR 鉴定 | 第58页 |
·烟草的遗传转化 | 第58-59页 |
·结果与分析 | 第59-64页 |
·转基因烟草植株的 PCR 鉴定 | 第59-62页 |
·转基因拟南芥植株的筛选 | 第62页 |
·GbMFT1 蛋白的亚细胞定位 | 第62-63页 |
·GbMFT2 蛋白的亚细胞定位 | 第63-64页 |
第七章 结论与讨论 | 第64-67页 |
·GbCO 基因可能是棉花开花光周期途径的控制因子之一 | 第64页 |
·GbMFT1 基因可能是棉花开花的促进因子之一 | 第64-65页 |
·GbMFT2 基因可能是棉花开花的促进因子之一,并且受到 ABA 的调控控制种子的萌发 | 第65页 |
·结论 | 第65页 |
·下一步工作计划 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
附录 | 第73-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简介 | 第78-79页 |
导师评阅表 | 第79页 |