| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-24页 |
| ·植物对低温胁迫的生理应答 | 第10-14页 |
| ·低温伤害 | 第10-12页 |
| ·植物冷驯化的生理变化 | 第12-14页 |
| ·植物低温应答的分子机理及研究进展 | 第14-20页 |
| ·低温诱导基因的表达 | 第14-16页 |
| ·低温逆境下的信号传导和基因调控途径 | 第16-20页 |
| ·CBF的研究进展 | 第20-22页 |
| ·CBF的发现及家族成员 | 第20页 |
| ·CBF的结构 | 第20-21页 |
| ·CBF的表达调控 | 第21-22页 |
| ·CBF在抗寒中的作用 | 第22页 |
| ·本文研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第2章 茶树CBF类似基因的克隆与序列分析 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第25页 |
| ·溶液和培养基 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-28页 |
| ·Cs-CBF基因末端片段及全长序列的克隆 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞制备及转化 | 第27页 |
| ·总RNA的提取与反转录 | 第27-28页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·Cs-CBF基因5'端与3'端克隆 | 第28-29页 |
| ·Cs-CBF基因全长cDNA序列及推导氨基酸序列分析 | 第29页 |
| ·同源性分析 | 第29-32页 |
| ·Cs-CBF基因表达特性分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| ·Cs-CBF基因的分离与克隆 | 第33-34页 |
| ·Cs-CBF基因的序列分析 | 第34-35页 |
| ·Cs-CBF基因的表达分析 | 第35-36页 |
| 第3章 Cs-CBF的细胞定位及转录激活功能的鉴定 | 第36-49页 |
| ·试验材料 | 第36-39页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·菌株和质粒 | 第36页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第36-37页 |
| ·溶液 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-44页 |
| ·PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·载体构建 | 第40-42页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第42页 |
| ·洋葱表皮细胞转化 | 第42-43页 |
| ·酵母感受态细胞制备及转化 | 第43页 |
| ·酵母β-半乳糖苷酶活性测定 | 第43-44页 |
| ·结果和分析 | 第44-47页 |
| ·Cs-CBF在细胞中的位置 | 第44页 |
| ·Cs-CBF在酵母中的转录激活活性 | 第44-45页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性测定 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第4章 转基因烟草中表达载体pBI121-CsCBF的构建 | 第49-56页 |
| ·试验材料 | 第49-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第49-50页 |
| ·试验方法 | 第50-53页 |
| ·pBI121载体中的NOS片段重组到pUC18载体中 | 第50-51页 |
| ·Cs-CBF基因重组到含有NOS的pUC18载体中 | 第51-53页 |
| ·CsCBF-NOS重组到pBI121载体中 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-55页 |
| ·pBI121质粒中的NOS片段插入到pUC18载体的多克隆位点 | 第53-54页 |
| ·Cs-CBF基因与pUC18-NOS重组载体中的NOS连接 | 第54页 |
| ·CsCBF-NOS与pBI121载体的35S启动子连接 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 第5章 结论 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果目录 | 第64页 |
