| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-35页 |
| ·黏菌素的毒理学研究进展 | 第15-17页 |
| ·肾毒性 | 第16页 |
| ·神经毒性 | 第16-17页 |
| ·其他毒性 | 第17页 |
| ·黏菌素的药效学与药动学 | 第17-19页 |
| ·黏菌素的药效学 | 第17-18页 |
| ·黏菌素的药动学 | 第18-19页 |
| ·神经毒性的体外评价 | 第19-26页 |
| ·神经毒性体外评价模型 | 第20-22页 |
| ·微团培养 | 第22页 |
| ·细胞再聚集体培养 | 第22-23页 |
| ·神经组织切片/外植体培养 | 第23页 |
| ·神经毒性评价的观察指标 | 第23-25页 |
| ·神经化学改变 | 第25-26页 |
| ·细胞凋亡的途径与检测方法 | 第26-34页 |
| ·线粒体通路 | 第27-29页 |
| ·内质网通路 | 第29-30页 |
| ·死亡受体通路 | 第30-31页 |
| ·Anoikis 途径 | 第31页 |
| ·细胞凋亡的形态学检测 | 第31-32页 |
| ·细胞凋亡的 DNA 片段检测 | 第32页 |
| ·细胞凋亡相关的基因检测 | 第32页 |
| ·细胞凋亡的流式细胞术检测 | 第32-33页 |
| ·细胞凋亡的 Ca~(2+)浓度变化的测定 | 第33页 |
| ·蛋白免疫印迹法 | 第33-34页 |
| ·研究目的意义 | 第34-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-53页 |
| ·试验材料 | 第35-41页 |
| ·仪器与试剂 | 第35-38页 |
| ·主要试剂的配制 | 第38-40页 |
| ·试验动物 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-52页 |
| ·急性毒性实验筛选剂量 | 第41-42页 |
| ·MTT 法筛选剂量 | 第42-43页 |
| ·硫酸黏菌素诱导 PC12 细胞凋亡的形态学观察 | 第43-44页 |
| ·LDH 水平检测 | 第44-45页 |
| ·ROS 含量检测 | 第45页 |
| ·PI 染色检测细胞周期 | 第45页 |
| ·线粒体膜电位的检测 | 第45-46页 |
| ·DNA 片段检测 | 第46页 |
| ·Caspase-3、Caspase-9 活性测定 | 第46-47页 |
| ·Western blot 分析蛋白表达水平 | 第47-49页 |
| ·RT-PCR 半定量分析基因 mRNA 表达水平 | 第49-51页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞[Ca~(2+)]_i浓度影响 | 第51-52页 |
| ·数据处理 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-90页 |
| ·急性毒性试验结果 | 第53-59页 |
| ·半数致死量（LD50）测定结果 | 第53-54页 |
| ·血液指标测定结果 | 第54-55页 |
| ·组织切片结果观察 | 第55-59页 |
| ·MTT 试验结果 | 第59-60页 |
| ·硫酸黏菌素诱导 PC12 细胞凋亡检测结果 | 第60-73页 |
| ·倒置显微镜观察 PC12 细胞的形态 | 第60-61页 |
| ·AO/EB 双荧光染色结果 | 第61-63页 |
| ·Hoechst 33258 荧光染色结果 | 第63-64页 |
| ·电镜观察结果 | 第64-65页 |
| ·LDH 水平检测结果 | 第65-67页 |
| ·PC12 细胞内 ROS 活性的检测结果 | 第67-68页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞周期的影响 | 第68-70页 |
| ·硫酸黏菌素对线粒体膜电位的影响 | 第70-71页 |
| ·DNA 片段检测结果 | 第71页 |
| ·Caspase-3、Caspase-9 活性测定结果 | 第71-73页 |
| ·凋亡信号通路的检测结果 | 第73-90页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞[Ca~(2+)]_i浓度影响结果 | 第73-75页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞 p53、Cyt C、Bax、Bcl-2、caspase-9、caspase-3 蛋白表达的影响 | 第75-77页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞 Fas、FasL、caspase-8 蛋白表达的影响 | 第77-78页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞 GnRP78、caspase-12 蛋白表达的影响 | 第78-80页 |
| ·RT-PCR 半定量分析基因 mRNA 表达水平 | 第80-90页 |
| 4 讨论 | 第90-96页 |
| ·硫酸黏菌素染毒剂量的确定 | 第90页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞形态的影响 | 第90-91页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞的毒性 | 第91-92页 |
| ·硫酸黏菌素对 PC12 细胞 ROS 的影响 | 第92页 |
| ·对 DNA 完整性的影响 | 第92-93页 |
| ·硫酸黏菌素诱导 PC12 细胞凋亡的可能机制 | 第93-96页 |
| ·线粒体途径在硫酸黏菌素诱导 PC12 细胞凋亡中的作用 | 第93页 |
| ·死亡受体途径在硫酸黏菌素诱导 PC12 细胞凋亡中的作用 | 第93页 |
| ·内质网途径在硫酸黏菌素诱导 PC12 细胞凋亡中的作用 | 第93-96页 |
| 5 结论 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-111页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第111页 |
