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柳蚕卵黄原蛋白受体基因的克隆与表达分析

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
目录第6-9页
1 文献综述第9-14页
   ·卵黄原蛋白受体的概述第9页
   ·卵黄原蛋白受体的结构特性第9-12页
     ·配体结合域LBD第9-10页
     ·表皮生长因子前提同源区域EGFP第10页
     ·O-糖链结构域第10页
     ·跨膜结构域第10页
     ·胞内区域第10-12页
   ·昆虫的卵黄原蛋白受体的研究进展第12-14页
2 引言第14-16页
   ·研究的目的及意义第14页
   ·研究内容第14-15页
     ·柳蚕卵黄原蛋白受体基因序列的测定第14页
     ·柳蚕卵黄原蛋白受体的原核表达第14-15页
   ·技术路线第15-16页
3 材料与方法第16-26页
   ·实验材料第16页
   ·仪器与试剂第16-19页
     ·主要实验仪器第16页
     ·主要生化试剂第16-17页
     ·常用溶液的配置第17-19页
   ·实验方法第19-26页
     ·柳蚕卵黄原蛋白受体基因的克隆第19-22页
       ·组织的收集第19页
       ·总RNA的提取第19页
       ·提取的总RNA的质量检测第19-20页
       ·第一链cDNA的合成第20页
       ·引物设计和PCR扩增第20-21页
       ·PCR产物的纯化第21-22页
       ·目的片段与pMD-19T连接和转化第22页
       ·序列的测序,拼接与分析第22页
     ·柳蚕卵黄原蛋白受体主要功能域的原核表达第22-25页
       ·引物设计与PCR扩增第22-23页
       ·质粒抽提第23-24页
       ·目的片段和pET28a的双酶切第24页
       ·连接目的基因和表达载体第24-25页
       ·蛋白的诱导表达第25页
     ·SDS-PAGE电泳检测第25页
     ·Western blot分析第25-26页
4 结果第26-41页
   ·柳蚕总RNA的检测第26页
   ·柳蚕卵黄原蛋白受体基因序列的测定和分析第26-32页
   ·柳蚕卵黄原蛋白受体与其他昆虫卵黄原蛋白受体的同源性分析第32-33页
   ·柳蚕卵黄原蛋白受体配体结合域LBD1,LBD2的扩增第33-34页
   ·原核表达载体的构建第34-37页
     ·LDB1/2基因在T载体上的克隆鉴定第34-35页
     ·双酶切鉴定第35-36页
     ·菌落PCR鉴定第36-37页
   ·LDB1/2基因的原核表达第37-38页
   ·WESTERN BLOT检测第38-41页
5 讨论第41-42页
   ·柳蚕的室内饲养第41页
   ·柳蚕卵黄原蛋白受体基因全长与序列分析第41页
   ·柳蚕卵黄原蛋白受体(VGR)的原核表达第41-42页
6 结论第42-43页
参考文献第43-48页
致谢第48-49页
个人简介第49页

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