摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
目录 | 第6-9页 |
1 文献综述 | 第9-14页 |
·卵黄原蛋白受体的概述 | 第9页 |
·卵黄原蛋白受体的结构特性 | 第9-12页 |
·配体结合域LBD | 第9-10页 |
·表皮生长因子前提同源区域EGFP | 第10页 |
·O-糖链结构域 | 第10页 |
·跨膜结构域 | 第10页 |
·胞内区域 | 第10-12页 |
·昆虫的卵黄原蛋白受体的研究进展 | 第12-14页 |
2 引言 | 第14-16页 |
·研究的目的及意义 | 第14页 |
·研究内容 | 第14-15页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体基因序列的测定 | 第14页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体的原核表达 | 第14-15页 |
·技术路线 | 第15-16页 |
3 材料与方法 | 第16-26页 |
·实验材料 | 第16页 |
·仪器与试剂 | 第16-19页 |
·主要实验仪器 | 第16页 |
·主要生化试剂 | 第16-17页 |
·常用溶液的配置 | 第17-19页 |
·实验方法 | 第19-26页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体基因的克隆 | 第19-22页 |
·组织的收集 | 第19页 |
·总RNA的提取 | 第19页 |
·提取的总RNA的质量检测 | 第19-20页 |
·第一链cDNA的合成 | 第20页 |
·引物设计和PCR扩增 | 第20-21页 |
·PCR产物的纯化 | 第21-22页 |
·目的片段与pMD-19T连接和转化 | 第22页 |
·序列的测序,拼接与分析 | 第22页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体主要功能域的原核表达 | 第22-25页 |
·引物设计与PCR扩增 | 第22-23页 |
·质粒抽提 | 第23-24页 |
·目的片段和pET28a的双酶切 | 第24页 |
·连接目的基因和表达载体 | 第24-25页 |
·蛋白的诱导表达 | 第25页 |
·SDS-PAGE电泳检测 | 第25页 |
·Western blot分析 | 第25-26页 |
4 结果 | 第26-41页 |
·柳蚕总RNA的检测 | 第26页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体基因序列的测定和分析 | 第26-32页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体与其他昆虫卵黄原蛋白受体的同源性分析 | 第32-33页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体配体结合域LBD1,LBD2的扩增 | 第33-34页 |
·原核表达载体的构建 | 第34-37页 |
·LDB1/2基因在T载体上的克隆鉴定 | 第34-35页 |
·双酶切鉴定 | 第35-36页 |
·菌落PCR鉴定 | 第36-37页 |
·LDB1/2基因的原核表达 | 第37-38页 |
·WESTERN BLOT检测 | 第38-41页 |
5 讨论 | 第41-42页 |
·柳蚕的室内饲养 | 第41页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体基因全长与序列分析 | 第41页 |
·柳蚕卵黄原蛋白受体(VGR)的原核表达 | 第41-42页 |
6 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
个人简介 | 第49页 |