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核糖体展示Anticalin模拟抗体库的构建及其在雌二醇、百草枯模拟抗体筛选中的应用

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
目录第6-9页
第一章 文献综述第9-23页
   ·引言第9页
   ·课题的研究背景第9-21页
     ·典型环境雌激素污染物:雌二醇的概况第9-12页
     ·典型灭生性除草剂:百草枯的概况第12-17页
     ·核糖体展示技术的研究进展第17页
     ·核糖体展示技术的原理第17-18页
     ·核糖体展示的优势第18-19页
     ·核糖体展示在模拟抗体 Anticalin 制备过程中的应用第19-21页
   ·国内外研究现状第21-22页
     ·Anticalin 制备技术的研究进展第21页
     ·核糖体展示技术适合从突变库中筛选特异模拟抗体第21-22页
   ·研究的目的和意义第22-23页
第二章 Anticalin 库的构建与质量鉴定第23-53页
   ·引言第23页
   ·材料与方法第23-41页
     ·材料第23-25页
     ·方法第25-41页
   ·结果与分析第41-50页
     ·bbp 基因库的分段合成第41-44页
     ·Anticalin 模拟抗体库的合成第44-46页
     ·bbp 基因库序列正确性的鉴定第46-47页
     ·bbp 基因库测序结果第47-49页
     ·Anticalin 模拟抗体库容量第49页
     ·Anticalin 转录活性的鉴定第49页
     ·Anticalin 反转录活性的鉴定第49-50页
   ·讨论第50-53页
     ·Lipocalin 随机突变位点的引入第50-51页
     ·核糖体展示元件的的连接第51页
     ·Anticalin 文库的质量鉴定第51-53页
第三章 雌二醇全抗原的合成与模拟抗体的筛选第53-76页
   ·引言第53页
   ·实验材料与方法第53-64页
     ·实验材料第53-55页
     ·方法第55-64页
   ·结果与分析第64-74页
     ·雌二醇半抗原和完全抗原的鉴定第64-69页
     ·雌二醇模拟抗体的体外筛选第69-74页
   ·讨论第74-76页
     ·雌二醇完全抗原的合成第74页
     ·雌二醇模拟抗体的固相筛选第74-76页
第四章 雌二醇模拟抗体的性质鉴定第76-96页
   ·引言第76页
   ·材料与方法第76-85页
     ·材料第76-79页
     ·方法第79-85页
   ·结果与分析第85-93页
     ·pTIG-TRX-bbp 阳性克隆子验证第85-86页
     ·pTIG-TRX-bbp 的诱导表达第86页
     ·雌二醇模拟抗体的纯化第86-87页
     ·雌二醇模拟抗体的 Western Blot 检测第87页
     ·雌二醇模拟抗体结合活性的检测第87-88页
     ·雌二醇模拟抗体竞争活性的检测第88-89页
     ·雌二醇模拟抗体特异性检测第89-90页
     ·雌二醇模拟抗体的序列比对第90-91页
     ·非还原 SDS-PAGE 分析模拟抗体 E_2-A 的折叠情况第91-92页
     ·SPR 分析模拟抗体 E_2-A 的亲和力第92-93页
   ·讨论第93-96页
     ·模拟抗体的表达第93-94页
     ·模拟抗体的纯化第94页
     ·模拟抗体的活性鉴定第94-96页
第五章 百草枯完全抗原的合成与模拟抗体的筛选第96-114页
   ·引言第96页
   ·实验材料与方法第96-103页
     ·实验材料第96-97页
     ·方法第97-103页
   ·结果与分析第103-112页
     ·百草枯半抗原和完全抗原的鉴定第103-108页
     ·百草枯模拟抗体的体外筛选第108-112页
   ·讨论第112-114页
     ·百草枯完全抗原的合成第112页
     ·百草枯模拟抗体的固相筛选第112-114页
第六章 百草枯模拟抗体的性质鉴定第114-123页
   ·引言第114页
   ·材料与方法第114-117页
     ·材料第114-115页
     ·方法第115-117页
   ·结果与分析第117-122页
     ·pTIG-TRX-bbp 阳性克隆子验证第117-118页
     ·pTIG-TRX-bbp 的诱导表达第118-119页
     ·百草枯模拟抗体的纯化第119页
     ·百草枯模拟抗体的 Western Blot 检测第119-120页
     ·百草枯模拟抗体结合活性的检测第120-121页
     ·百草枯模拟抗体竞争活性的检测第121页
     ·SPR 分析模拟抗体 PQ-1 的亲和力第121-122页
   ·讨论第122-123页
结论第123-124页
展望第124-125页
参考文献第125-130页
致谢第130-131页
附录第131-132页
英文缩略第132-133页
发表论文和参加科研情况说明第133页

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