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重组人角质细胞生长因子-I聚乙二醇修饰及体内外活性研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
英文缩略表第7-12页
第1章 引言第12-18页
   ·角质细胞生长因子第12-18页
     ·人角质细胞生长因子的发现第12页
     ·KGF-1 和 KGFR 的结构第12-14页
       ·分子结构第12-14页
       ·KGF-1 受体(KGFR)第14页
     ·KGF-1 理化性质第14-15页
     ·KGF-1 生物学活性第15-18页
       ·KGF-1 作用原理第15页
       ·KGF-1 生物学活性第15-16页
       ·KGF-1 与肿瘤发生第16页
       ·KGF 与免疫调节第16-18页
第2章 立题意义和研究任务第18-20页
   ·立题意义第18页
   ·本课题研究的目的第18页
   ·本课题研究的主要内容第18-19页
   ·技术路线第19-20页
第3章 截短型人角质细胞生长因子纯化研究第20-30页
   ·试剂与仪器第20-22页
     ·主要试剂第20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·检测方法第21-22页
       ·SDS-PAGE 凝胶电泳检测第21页
       ·Lowry 法测蛋白浓度第21-22页
       ·RP-HPLC第22页
   ·破菌第22-23页
     ·破菌过程优化第22页
     ·破菌结果与结论第22-23页
   ·△K23 粗纯化的研究第23-26页
     ·△K23 粗纯化方法第23-24页
     ·△K23 粗纯化结果与结论第24-26页
   ·△K23 复性第26页
     ·复性方法:第26页
     ·复性结果:第26页
   ·△K23 精纯化研究第26-27页
     ·△K23 的精纯化工艺第27页
     ·△K23 的精纯化结果与结论第27页
   ·本章小结第27-30页
第4章 截短型重组人角质细胞生长因子-1 聚乙二醇修饰纯化工艺研究第30-40页
   ·试剂与仪器第30-31页
     ·试剂及溶液第30页
     ·仪器第30-31页
   ·聚乙二醇修饰剂的筛选第31页
   ·修饰工艺研究第31-38页
     ·不同 pH 的对蛋白修饰率影响的研究第31-32页
       ·修饰方法第31-32页
       ·修饰结果与分析第32页
     ·不同浓度尿素对修饰率影响的研究第32-33页
       ·修饰方法第33页
       ·结果与分析第33页
     ·不同 PEG 浓度比例对修饰率的影响的研究第33-34页
       ·修饰方法第33-34页
       ·结果与结论第34页
     ·mPEG-Mal-20K 修饰 DTT 处理的△K23 的工艺研究第34-35页
       ·修饰方法第34-35页
       ·结果与结论第35页
     ·DTT 处理的△K23 的修饰工艺优化第35-37页
       ·修饰方法第36页
       ·结果与结论第36-37页
     ·△K23 的修饰工艺放大研究第37-38页
       ·△K23(未 DTT 处理)修饰工艺放大第37页
       ·△K23(DTT 处理)修饰工艺放大第37页
       ·结果与结论第37-38页
   ·聚乙二醇化△K23 的纯化工艺研究第38页
     ·带 4mol/L 尿素修饰的 mPEG-Mal-△K23 的纯化第38页
     ·柱修饰的 mPEG-Mal-△K23 的纯化第38页
   ·本章小结第38-40页
第5章 人角质细胞生长因子修饰位点确认第40-48页
   ·试剂与仪器第40-41页
     ·试剂第40页
     ·仪器第40-41页
   ·实验方法第41页
     ·质量肽图的酶切第41页
     ·LC-MS 条件研究第41页
   ·质量肽图结果及讨论第41-46页
     ·△K23 的质量肽图分析第41-44页
     ·△K23 带尿素修饰的样品的质量肽图分析第44-45页
     ·△K23 柱修饰样品的质量肽图分析第45-46页
   ·本章小结第46-48页
第6章 聚乙二醇化重组人角质细胞生长因子体内外生物活性的研究第48-56页
   ·试剂与仪器第48页
     ·试剂第48页
     ·仪器第48页
   ·体外实验方法第48-50页
     ·NBL-7 细胞测活第49页
     ·实验结果第49-50页
   ·大鼠 5-FU 尿嘧啶肠粘膜损伤模型体内测活第50-54页
     ·试剂配制与样品处理第50页
       ·供试品及配制方法第50页
       ·阳性对照品及配制方法第50页
       ·溶媒(阴性对照)第50页
       ·造模用药及配制方法第50页
     ·实验动物及饲养管理第50-51页
       ·实验动物第50-51页
       ·饲养管理第51页
     ·实验方法第51-52页
       ·方法第51-52页
     ·体内实验结果第52-54页
       ·观察指标第52页
       ·结果第52-54页
   ·本章小结第54-56页
第7章 总结及讨论第56-58页
致谢第58-60页
参考文献第60-64页
附录第64页

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