中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩略表 | 第7-12页 |
第1章 引言 | 第12-18页 |
·角质细胞生长因子 | 第12-18页 |
·人角质细胞生长因子的发现 | 第12页 |
·KGF-1 和 KGFR 的结构 | 第12-14页 |
·分子结构 | 第12-14页 |
·KGF-1 受体(KGFR) | 第14页 |
·KGF-1 理化性质 | 第14-15页 |
·KGF-1 生物学活性 | 第15-18页 |
·KGF-1 作用原理 | 第15页 |
·KGF-1 生物学活性 | 第15-16页 |
·KGF-1 与肿瘤发生 | 第16页 |
·KGF 与免疫调节 | 第16-18页 |
第2章 立题意义和研究任务 | 第18-20页 |
·立题意义 | 第18页 |
·本课题研究的目的 | 第18页 |
·本课题研究的主要内容 | 第18-19页 |
·技术路线 | 第19-20页 |
第3章 截短型人角质细胞生长因子纯化研究 | 第20-30页 |
·试剂与仪器 | 第20-22页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·检测方法 | 第21-22页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳检测 | 第21页 |
·Lowry 法测蛋白浓度 | 第21-22页 |
·RP-HPLC | 第22页 |
·破菌 | 第22-23页 |
·破菌过程优化 | 第22页 |
·破菌结果与结论 | 第22-23页 |
·△K23 粗纯化的研究 | 第23-26页 |
·△K23 粗纯化方法 | 第23-24页 |
·△K23 粗纯化结果与结论 | 第24-26页 |
·△K23 复性 | 第26页 |
·复性方法: | 第26页 |
·复性结果: | 第26页 |
·△K23 精纯化研究 | 第26-27页 |
·△K23 的精纯化工艺 | 第27页 |
·△K23 的精纯化结果与结论 | 第27页 |
·本章小结 | 第27-30页 |
第4章 截短型重组人角质细胞生长因子-1 聚乙二醇修饰纯化工艺研究 | 第30-40页 |
·试剂与仪器 | 第30-31页 |
·试剂及溶液 | 第30页 |
·仪器 | 第30-31页 |
·聚乙二醇修饰剂的筛选 | 第31页 |
·修饰工艺研究 | 第31-38页 |
·不同 pH 的对蛋白修饰率影响的研究 | 第31-32页 |
·修饰方法 | 第31-32页 |
·修饰结果与分析 | 第32页 |
·不同浓度尿素对修饰率影响的研究 | 第32-33页 |
·修饰方法 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33页 |
·不同 PEG 浓度比例对修饰率的影响的研究 | 第33-34页 |
·修饰方法 | 第33-34页 |
·结果与结论 | 第34页 |
·mPEG-Mal-20K 修饰 DTT 处理的△K23 的工艺研究 | 第34-35页 |
·修饰方法 | 第34-35页 |
·结果与结论 | 第35页 |
·DTT 处理的△K23 的修饰工艺优化 | 第35-37页 |
·修饰方法 | 第36页 |
·结果与结论 | 第36-37页 |
·△K23 的修饰工艺放大研究 | 第37-38页 |
·△K23(未 DTT 处理)修饰工艺放大 | 第37页 |
·△K23(DTT 处理)修饰工艺放大 | 第37页 |
·结果与结论 | 第37-38页 |
·聚乙二醇化△K23 的纯化工艺研究 | 第38页 |
·带 4mol/L 尿素修饰的 mPEG-Mal-△K23 的纯化 | 第38页 |
·柱修饰的 mPEG-Mal-△K23 的纯化 | 第38页 |
·本章小结 | 第38-40页 |
第5章 人角质细胞生长因子修饰位点确认 | 第40-48页 |
·试剂与仪器 | 第40-41页 |
·试剂 | 第40页 |
·仪器 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41页 |
·质量肽图的酶切 | 第41页 |
·LC-MS 条件研究 | 第41页 |
·质量肽图结果及讨论 | 第41-46页 |
·△K23 的质量肽图分析 | 第41-44页 |
·△K23 带尿素修饰的样品的质量肽图分析 | 第44-45页 |
·△K23 柱修饰样品的质量肽图分析 | 第45-46页 |
·本章小结 | 第46-48页 |
第6章 聚乙二醇化重组人角质细胞生长因子体内外生物活性的研究 | 第48-56页 |
·试剂与仪器 | 第48页 |
·试剂 | 第48页 |
·仪器 | 第48页 |
·体外实验方法 | 第48-50页 |
·NBL-7 细胞测活 | 第49页 |
·实验结果 | 第49-50页 |
·大鼠 5-FU 尿嘧啶肠粘膜损伤模型体内测活 | 第50-54页 |
·试剂配制与样品处理 | 第50页 |
·供试品及配制方法 | 第50页 |
·阳性对照品及配制方法 | 第50页 |
·溶媒(阴性对照) | 第50页 |
·造模用药及配制方法 | 第50页 |
·实验动物及饲养管理 | 第50-51页 |
·实验动物 | 第50-51页 |
·饲养管理 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-52页 |
·方法 | 第51-52页 |
·体内实验结果 | 第52-54页 |
·观察指标 | 第52页 |
·结果 | 第52-54页 |
·本章小结 | 第54-56页 |
第7章 总结及讨论 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
附录 | 第64页 |