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克鲁维酵母不对称还原合成倍他司汀重要手性中间体的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·手性化技术及其应用第8-9页
   ·手性醇化合物及其生物法合成第9-10页
     ·生物法动力学拆分第9-10页
     ·生物法不对称还原第10页
   ·不对称还原前手性芳基酮微生物的获得第10-11页
     ·依靠已知序列和基因数据库采用基因挖掘策略构建重组菌株第10-11页
     ·从自然界中筛选不对称还原芳基族羰基化合物为手性芳基醇的菌株第11页
   ·双水相体系中的生物反应第11页
   ·立体选择性羰基还原酶的分离纯化第11-12页
   ·不对称合成(S)-CPMA 的研究进展第12-13页
     ·产品概况第12页
     ·生物技术在制药行业的发展现状第12页
     ·组胺及抗组胺药物的市场概况第12-13页
     ·(S)-(4-氯苯基)(吡啶-2-基)甲醇合成技术概况第13页
   ·论文的研究意义和主要研究内容第13-16页
     ·课题来源第13页
     ·课题的研究意义第13-14页
     ·课题的主要内容第14-16页
第二章 材料与方法第16-22页
   ·材料第16-17页
     ·菌种第16页
     ·试剂第16页
     ·主要仪器设备第16页
     ·主要培养基第16-17页
   ·方法第17-22页
     ·菌种筛选第17页
     ·菌株细胞发酵还原酶活力的测定第17页
     ·菌株细胞在水相体系中的不对称还原反应第17-18页
     ·菌株细胞透性化处理方法第18页
     ·添加剂对 CPMK 不对称还原反应的影响第18页
     ·双水相反应体系的筛选第18页
     ·PEG 4000/Na_2HPO_4双水相系统相图绘制方法第18-19页
     ·双水相体系中的不对称还原反应第19页
     ·HPLC 检测分析方法第19页
     ·产品的分离与鉴定第19页
     ·Kluyveromyces sp.胞内羰基还原酶的分离纯化第19-21页
     ·Kluyveromyces sp.胞内羰基还原酶的最适反应温度和热稳定性第21页
     ·Kluyveromyces sp.胞内羰基还原酶的最适反应 pH 和 pH 稳定性第21页
     ·Kluyveromyces sp.胞内羰基还原酶的底物特异性第21页
     ·反应产物 e.e.值和产率的计算第21-22页
第三章 结果与讨论第22-47页
   ·菌种筛选第22-23页
   ·绘制系统进化树第23-24页
   ·Kluyveromyces sp.发酵产酶时间进程曲线第24页
   ·Kluyveromyces sp.水相转化反应条件优化第24-29页
     ·反应 pH 对 CPMK 不对称还原反应的影响第24-25页
     ·反应温度对 CPMK 不对称还原反应的影响第25-26页
     ·菌体浓度对 CPMK 不对称还原反应的影响第26-27页
     ·辅底物对 CPMK 不对称还原反应的影响第27页
     ·底物浓度对 CPMK 不对称还原反应的影响第27-28页
     ·产物浓度对 CPMK 不对称还原反应的影响第28-29页
     ·水相反应时间对 CPMK 不对称还原反应的影响第29页
   ·细胞透性处理对不对称还原 CPMK 的影响第29-30页
   ·不同添加剂对 CPMK 不对称还原反应的影响第30-31页
   ·双水相反应体系的筛选第31页
   ·双水相反应体系条件优化第31-35页
     ·绘制 PEG 4000/Na_2HPO_4的双水相相图第31-32页
     ·PEG 4000 含量对还原 CPMK 反应的影响第32-33页
     ·Na2HPO4含量对还原 CPMK 反应的影响第33页
     ·双水相体系中底物浓度对不对称还原 CPMK 反应的影响第33-34页
     ·双水相体系中不对称还原 CPMK 的反应时间进程曲线第34-35页
     ·双水相体系中不对称还原 CPMK 的 1 L 体系反应时间进程曲线第35页
   ·产品的分离与鉴定第35-36页
   ·Kluyveromyces sp.胞内羰基还原酶的分离纯化第36-47页
     ·超声破碎条件的确定第36-38页
     ·硫酸铵分级沉淀第38-39页
     ·DEAE-Sepharose FF 阴离子交换层析第39页
     ·Sephadex G-100 凝胶层析第39-40页
     ·蛋白质纯化结果第40-41页
     ·Kluyveromyces sp.的羰基还原酶酶学性质的研究第41-47页
主要结论与展望第47-49页
 主要结论第47-48页
 展望第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-55页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第55页

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