| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述（猪繁殖与呼吸综合征病毒概论） | 第9-25页 |
| 1 PRRSV 病原特性 | 第9-14页 |
| ·PRRSV 的分类地位 | 第9页 |
| ·PRRSV 的理化特性 | 第9-10页 |
| ·PRRSV 的抗原特性 | 第10页 |
| ·PRRSV 的细胞增殖特性 | 第10-11页 |
| ·PRRSV 的致病机理 | 第11-14页 |
| 2 PRRSV 分子生物学研究进展 | 第14-18页 |
| ·PRRSV 的基因组 | 第14-15页 |
| ·病毒的蛋白质 | 第15-18页 |
| 3 PRRSV 的危害及流行病学 | 第18-20页 |
| 4 临床症状 | 第20-21页 |
| 5 病理学 | 第21页 |
| 6 诊断 | 第21-24页 |
| ·血清学诊断方法 | 第22-23页 |
| ·病毒分离 | 第23页 |
| ·反转录聚合酶链式反应（RT-PCR） | 第23页 |
| ·核酸探针技术 | 第23-24页 |
| 7 防制 | 第24-25页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒的培养与ORF5 基因的克隆 | 第25-41页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| ·毒株、细胞与菌株 | 第25页 |
| ·工具酶、载体及主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第25-26页 |
| ·质粒提取用缓冲液及鉴定试剂 | 第26-27页 |
| ·感受态细胞制备用试剂 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-34页 |
| ·病毒培养 | 第27页 |
| ·病毒基因组RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·引物的设计与合成 | 第28页 |
| ·PRRSV FZ 株ORF5 基因片段的扩增 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第29-30页 |
| ·pMD 18 simple T Vector 与目的片段的连接 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第31页 |
| ·连接产物的转化 | 第31-32页 |
| ·质粒的制备与筛选鉴定 | 第32-34页 |
| ·序列分析与比较 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-40页 |
| ·病毒培养 | 第34-35页 |
| ·PRRSV ORF5 基因的RT-PCR 扩增结果 | 第35页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·PRRSV GP5 基因的序列测定结果 | 第36页 |
| ·ORF5 基因编码蛋白质序列的推导 | 第36-37页 |
| ·ORF5 基因核苷酸同源性比较 | 第37-38页 |
| ·PRRSV FZ 株与其他株ORF5 基因相应的氨基酸序列同源性比较 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 PRRSV FZ 株GP5 蛋白的原核表达 | 第41-52页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| ·菌株与载体 | 第41页 |
| ·试剂与培养基 | 第41页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第41-43页 |
| ·试验仪器 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-47页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第43-45页 |
| ·GP5 蛋白的诱导表达 | 第45页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第45-46页 |
| ·Western blotting（采用湿转） | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-50页 |
| ·重组表达质粒的PCR 鉴定与酶切鉴定结果 | 第47页 |
| ·重组表达质粒的序列分析 | 第47-48页 |
| ·BL- pGEX 6p-1-GP5 阳性质粒鉴定结果 | 第48页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果 | 第48-49页 |
| ·Western blotting 的结果 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
