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乳杆菌的有氧代谢与枯草芽孢杆菌益生作用机制研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
符号说明及缩写词第16-17页
第一章 绪论第17-41页
   ·乳酸菌第17-18页
     ·乳酸菌简介第17页
     ·乳杆菌简介第17-18页
     ·Lb.plantarum和Lb.brevis简介第18页
   ·乳杆菌的有氧代谢第18-24页
     ·乳杆菌的葡萄糖代谢第18-21页
     ·Lb.plantarm的有氧代谢第21-23页
     ·Lb.brevis的有氧代谢第23-24页
   ·乳酸菌与氧胁迫第24-31页
     ·氧胁迫来源及毒性机制第24-27页
     ·乳酸菌对抗氧胁迫的策略第27页
     ·酸胁迫与氧胁迫对乳酸菌的共同作用第27-28页
     ·乳杆菌的过氧化氢酶、代谢与H_2O_2的产生第28-31页
   ·乳酸菌的有氧呼吸研究进展第31-37页
     ·乳酸菌最基本的呼吸体系第31-32页
     ·具有有氧呼吸能力或潜力的乳酸菌第32-34页
     ·有氧呼吸对乳酸菌生长代谢的作用第34-35页
     ·有氧呼吸代谢的应用和研究意义第35-36页
     ·Lb.plantarum的电子传递链第36-37页
   ·B.subtilis及益生菌制剂第37-39页
     ·益生菌与肠道菌群第37-38页
     ·饲用芽孢杆菌的生理功能第38页
     ·B.subtilis增加和维持有益菌的机理第38-39页
   ·本文研究内容第39-41页
第二章 Lb.plantarum的发酵、有氧代谢与氧胁迫第41-53页
   ·材料第41-42页
     ·菌株第41页
     ·培养基第41页
     ·试剂第41-42页
     ·仪器第42页
   ·方法第42-45页
     ·培养条件第43页
     ·Lb.plantarum LA1的生物量、存活力、发酵液pH值测定第43页
     ·Lb.plantarum LA1的代谢产物测定第43页
     ·过氧化氢酶的定性分析第43页
     ·过氧化氧酶的定量分析第43-44页
     ·乳杆菌染色体提取第44-45页
   ·结果第45-51页
     ·外源血红素激活Lb.plantarum LA1的过氧化氢酶第45页
     ·Lb.plantarum LA1的生长曲线及存活力第45-46页
     ·Lb.plantarum LA1的糖代谢产物及发酵液pH值第46-48页
     ·Lb.plantarum LA1有氧代谢产生H_2O_2第48-49页
     ·氧胁迫对Lb.plantarum LA1的DNA损伤第49-50页
     ·长期存放对有氧代谢的Lb.plantarum LA1存力的影响第50-51页
   ·讨论第51-53页
第三章 Lb.brevis的发酵与有氧代谢研究第53-71页
   ·材料第53-54页
     ·菌株及载体第53页
     ·培养基第53-54页
     ·试剂第54页
     ·仪器第54页
   ·方法第54-58页
     ·培养条件第54-55页
     ·E.coli感受态细胞的制备及转化第55页
     ·乳杆菌感受态细胞制备及转化第55-56页
     ·敲除载体pUC19-Erm~r-cydA的构建第56-57页
     ·Lb.brevis ATCC 367-cydA缺陷株的构建第57-58页
     ·γ-氨基丁酸的纸层析第58页
   ·结果第58-70页
     ·外源血红素激活Lb.brevis ATCC 367的过氧化氢酶第58-59页
     ·Lb.brevis ATCC 367的生长曲线及存活力第59-60页
     ·Lb.brevis ATCC 367的糖代谢产物及发酵液PH值第60-62页
     ·Lb.brevis ATCC 367有氧代谢产生H_2O_2第62页
     ·长期存放对有氧代谢Lb.brevis ATCC 367存活力的影响第62-63页
     ·Lb.brevis ATCC 367-cydA突变株的构建及其代谢特性第63-67页
     ·有氧代谢对Lb.brevis ATCC 367生产Γ-氨基丁酸能力的影响第67-70页
   ·讨论第70-71页
第四章 Lb.brevis有氧代谢时乳酸向乙酸的转化途径第71-81页
   ·材料第71-72页
     ·菌株及载体第71页
     ·培养基第71页
     ·试剂第71-72页
     ·仪器第72页
   ·方法第72-73页
     ·Lb.brevis ATCC 367-pox和Lb.brevis ATCC 367-pdh突变株的构建第72-73页
     ·Lb.brevis ATCC 367pox和pdh基因的实时荧光定量PCR第73页
   ·结果第73-79页
     ·突变株的PCR验证第73-74页
     ·Lb.brevis ATCC 367-pox突变株的代谢特性第74-76页
     ·Lb.brevis ATCC 367-pdh突变株的代谢特性第76-77页
     ·氧气和葡萄糖对pox和pdh基因的农达调控第77-79页
   ·讨论第79-81页
第五章 B.subtilis协助乳杆菌对抗氧胁迫第81-95页
   ·材料第81-82页
     ·菌株及载体第81页
     ·培养基第81-82页
     ·试剂第82页
     ·仪器第82页
   ·方法第82-84页
     ·培养条件第82页
     ·Lb.plantarum 或Lb.brevis与B.subtilis 168的活菌混合培养第82-83页
     ·B.subtilis 168自裂解液的制备第83页
     ·Lb.plantarum LA1在B.subtilis 168自裂解液中的培养第83页
     ·B.subtilis 168在人工肠液中的自裂解第83页
     ·B.subtilis 168自裂解液中血红素的检测第83-84页
     ·Lb.plantarum LA1-kat突变株的构建第84页
   ·结果第84-94页
     ·Lb.plantarum-pL157及Lb.brevis-pL157的质粒验证第84-85页
     ·Lb.plantarum或Lb.brevis与B.subtilis 168的活菌混合培养第85-87页
     ·B.subltlis 168的自裂解第87-89页
     ·B.subltlis 168自裂解液中血红素的验证第89-90页
     ·Lb.plantarum LA1-kat突变株的构建第90页
     ·B.subtilis 168自裂解液激活Lb.plantarum LA1过氧化氢酶第90-91页
     ·B.subtilis 168自裂解液解除Lb.plantarum LA1所受氧胁迫第91-93页
     ·B.subtilis 168自裂解液减少Lb.plantarum LA1的DNA损伤第93-94页
   ·讨论第94-95页
第六章 乳杆菌与B.subtilis混合型微生态制剂工艺创新初探第95-101页
   ·材料第95-96页
     ·菌株及载体第95页
     ·培养基第95页
     ·试剂第95-96页
   ·方法第96页
     ·Lb.casei BL23-pL157的电转化第96页
     ·乳杆菌与B.subtilis 168的混合培养第96页
     ·混合培养物中各活菌数的测定第96页
   ·结果第96-100页
     ·Lb.plantarum LA1、Lb.casei BL23静止培养与摇动培养生物量比较第96-97页
     ·混合培养接种条件的优化第97-98页
     ·混合培养物最佳收获时间点的确定第98-100页
   ·讨论第100-101页
参考文献第101-113页
致谢第113-114页
学位论文评阅及答辩情况表第114页

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