摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
符号说明 | 第7-11页 |
第1章 绪论 | 第11-21页 |
·疫苗的发展 | 第11页 |
·病毒样颗粒疫苗的研究 | 第11-13页 |
·病毒样颗粒的形成 | 第12页 |
·病毒样颗粒的应用 | 第12-13页 |
·乙肝核心抗原的研究 | 第13-17页 |
·乙肝核心抗原的结构原理 | 第13-15页 |
·乙肝核心抗原的免疫学特性 | 第15页 |
·乙肝核心抗原载体技术的研究现状 | 第15-17页 |
·本课题的意义 | 第17-21页 |
·荧光蛋白介绍 | 第18-19页 |
·课题介绍 | 第19-21页 |
第2章 重组质粒的构建及鉴定 | 第21-37页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·菌株、质粒、酶及试剂 | 第21页 |
·主要仪器及设备 | 第21页 |
·试剂配制 | 第21-23页 |
·实验方法 | 第23-32页 |
·实验流程 | 第23-24页 |
·引物的设计与合成 | 第24-25页 |
·质粒构建 | 第25-32页 |
·重组质粒的鉴定 | 第32页 |
·实验结果 | 第32-36页 |
·模板基因片段的扩增 | 第32-33页 |
·重组质粒C81-149-PET28a 的构建 | 第33-34页 |
·重组质粒ZsCore149-PET28a 的构建 | 第34-35页 |
·重组质粒ZsCore149-PET28a 的双酶切鉴定 | 第35-36页 |
·分析与讨论 | 第36-37页 |
第3章 Zscore 蛋白的诱导表达与条件优化 | 第37-50页 |
·实验材料 | 第37-39页 |
·菌株、质粒及试剂 | 第37页 |
·主要实验仪器及设备 | 第37页 |
·试剂配置 | 第37-39页 |
·实验方法 | 第39-44页 |
·表达宿主菌的选择 | 第39-41页 |
·不同表达条件的筛选 | 第41-42页 |
·发酵罐工艺研究 | 第42-44页 |
·实验结果 | 第44-48页 |
·表达菌株的选择 | 第44-46页 |
·表达条件的筛选 | 第46-48页 |
·诱导时机 | 第48页 |
·分析与讨论 | 第48-50页 |
第4章 纯化工艺的研究与开发 | 第50-65页 |
·实验材料 | 第50-51页 |
·试剂及层析填料 | 第50-51页 |
·主要实验仪器及设备 | 第51页 |
·缓冲试剂配制 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-57页 |
·检测方法的建立 | 第51-52页 |
·破菌方法的选择 | 第52-53页 |
·VLP 结构的确认 | 第53-54页 |
·初步纯化方法的研究 | 第54-56页 |
·精细纯化方法的研究 | 第56-57页 |
·实验结果 | 第57-63页 |
·超速离心的结果 | 第57-58页 |
·电镜实验结果 | 第58-59页 |
·沉淀工艺的结果 | 第59-60页 |
·初步纯化的结果 | 第60-61页 |
·精纯化的结果 | 第61-63页 |
·分析与讨论 | 第63-65页 |
第5章 检验及鉴定方法的建立 | 第65-77页 |
·Zscore 单体蛋白的纯度检测方法 | 第65-67页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第65-66页 |
·毛细管电泳 | 第66-67页 |
·颗粒蛋白的均一性检测方法 | 第67-73页 |
·分子排阻色谱法 | 第67-69页 |
·动态光散射(DLS) | 第69-70页 |
·分析超离(AUC) | 第70-73页 |
·Zscore 蛋白结构中Zsgreen 免疫原性的检测 | 第73-77页 |
第6章 总结与展望 | 第77-78页 |
·主要结论 | 第77页 |
·存在的问题和展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第84-86页 |