| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·基因组结构 | 第12-13页 |
| ·EV71 病毒颗粒 | 第13-14页 |
| ·EV71 病毒常见检测方法 | 第14-16页 |
| ·EV71 病毒感染的临床表现 | 第16-17页 |
| ·手足口病（EV71 感染）流行现状 | 第17-19页 |
| ·EV71 病毒疫苗研究现状 | 第19-20页 |
| ·本论文研究意义 | 第20-21页 |
| 第二章 EV71 病毒衣壳蛋白VP1、VP2、VP3、VP4 表达载体的构建 | 第21-40页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·菌株及质粒 | 第21页 |
| ·酶及试剂 | 第21页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·EV71 病毒总RNA 基因组的抽提 | 第22页 |
| ·EV71 病毒总cDNA 的扩增 | 第22-23页 |
| ·VP1、VP2、VP3、VP4 重组表达载体构建 | 第23-30页 |
| ·VP1、VP2、VP3、VP4 菌株表达鉴定 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-37页 |
| ·VP1、VP2、VP3、VP4 重组表达载体构建鉴定结果 | 第31-35页 |
| ·VP1、VP2、VP3、VP4 菌株表达鉴定结果 | 第35-37页 |
| ·分析与结论 | 第37-40页 |
| 第三章 VP1、VP2、VP3、VP4 重组蛋白的发酵表达及纯化 | 第40-62页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·主要设备 | 第41页 |
| ·培养基配制 | 第41-42页 |
| ·缓冲液配制 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·灭菌 | 第42-43页 |
| ·种子液培养 | 第43页 |
| ·工程菌在30L 罐中的发酵条件 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白VP1 的纯化 | 第44-45页 |
| ·VP1 包涵体透析复性 | 第45页 |
| ·VP2、VP3、VP4 衣壳蛋白纯化及复性 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-58页 |
| ·发酵过程参数和电泳鉴定结果 | 第45-54页 |
| ·镍金属螯合层析图谱 | 第54-56页 |
| ·纯化结果SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第56-58页 |
| ·分析与结论 | 第58-62页 |
| ·发酵部分分析与结论 | 第58-59页 |
| ·纯化部分分析与结论 | 第59-62页 |
| 第四章 人肠道病毒71 型衣壳蛋白 VP1、VP2、VP3、VP4 免疫原性和体外免疫保护性研究 | 第62-75页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·实验主要试剂 | 第62页 |
| ·实验动物及抗原 | 第62页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-70页 |
| ·免疫接种 | 第63-64页 |
| ·血清阳转率的检测 | 第64-66页 |
| ·血清抗体滴度的检测 | 第66-68页 |
| ·血清体外中和效价的检测 | 第68-70页 |
| ·结果 | 第70-73页 |
| ·阳转率检测结果 | 第70-71页 |
| ·抗体滴度检测结果 | 第71-73页 |
| ·体外中和抗体效价检测结果 | 第73页 |
| ·分析与结论 | 第73-75页 |
| 第五章 小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第83页 |
