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在铜矿矿坑水微生物群落结构与功能研究中基因芯片技术的发展和应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 引言第12-34页
   ·酸性矿坑水的来源及化学性质第12-14页
     ·酸性矿坑水的来源及化学性质第12-13页
     ·硫化矿物的溶解第13-14页
   ·酸性浸矿水中微生物的多样性第14-23页
     ·细菌和古菌第14-15页
     ·真核生物第15-16页
     ·AMD环境中嗜酸性微生物的一般特征第16-17页
     ·酸性矿坑水中嗜酸性微生物的代谢途径第17-20页
     ·酸性矿坑水中嗜酸性微生物的金属耐受性能及抗性第20-21页
     ·酸性矿坑水中嗜酸性微生物的丰度,群落结构以及与物理、化学特征的关系第21-23页
   ·环境微生物多样性的基因组学分析方法第23-34页
     ·基因的选择第23-24页
     ·微生物多样性分析常用的基因组学方法及其优缺点第24-27页
     ·基因芯片技术及其在环境微生物研究中的应用第27-34页
第二章 德兴铜矿酸性浸矿水中微生物群落的多样性及群落结构变化第34-50页
   ·材料与方法第35-38页
     ·采样点描述及样品收集第35-36页
     ·地理化学参数分析第36页
     ·群落基因组DNA的抽提、纯化以及16S rRNA基因的扩增和克隆第36-37页
     ·序列测定及系统发育分析第37页
     ·数据统计及分析第37-38页
     ·核苷酸序列登记号第38页
   ·结果第38-45页
     ·样品的地理化学特征第38-40页
     ·RFLP分析第40页
     ·系统发育分析第40-44页
     ·微生物群落,地理距离和环境变量第44-45页
   ·讨论第45-49页
   ·小结第49-50页
第三章 16S RRNA和GYRB基因在分析微生物群落结构上的比较第50-63页
   ·材料与方法第51-53页
     ·样品描述和样品收集第51页
     ·A.ferrooxidans的培养第51页
     ·DNA抽提与纯化第51页
     ·16S rDNA和gyrB基因的PCR扩增第51-52页
     ·16S rRNA和gyrB基因的克隆和限制型酶切第52页
     ·DNA测序和系统发育分析第52页
     ·数据分析第52-53页
     ·核苷酸序列登记号第53页
   ·结果第53-59页
     ·16S rDNA and gyrB基因克隆文库的RFLP分析第53-54页
     ·微生物群落的系统发育分析第54-59页
     ·Acidithiobacillus ferrooxidans菌株的系统发育分析第59页
   ·讨论第59-61页
   ·小结第61-63页
第四章 利用16S RRNA和GYRB基因分析德兴铜矿酸性浸矿水中微生物群落结构研究第63-75页
   ·材料与方法第64-66页
     ·样点描述及样品采集第64页
     ·水样的化学分析第64页
     ·DNA抽提及纯化第64页
     ·16S rRNA和gyrB基因的PCR扩增及纯化第64页
     ·16S rRNA和gyrB基因的克隆及限制性酶切第64页
     ·序列测定和系统发育分析第64-65页
     ·统计方法第65-66页
     ·核苷酸序列登记号第66页
   ·结果第66-69页
     ·样点的地理化学变量第66页
     ·16S rRNA和gyrB基因克隆文库的RFLP分析第66-67页
     ·主成分分析(PCA)第67-68页
     ·系统发育分析第68-69页
   ·讨论第69-74页
   ·小结第74-75页
第五章 用于酸性矿浸水及生物浸出体系中微生物群落及功能分析的50MER寡核苷酸芯片的构建与评估第75-87页
   ·材料与方法第76-79页
     ·细菌及环境样品DNA的抽提和纯化第76-77页
     ·16S rRNA,iro,cbbQ,gyrB和pufM基因的PCR扩增和纯化第77页
     ·芯片设计和构建第77-78页
     ·DNA的荧光标记第78页
     ·芯片杂交第78-79页
     ·图像处理和数据分析第79页
   ·结果第79-84页
     ·探针设计第79-80页
     ·基因芯片的特异性评估第80页
     ·基因芯片的灵敏度第80-81页
     ·芯片杂交的定量性能第81页
     ·运用50mer寡核苷酸基因芯片揭示酸性环境样品中的微生物群落结构第81-84页
   ·讨论第84-86页
   ·小结第86-87页
第六章 应用寡核苷酸基因芯片检测酸性浸矿水中微生物群落和功能第87-95页
   ·材料与方法第87-88页
     ·样品描述第87-88页
     ·环境样品中DNA的抽提和纯化及定量第88页
     ·DNA的荧光标记第88页
     ·芯片杂交第88页
     ·图像处理和数据分析第88页
   ·结果分析第88-94页
     ·建立在基因芯片16S rRNA数据上的微生物群落分析第88-93页
     ·应用基因芯片检测AMD样品中微生物群落的功能第93-94页
   ·讨论与小结第94-95页
参考文献第95-119页
致谢第119-120页
攻读博士学位期间所发表的论文第120页

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