中英文摘要 | 第1-9页 |
一、 文献综述 | 第9-23页 |
1.1 昆虫免疫的细胞和分子介导机理 | 第9-13页 |
1.1.1 昆虫免疫系统对非己分子的识别 | 第9-11页 |
1.1.2 血细胞反应 | 第11-13页 |
1.1.3 酚氧化酶和褐化 | 第13页 |
1.2 抗菌肽的生物合成 | 第13-16页 |
1.3 昆虫抗菌肽及其抗菌活性 | 第16-21页 |
1.3.1 昆虫杀菌肽 | 第16页 |
1.3.2 昆虫防御素 | 第16-17页 |
1.3.3 富含半胱氨酸(Cys)抗菌肽 | 第17-18页 |
1.3.4 死亡素 | 第18页 |
1.3.5 富含脯氨酸(Pro)抗菌肽 | 第18-20页 |
1.3.5.1 没有取代的短链富含脯氨酸(Pro)抗菌肽 | 第18-19页 |
1.3.5.2 没有取代的长链富含脯氨酸(Pro)抗菌肽 | 第19页 |
1.3.5.3 O-糖基化的富含脯氨酸(Pro)抗菌肽 | 第19-20页 |
1.3.6 富含甘氨酸(Gly)的抗菌肽家族:Gloverins | 第20-21页 |
1.4 昆虫抗菌肽的基因表达调控 | 第21-23页 |
二、 引言 | 第23-26页 |
2.1 论文研究的立题依据和目的意义 | 第23-25页 |
2.2 小皱蝽抗菌肽AMP纯化的技术路线 | 第25-26页 |
三、 材料和方法 | 第26-33页 |
3.1 材料 | 第26-27页 |
3.1.1 研究试虫及供试菌株 | 第26页 |
3.1.2 主要试验仪器 | 第26页 |
3.1.3 主要化学试剂 | 第26-27页 |
3.2 方法 | 第27-33页 |
3.2.1 抗菌活性的测定 | 第27-28页 |
3.2.1.1 滤纸片法 | 第27页 |
3.2.1.2 混菌平板法 | 第27页 |
3.2.1.3 黑曲霉双层平板检测抗真菌活性 | 第27-28页 |
3.2.2 小皱蝽抗菌肽的诱导、提取及初分级分离 | 第28-29页 |
3.2.2.1 小皱蝽抗菌肽的诱导 | 第28页 |
3.2.2.2 小皱蝽抗菌肽产生部位的确定 | 第28页 |
3.2.2.3 小皱蝽抗菌肽不同提取方法的选择 | 第28-29页 |
3.2.2.4 小皱蝽抗菌肽粗提液的Millipore超滤系统超滤 | 第29页 |
3.2.2.5 超滤穿膜液的固相萃取(SPE) | 第29页 |
3.2.3 小皱蝽抗菌肽的高效液相色谱纯化制备 | 第29-31页 |
3.2.3.1 反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化 | 第29-30页 |
3.2.3.2 凝胶过滤高效液相色谱(GP-HPLC)纯化 | 第30页 |
3.2.3.3 反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化 | 第30页 |
3.2.3.4 AMP色谱纯品的纯度鉴定 | 第30页 |
3.2.3.5 AMP各步纯化蛋白质浓度的测定及分离纯化总结 | 第30-31页 |
3.2.4 AMP物理、化学性质的初步测定 | 第31页 |
3.2.4.1 AMP紫外吸收光谱测定 | 第31页 |
3.2.4.2 AMP的茚三酮反应实验 | 第31页 |
3.2.4.3 AMP的分子量测定 | 第31页 |
3.2.5 小皱蝽抗菌肽AMP的部分性质测定 | 第31-33页 |
3.2.5.1 AMP的温敏性测定 | 第31-32页 |
3.2.5.2 不同pH条件下,AMP抗菌活性的变化 | 第32页 |
3.2.5.3 AMP的抗菌谱测定 | 第32页 |
3.2.5.4 AMP的MIC测定 | 第32-33页 |
四、 结果与分析 | 第33-48页 |
4.1 小皱蝽的生物学特性 | 第33-34页 |
4.2 小皱蝽抗菌肽的诱导 | 第34-36页 |
4.3 小皱蝽抗菌肽不同提取方法的选择 | 第36-38页 |
4.4 粗提液的Millipore超滤系统膜分离 | 第38页 |
4.5 AMP超滤穿膜液的固相萃取初分级分离 | 第38-39页 |
4.6 AMP的高效液相色谱纯化 | 第39-41页 |
4.7 AMP各步纯化抗菌活性测定及分离纯化总结 | 第41-43页 |
4.8 AMP紫外吸收光谱及茚三酮反应实验 | 第43-44页 |
4.9 AMP的分子量测定 | 第44页 |
4.10 AMP部分性质测定 | 第44-48页 |
4.10.1 AMP的温敏性测定 | 第44-45页 |
4.10.2 AMP抗菌活性在不同pH条件下的变化 | 第45-46页 |
4.10.3 AMP的抗菌谱测定 | 第46-47页 |
4.10.4 AMP对典型菌株的MIC测定 | 第47-48页 |
五、 讨论 | 第48-55页 |
5.1 昆虫抗菌肽的诱导 | 第48-49页 |
5.2 抗菌肽的抗菌活性及其检测方法的优化 | 第49-50页 |
5.3 抗菌肽提取及粗纯中常见的方法 | 第50-51页 |
5.4 小皱蝽抗菌肽AMP高效液相色谱纯化方法的建立及优化 | 第51-53页 |
5.5 蛋白质纯度的鉴定方法及评价 | 第53页 |
5.6 昆虫抗菌肽的应用前景 | 第53-55页 |
小结 | 第55-56页 |
缩略语表 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
致谢 | 第64页 |