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水稻响应纹枯病菌AG1 IA侵染比较转录组分析及抗性相关基因鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 文献综述第12-23页
    1.1 水稻纹枯病第12-16页
        1.1.1 纹枯病菌分类、生活史和病害流行第13-14页
        1.1.2 纹枯病菌侵染过程第14-15页
        1.1.3 纹枯病菌致病机制第15-16页
        1.1.4 水稻纹枯病鉴定第16页
    1.2 植物抗病机制第16-20页
        1.2.1 植物PTI免疫反应第17-19页
        1.2.2 植物ETI免疫反应第19-20页
    1.3 基于RNA-seq的植物抗病转录组学研究第20-21页
    1.4 立体依据和研究意义第21-23页
第二章 基于RNA-Seq技术的纹枯病菌AG1 IA侵染水稻叶片比较转录组分析第23-57页
    2.1 材料与方法第23-29页
        2.1.1 试验材料第23页
        2.1.2 试验方法第23-24页
        2.1.3 菌丝侵染染色及观察第24页
        2.1.4 总RNA提取、cDNA文库构建及Illumina测序第24-25页
        2.1.5 转录组数据与参考基因组序列比对第25-26页
        2.1.6 转录本组装、合并与比较分析第26页
        2.1.7 转录本定量分析第26-27页
        2.1.8 转录本数据探索分析第27页
        2.1.9 时间序列表达模式挖掘第27-28页
        2.1.10 SOM网络的基因表达数据聚类第28页
        2.1.11 功能富集分析第28-29页
        2.1.12 荧光定量PCR验证第29页
    2.2 结果与分析第29-51页
        2.2.1 关于材料的选择和取样时间点的确定第29-31页
        2.2.2 转录组样本的测序结果统计第31-32页
        2.2.3 转录组数据注释第32-34页
        2.2.4 水稻转录组数据的聚类分析和基因表达情况的Real-time PCR检测第34-36页
        2.2.5 特青和莱蒙特各接种时间点差异基因分析第36-39页
        2.2.6 特青和莱蒙特上调差异基因的GO富集分析第39-44页
        2.2.7 特青和莱蒙特差异表达基因KEGG富集分析第44-46页
        2.2.8 苯丙氨酸类代谢第46-47页
        2.2.9 茉莉酸代谢第47-48页
        2.2.10 基于自组织映射网络的基因聚类第48-51页
    2.3 讨论第51-57页
        2.3.1 光合作用第52-53页
        2.3.2 光呼吸第53页
        2.3.3 抗性次生代谢产物第53-54页
        2.3.4 植物-病原物互作第54-55页
        2.3.5 茉莉酸信号途径第55-57页
第三章 基于WGCNA的水稻纹枯病抗感基因模块识别及共表达网络构建分析第57-75页
    3.1 试验材料与方法第57-60页
        3.1.1 数据收集及处理第57页
        3.1.2 基因共表达网络构建与基因模块划分第57-58页
        3.1.3 基因共表达模块与表型和外界作用的关联第58-59页
        3.1.4 基于核心基因的基因共表达网络构建第59页
        3.1.5 模块内基因功能注释第59-60页
    3.2 结果与分析第60-71页
        3.2.1 样品聚类第60页
        3.2.2 基因共表达网络的构建第60-61页
        3.2.3 特青特异性模块查找及分析第61-63页
        3.2.4 莱蒙特特异性模块查找及分析第63-65页
        3.2.5 特青和莱蒙特枢纽基因表达网络比较第65-68页
        3.2.6 全局核心基因分析及抗性核心基因分析第68-71页
    3.3 讨论第71-75页
第四章 水稻胞质激酶OsRL CK5调节水稻的纹枯病抗性第75-105页
    4.1 试验材料第75页
    4.2 试验方法第75-88页
        4.2.1 序列分析第75-76页
        4.2.2 水稻叶片总DNA提取(CTAB法)第76页
        4.2.3 总RNA提取第76-77页
        4.2.4 质粒小量提取方法第77-78页
        4.2.5 OsRL CK5 PCR扩增和载体构建第78-80页
        4.2.6 亚细胞定位第80页
        4.2.7 酵母双杂交技术第80-81页
        4.2.8 酵母质粒提取第81-82页
        4.2.9 双分子荧光互补技术第82-83页
        4.2.10 cDNA合成和qRT-PCR第83-84页
        4.2.11 农杆菌转化及注射本生烟第84-85页
        4.2.12 病原菌接菌及鉴定第85页
        4.2.13 叶绿素含量测定第85页
        4.2.14 抗性相关基因测定第85-86页
        4.2.15 活性氧检测第86页
        4.2.16 相关防御酶测定第86-88页
    4.3 结果与分析第88-101页
        4.3.1 OsRL CK5基因表达分析第88-89页
        4.3.2 OsRL CK5基因编码蛋白质生物信息学分析第89页
        4.3.3 OsRL CK5蛋白质的保守结构域及同源性第89-91页
        4.3.4 OsRL CK5基因亚细胞定位第91-92页
        4.3.5 酵母双杂交和BiFC验证第92-94页
        4.3.6 OsRL CK5干涉降低了特青对纹枯病的抗性第94-95页
        4.3.7 OsRL CK5过表达增强了莱蒙特对纹枯病的抗性第95-96页
        4.3.8 接菌后叶绿素含量变化第96-97页
        4.3.9 活性氧及相关防御酶基因表达第97-99页
        4.3.10 抗性相关基因第99页
        4.3.11 茉莉酸合成相关基因第99-101页
    4.4 讨论第101-105页
第五章 OsBURP16对水稻纹枯病抗性的研究第105-116页
    5.1 试验材料与方法第105-108页
        5.1.1 试验材料及生长条件第105页
        5.1.2 DNA提取第105页
        5.1.3 叶片总RNA提取第105-106页
        5.1.4 质粒提取第106页
        5.1.5 载体构建和水稻遗传转化第106-107页
        5.1.6 亚细胞定位第107页
        5.1.7 酵母双杂交及酵母质粒提取第107页
        5.1.8 qRT-PCR第107页
        5.1.9 农杆菌转化及注射本生烟第107页
        5.1.10 病原菌接菌第107页
        5.1.11 抗性相关基因检测第107页
        5.1.12 数据分析第107-108页
    5.2 结果与分析第108-113页
        5.2.1 接菌后OsBURP16基因表达特点第108页
        5.2.2 OsBURP16亚细胞定位第108-109页
        5.2.3 酵母双杂交第109-111页
        5.2.4 干涉降低了特青对纹枯病菌AG1 IA抗性第111页
        5.2.5 过表达增强了莱蒙特对纹枯病菌AG1 IA抗性第111-112页
        5.2.6 抗性相关基因测定第112-113页
    5.3 讨论第113-115页
    5.4 研究存在的不足第115-116页
参考文献第116-137页
附录1第137-140页
附录2第140-142页
附录3第142-144页
附录4第144-145页
附录5第145-146页
附录6第146-149页
附录7第149-152页
攻读博士学位期间学术成果完成情况第152-153页
致谢第153页

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