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辣椒应答逆境的转录谱分析及相关候选基因cDNA分离与鉴定

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第12-25页
 1 辣椒种植栽培现状第12页
 2 植物响应逆境机制的研究现状第12-18页
   ·植物抵抗逆境胁迫的分子机制第12-13页
   ·几种重要化学物质在植物抵抗逆境中的作用第13-17页
   ·用于植物抗逆性改良的候选基因第17-18页
 3 功能基因组研究进展第18-24页
   ·功能基因组学第18-21页
   ·功能基因组研究技术第21-24页
 4 本课题研究的目的与意义第24-25页
第二章 辣椒响应若干胁迫的cDNA-AFLP分析第25-48页
 1 材料与方法第25-33页
   ·试验材料第25页
   ·试验方法第25-33页
 2 结果与分析第33-43页
   ·辣椒幼苗总RNA提取第33页
   ·cDNA-AFLP双酶切组合的选用与PCR扩增条件优化第33-34页
   ·cDNA-AFLP差异显示结果第34-35页
   ·TDFs序列的测序与分析第35页
   ·TDFs的表达和功能分类概况第35-37页
   ·ABA和ET对辣椒基因表达的影响第37-38页
   ·UV-B与疫霉处理下TDFs的分类第38页
   ·UV-B、疫霉与激素产生类似影响TDFs的统计第38-39页
   ·激素在辣椒信号传导过程中的互作第39-40页
   ·JA、JA+SA和SA对辣椒基因表达的影响第40页
   ·在JA、JA+SA和SA影响下TDFs变化情况的聚类第40-41页
   ·JA、SA、JA+SA调控类型的比较第41-42页
   ·激素处理不同时间对TDFs的影响第42页
   ·7种影响下TDF变化情况的聚类第42-43页
 3 小结与讨论第43-48页
   ·辣椒cDNA-AFLP表达谱分析试验的设计与执行第43页
   ·辣椒cDNA-AFLP表达谱的展示第43-48页
第三章 UV-B照射、疫霉侵染的辣椒幼苗消减文库的构建第48-64页
 1 材料与方法第48-56页
   ·试验材料第48页
   ·试验方法第48-56页
 2 结果与分析第56-62页
   ·mRNA质量检测第56页
   ·RsaI酶切检测第56页
   ·差减杂交及抑制PCR第56页
   ·抑制消减cDNA文库的构建第56页
   ·插入cDNA片段的PCR鉴定第56-57页
   ·cDNA片段的序列测定及同源性比对第57-58页
   ·响应UV-B照射相关基因功能的分析第58-59页
   ·响应疫霉侵染相关基因功能的分析第59-61页
   ·响应SA+JA处理相关基因功能的分析第61-62页
 3 小结与讨论第62-64页
   ·影响抑制消减文库质量的重要因素第62页
   ·辣椒响应UV-B照射、辣椒疫霉侵染的抑制消减文库第62-64页
第四章 辣椒幼苗cDNA文库的构建与若干候选基因的克隆第64-99页
 1 材料与方法第64-76页
   ·试验材料第64页
   ·试验方法第64-76页
 2 结果与分析第76-97页
   ·辣椒cDNA文库的构建第76-79页
   ·候选基因的筛选第79-81页
   ·阳性cDNA克隆的测序与功能注释第81-96页
   ·候选基因cDNA与候选基因TDFs的序列同源性比较第96-97页
 3 小结与讨论第97-99页
   ·辣椒cDNA文库构建与基因筛选第97-98页
   ·辣椒响应逆境的几个候选基因第98-99页
第五章 部分候选基因表达的荧光定量PCR分析第99-114页
 1 材料与方法第99-102页
   ·试验材料第99页
   ·试验方法第99-102页
 2 结果与分析第102-111页
   ·内参基因及各候选基因荧光定量PCR条件优化第102页
   ·标准曲线的建立第102-103页
   ·候选基因表达分析第103-111页
 3 小结与讨论第111-114页
   ·影响荧光定量PCR效果的重要因素第111页
   ·各候选基因的表达情况第111-114页
第六章 候选基因的转化载体构建与烟草转基因第114-129页
 1 材料与方法第114-123页
   ·试验材料第114-115页
   ·试验方法第115-123页
 2 结果与分析第123-127页
   ·候选基因加内外侧引物PCR反应的鉴定第123-124页
   ·BP反应重组质粒pDONR207-X的鉴定第124页
   ·LR反应重组质粒pMDC32-X的鉴定第124-125页
   ·转化子的鉴定第125页
   ·无菌苗的获得第125页
   ·外植体的处理第125页
   ·遗传转化与植株再生第125-126页
   ·PCR与RT-PCR检测第126-127页
 3 小结与讨论第127-129页
   ·Gateway技术的使用第127页
   ·BP、LR重组质粒和转化子的鉴定问题第127-128页
   ·农杆菌介导的烟草遗传转化第128-129页
总结第129-130页
参考文献第130-154页
附录第154-212页
 附录1 缩略词及英汉对照第154-155页
 附录2 主要仪器第155页
 附录3 主要试剂第155-156页
 附录4 试剂与缓冲液的配制第156-158页
 附录5 DNA Marker示意图第158-159页
 附录6 部分cDNA-AFLP实验聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱第159-161页
 附录7 TDFs综合信息统计表第161-178页
 附录8 TDFs的NCBI登录信息第178-180页
 附录9 TDFs的功能分类信息第180-183页
 附录10 TDFs的表达类型聚类信息第183-188页
 附录11 抑制消减文库部分克隆序列表第188-194页
 附录12 抑制消减文库部分克隆功能注释表第194-195页
 附录13 抑制消减文库部分克隆功能分析ID信息表第195-197页
 附录14 抑制消减文库部分克隆的亚细胞定位、生物过程及分子功能注释第197-206页
 附录15 部分荧光定量实验图谱第206-211页
 附录16 质粒载体图谱第211-212页
博士就读期间发表论文情况第212-213页
致谢第213页

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