| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-31页 |
| ·水稻病毒病 | 第10-11页 |
| ·常用的植物转基因方法 | 第11-16页 |
| ·基因枪介导转化法 | 第11页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第11-12页 |
| ·病毒载体介导法 | 第12-15页 |
| ·花粉管通道法 | 第15-16页 |
| ·植物抗病转基因工程研究进展 | 第16-22页 |
| ·转基因作物产业发展迅速 | 第16-17页 |
| ·植物抗病毒生物技术的策略 | 第17-22页 |
| ·来源于病毒基因介导的抗性 | 第17-20页 |
| ·来源于植物基因介导的抗性 | 第20-22页 |
| ·多方法策略 | 第22页 |
| ·植物RNA病毒寄主因子的研究进展 | 第22-26页 |
| ·RNA诱导的基因沉默 | 第26-30页 |
| ·反义RNA技术 | 第26-27页 |
| ·RNAi技术 | 第27-29页 |
| ·病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS) | 第29-30页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第30-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·水稻品种 | 第31页 |
| ·菌株与质粒 | 第31-32页 |
| ·常用培养基 | 第32页 |
| ·酶、PCR引物和化学试剂 | 第32页 |
| ·分子生物学操作 | 第32-33页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·其它分子生物学操作 | 第33页 |
| ·三亲结合法向农杆菌导入目的质粒 | 第33页 |
| ·水稻的遗传转化 | 第33-35页 |
| ·水稻愈伤组织的获得 | 第33-34页 |
| ·水稻愈伤组织的继代培养 | 第34页 |
| ·共培养 | 第34页 |
| ·筛选培养 | 第34页 |
| ·分化培养 | 第34页 |
| ·生根培养 | 第34-35页 |
| ·转基因的水稻的PCR检测 | 第35-37页 |
| ·水稻总DNA的提取 | 第35页 |
| ·转基因植株的PCR检测引物设计 | 第35-36页 |
| ·PCR产物的测序 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-53页 |
| ·水稻OsTOM1基因全长cDNA的克隆 | 第37-38页 |
| ·水稻OsTOM1基因RNAi表达质粒的构建 | 第38-41页 |
| ·水稻OsTOM1基因RNAi克隆质粒的构建 | 第38页 |
| ·水稻OsTOMl RNAi表达质粒的构建 | 第38-40页 |
| ·水稻OsTOM1 RNAi表达质粒导入农杆菌EHA105 | 第40-41页 |
| ·全长OsTOM1基因正义及反义表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·表达OsTOM1-RNAi转基因水稻台北309的构建 | 第42-45页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第42-43页 |
| ·拟转基因水稻植株的获得 | 第43-45页 |
| ·转基因TP309 T0代的鉴定 | 第45-48页 |
| ·台北309转基因植株的PCR检测 | 第45-47页 |
| ·PCR产物序列的测定和对比 | 第47-48页 |
| ·转基因植株的T1代遗传分析 | 第48-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-56页 |
| ·水稻OsTOM1基因 | 第53-54页 |
| ·水稻组织培养中的细节处理讨论 | 第54-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 第五章 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录一 实验中用到质粒结构图 | 第65-66页 |
| 附录二 各种常用培养基配方 | 第66-69页 |
| 附录三 PCR引物名称和序列 | 第69-70页 |
| 附录四 实验中用到的主要仪器 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第72页 |
