| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-31页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概述 | 第12-20页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的杀虫晶体蛋白基因 | 第13页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的杀虫机理 | 第13-16页 |
| ·昆虫中肠的Bt受体蛋白 | 第16-20页 |
| ·受体蛋白的分子本质 | 第17-18页 |
| ·中肠受体蛋白与昆虫的抗性 | 第18-19页 |
| ·中肠受体蛋白的应用研究 | 第19-20页 |
| ·核型多角体病毒概述 | 第20-26页 |
| ·NPV的生活史 | 第20-22页 |
| ·NPV的基因组成 | 第22-23页 |
| ·P74蛋白的功能研究 | 第23-26页 |
| ·Bt基因工程菌的研究 | 第26-29页 |
| ·本研究的背景、目的与立项依据 | 第29-31页 |
| 材料与方法 | 第31-43页 |
| ·材料 | 第31-35页 |
| ·NPV病毒 | 第31页 |
| ·菌株与质粒 | 第31页 |
| ·培养基和抗生素 | 第31页 |
| ·试剂和引物 | 第31-34页 |
| ·仪器设备 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-43页 |
| ·融合基因的构建路线 | 第35页 |
| ·病毒的培养及病毒DNA的获得 | 第35-37页 |
| ·昆虫的人工饲养及感染 | 第35页 |
| ·病毒多角体的获得 | 第35页 |
| ·从多角体病毒中提取病毒DNA | 第35-37页 |
| ·crylAc基因、crylAct基因和p74基因的克隆 | 第37-39页 |
| ·Bt 4.0718菌株质粒的提取 | 第37页 |
| ·PCR扩增含有上游启动序列的crylAc基因 | 第37页 |
| ·PCR扩增含有终止序列的终止子crylAct基因 | 第37-38页 |
| ·PCR扩增p74基因 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
| ·TA克隆融合基因片段 | 第39页 |
| ·中间载体pTp74Act的构建 | 第39-40页 |
| ·中间载体pTlAcp74的构建 | 第40页 |
| ·表达载体pHlAcp74的构建 | 第40页 |
| ·表达载体pHlAcp74电转化Bt | 第40-41页 |
| ·Bt感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·电转化 | 第41页 |
| ·菌落PCR检测 | 第41页 |
| ·融合基因在无晶体突变株中的表达及研究 | 第41-43页 |
| ·重组晶体的提取与分离 | 第41页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第41页 |
| ·原子力显微镜观察重组晶体的形状 | 第41-42页 |
| ·重组晶体杀虫毒力生测 | 第42-43页 |
| 结果与分析 | 第43-57页 |
| ·Bt 4.0718菌株质粒的抽提 | 第43页 |
| ·cry1Ac基因、crylAc终止子crylAct和p74基因的克隆 | 第43-47页 |
| ·crylAc基因的TA克隆和pTlAc的构建 | 第43-45页 |
| ·PCR扩增crylAc片段 | 第43页 |
| ·crylAc的TA克隆与pTlAc的构建 | 第43-45页 |
| ·crylAc终止子crylAct的TA克隆和pTlAct的构建 | 第45-47页 |
| ·PCR扩增crylAct片段 | 第45页 |
| ·crylAct的TA克隆与pTlAct的构建 | 第45-47页 |
| ·p74片段的扩增及TA克隆的构建 | 第47页 |
| ·PCR扩增p74片段 | 第47页 |
| ·p74的TA克隆与pTp74的构建 | 第47页 |
| ·中间载体pTp74Act的构建 | 第47-50页 |
| ·中间载体pTlAcp74的构建 | 第50-51页 |
| ·表达载体pHlAcp74的构建 | 第51-52页 |
| ·表达载体pHlAcp74电转化无晶体突变株XBU001 | 第52页 |
| ·融合基因在无晶体突变株中的表达与鉴定 | 第52-57页 |
| ·融合蛋白的分离提取和SDS-PAGE检测 | 第52-54页 |
| ·重组晶体蛋白的原子力显微镜观察 | 第54-55页 |
| ·工程菌XBU-HlAcp74的生物活性测定 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-59页 |
| ·Bt野生菌株的选择 | 第57页 |
| ·NPV的P74蛋白与病毒宿主的种属特异性 | 第57-58页 |
| ·昆虫的中肠受体蛋白与"共同受体" | 第58页 |
| ·本研究的特色 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
