摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
缩略词表 | 第15-16页 |
第一章 绪论 | 第16-28页 |
·丝状真菌Trichoderma reesei | 第16页 |
·纤维素酶分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
·纤维素酶系的组分 | 第17页 |
·纤维素酶降解纤维素的机制 | 第17页 |
·纤维素酶分子生物学研究进展 | 第17-18页 |
·β-葡萄糖苷酶分子生物学研究进展及应用 | 第18-24页 |
·β-葡萄糖苷酶研究历史及基本性质 | 第18-20页 |
·β-葡萄糖苷酶分子生物学研究进展 | 第20-23页 |
·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第23-24页 |
·绿色荧光蛋白及其应用 | 第24-26页 |
·绿色荧光蛋白的基本性质 | 第24-25页 |
·绿色荧光蛋白作为报告基因的优缺点 | 第25页 |
·绿色荧光蛋白在真菌分子生物学研究中的应用 | 第25-26页 |
·斜卧青霉JU-A10 | 第26-28页 |
第二章 T.reesei bgll基因的克隆及过量表达 | 第28-42页 |
·材料与方法 | 第28-35页 |
·菌株和质粒 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·培养基 | 第29页 |
·引物设计 | 第29-30页 |
·T.reesei染色体DNA的提取 | 第30-31页 |
·bgll基因的克隆及重组质粒构建 | 第31页 |
·T.reesei的转化及筛选 | 第31-32页 |
·转化子摇瓶发酵及酶活测定 | 第32-34页 |
·转化子bgll拷贝数的分析 | 第34-35页 |
·结果与讨论 | 第35-40页 |
·bgll基因的克隆及重组质粒的构建 | 第35-37页 |
·T.reesei的转化及转化子的筛选验证 | 第37-38页 |
·转化子的发酵筛选及酶活测定 | 第38-39页 |
·转化子bgll基因拷贝数分析 | 第39-40页 |
·本章小结 | 第40-42页 |
第三章 β-葡萄糖苷酶基因和绿色荧光蛋白基因的共表达研究 | 第42-56页 |
·材料与方法 | 第42-47页 |
·菌株和质粒 | 第42页 |
·主要试剂及培养基 | 第42页 |
·引物设计 | 第42-43页 |
·bgll和gfp基因的融合及载体的构建 | 第43-45页 |
·T.reesei转化及筛选 | 第45-46页 |
·转化子酶活测定 | 第46页 |
·转化子染色体上bgll基因拷贝数的半定量PCR分析 | 第46页 |
·转化子蛋白SDS-PAGE检测 | 第46-47页 |
·转化子的荧光检测 | 第47页 |
·结果与讨论 | 第47-54页 |
·bgll和gfp基因的融合及载体的构建 | 第47-50页 |
·T.reesei转化及验证 | 第50-51页 |
·转化子的酶活测定 | 第51-53页 |
·转化子染色体上bgll基因拷贝数的半定量PCR分析 | 第53页 |
·转化子蛋白SDS-PAGE检测 | 第53-54页 |
·转化子的荧光检测 | 第54页 |
·本章小结 | 第54-56页 |
第四章 T.reesei.bgll基因在斜卧青霉JU-A10中的表达 | 第56-62页 |
·材料与方法 | 第56-58页 |
·菌株和质粒 | 第56页 |
·主要试剂 | 第56页 |
·培养基及培养条件 | 第56-57页 |
·重组质粒的构建 | 第57页 |
·斜卧青霉的转化 | 第57-58页 |
·转化子的酶活测定 | 第58页 |
·结果与讨论 | 第58-60页 |
·重组质粒的构建 | 第58-60页 |
·斜卧青霉转化及转化子的筛选验证 | 第60页 |
·转化子的酶活测定 | 第60页 |
·本章小结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |