| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-26页 |
| ·高盐对植物的影响 | 第12-15页 |
| ·盐分对植物的伤害 | 第12-14页 |
| ·生物膜破坏 | 第12-13页 |
| ·产生活性氧 | 第13页 |
| ·胁迫对抗氧化物酶和抗氧化物的影响 | 第13-14页 |
| ·植物耐盐机理 | 第14-15页 |
| ·植物拒盐和对离子的选择性吸收 | 第14页 |
| ·植物通过离子区隔化酶类使离子区隔化提高盐胁迫耐受性 | 第14-15页 |
| ·盐腺简介 | 第15-16页 |
| ·泌盐盐生植物互花米草 | 第16-17页 |
| ·激光显微切割技术 | 第17-20页 |
| ·激光显微切割技术的发展 | 第17-18页 |
| ·激光捕获显微切割技术的原理 | 第18页 |
| ·激光捕获显微切割技术的应用 | 第18-19页 |
| ·激光捕获显微切割技术在植物中的应用 | 第18-19页 |
| ·激光捕获显微切割技术在其他领域的应用 | 第19页 |
| ·激光捕获显微切割技术的优点 | 第19-20页 |
| ·转录组测序及基因表达谱分析 | 第20-22页 |
| ·cDNA 文库 | 第21页 |
| ·EST 序列分析的研究现状 | 第21-22页 |
| ·转录组测序及功能分析 | 第22页 |
| ·囊泡运输相关基因VAMP | 第22-26页 |
| ·SNAREs 介导膜融合的过程 | 第23-24页 |
| ·VAMP 研究进展 | 第24-26页 |
| 2 实验论文 | 第26-69页 |
| ·互花米草富集盐腺细胞转录组测序分析及基因表达谱分析相关实验 | 第26-36页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·化学试剂 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·互花米草石蜡切片的制作步骤及方法 | 第27-28页 |
| ·扫面电镜观察盐腺结构的步骤及方法 | 第28页 |
| ·激光显微切割技术富集盐腺及转录组测序 | 第28-29页 |
| ·实验结果及分析 | 第29-34页 |
| ·互花米草石蜡切片 | 第29-30页 |
| ·扫面电镜观察盐腺结构 | 第30页 |
| ·激光显微切割技术富集盐腺 | 第30-31页 |
| ·富集互花米草盐腺细胞RNA 提取及转录组测序结果 | 第31-34页 |
| ·结论与讨论 | 第34-36页 |
| ·互花米草石蜡切片制作分析 | 第34-35页 |
| ·激光显微切割的技术难点分析 | 第35-36页 |
| ·互花米草盐腺富集及转录组测序分析 | 第36页 |
| ·囊泡运输相关基因VAMP 的载体构建和功能鉴定 | 第36-69页 |
| ·实验材料 | 第36-42页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·菌种及质粒 | 第36-38页 |
| ·培养基 | 第38-40页 |
| ·化学试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| ·相关分析软件 | 第41页 |
| ·引物 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-49页 |
| ·互花米草总RNA 的提取 | 第42页 |
| ·互花米草VAMP 基因的克隆 | 第42-43页 |
| ·GeneClean 方法从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段 | 第43页 |
| ·加尾操作 | 第43-44页 |
| ·PCR 产物与pMD18-T 载体的连接 | 第44页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第44-45页 |
| ·质粒提取及酶切验证 | 第45页 |
| ·T 载体插入序列的测序与序列分析 | 第45页 |
| ·植物表达载体的构建与农杆菌的转化 | 第45-47页 |
| ·质粒酶切鉴定转化菌株 | 第47页 |
| ·渗透法转化拟南芥 | 第47-48页 |
| ·不同浓度NaCl 胁迫下转基因SaVAMP 拟南芥萌发生长状况测定 | 第48页 |
| ·转基因SaVAMP 拟南芥对外源甘露醇和LiCl 的响应 | 第48-49页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对ABA 的响应 | 第49页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对外源葡萄糖的响应 | 第49页 |
| ·实验结果及分析 | 第49-65页 |
| ·RNA 提取结果 | 第49-50页 |
| ·互花米草cDNA-PCR 结果琼脂糖凝胶电泳检测 | 第50-51页 |
| ·提取的质粒酶切图片 | 第51页 |
| ·互花米草VAMP 克隆结果与分析 | 第51-58页 |
| ·连入载体后的质粒双酶切鉴定 | 第58页 |
| ·转入GV3101 后的质粒双酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·盐处理和未盐处理互花米草不同组织SaVAMP 基因的表达情况 | 第59页 |
| ·SaVAMP 过表达转化子的筛选 | 第59-60页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥的PCR 鉴定 | 第60-61页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥的耐盐性变化 | 第61-62页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对外源甘露醇和LiCl 的响应结果 | 第62-63页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对外源ABA 的响应结果 | 第63-64页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对外源葡萄糖的响应结果 | 第64-65页 |
| ·结论与讨论 | 第65-69页 |
| ·互花米草VAMP 基因的表达情况分析 | 第65-66页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥的耐盐性分析 | 第66页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对外源甘露醇和LiCl 的响应结果分析 | 第66-67页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对外源ABA 的响应结果分析 | 第67页 |
| ·转SaVAMP 基因拟南芥对外源葡萄糖的响应结果分析 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 附录1 攻读学位期间发表的论文目录 | 第76-77页 |
