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鼠疫亚单位疫苗和黏膜佐剂的初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 黏膜免疫的研究进展第12-16页
   ·黏膜佐剂第12-14页
     ·CT 和E. coli 不耐热肠毒素第12-13页
     ·细胞因子佐剂第13页
     ·N. meningitides 的外膜蛋白(OMP)第13页
     ·减毒沙门氏菌第13-14页
     ·CpG 序列第14页
   ·黏膜免疫途径第14-15页
   ·展望第15-16页
第二章 鼠疫新型疫苗的研究进展第16-21页
   ·Y. PESTIS 的主要抗原成分第16页
   ·鼠疫疫苗的研究第16-19页
     ·减毒活疫苗第16-17页
     ·亚单位疫苗第17-19页
     ·组分疫苗第19页
   ·展望第19-21页
第三章 蛋白体的研究进展第21-28页
   ·N. MENINGITIDES 外膜蛋白的研究进展第21-23页
     ·Ⅰ类外膜蛋白(PorA)第21-22页
     ·Ⅱ类外膜蛋白(PorB)第22页
     ·Ⅳ类外膜蛋白(Class 4 protein)第22-23页
   ·蛋白体作为黏膜佐剂的研究进展第23-26页
     ·蛋白体增强免疫反应的基本原理第23-24页
     ·蛋白体的应用第24-26页
   ·蛋白体的研究前景第26-28页
第四章 鼠疫菌YSCF 抗原基因在E. COLI 中的表达及纯化鉴定第28-39页
   ·材料第28-29页
     ·主要试剂第28页
     ·溶液和培养基第28-29页
     ·菌种及质粒第29页
     ·主要仪器第29页
   ·方法第29-34页
     ·Y. pestisYscF 结构基因的PCR 扩增第29-30页
     ·表达质粒pET32α-YscF 的构建及鉴定第30-32页
     ·pET32α-YscF 的诱导表达及表达产物的检测第32-34页
     ·表达产物的初步纯化第34页
   ·结果第34-37页
     ·Y. pestisYscF 抗原结构基因的PCR 扩增第34-35页
     ·重组质粒pMD18-T/ YscF 测序及双酶切鉴定第35页
     ·重组表达质粒pET32α-YscF 的鉴定第35页
     ·YscF 融合蛋白的表达及鉴定第35页
     ·YscF 融合蛋白Western-blotting 鉴定第35-37页
     ·rYscF 抗原活性鉴定第37页
   ·讨论第37-38页
   ·小结第38-39页
第五章 蛋白体的制备和鼠疫黏膜免疫的应用研究第39-50页
   ·材料第39-41页
     ·主要试剂第39页
     ·菌种第39页
     ·培养基和溶液第39-40页
     ·ELASA 试剂第40-41页
   ·方法第41-42页
     ·蛋白体的制备第41页
     ·蛋白体的纯化第41页
     ·蛋白体某些物质的检测第41-42页
   ·动物试验第42-44页
     ·蛋白体-鼠疫YscF 重组蛋白疫苗的制备第42页
     ·实验动物和免疫方案第42页
     ·YscF 攻毒实验第42页
     ·检测样品的收集第42-43页
     ·ELISA 测血清效价第43-44页
     ·ELISA 检测血清IgA 和呼吸道和消化道特异性sIgA第44页
   ·结果第44-47页
     ·蛋白体的制备和纯化鉴定结果第44页
     ·蛋白体中某些物质的检测结果第44-45页
     ·小鼠血清总IgG 的检测结果第45页
     ·小鼠呼吸道及消化道特异性sIgA 的测定第45-46页
     ·淋巴细胞亚群分析第46-47页
     ·免疫保护力试验结果第47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-50页
第六章 蛋白体三分子的原核表达、纯化及免疫佐剂的研究第50-57页
   ·材料第50页
     ·菌株和质粒第50页
     ·实验动物第50页
   ·方法第50-52页
     ·重组蛋白的表达第50页
     ·重组蛋白的纯化第50-51页
     ·SDS-PAGE 鉴定外源蛋白的表达第51页
     ·Western-blotting 鉴定目的蛋白第51页
     ·蛋白体- H5N1裂解病毒疫苗的制备第51页
     ·实验动物和免疫方案第51-52页
     ·ELISA 测血清IgG 效价第52页
     ·ELISA 检测呼吸道和消化道特异性sIgA第52页
   ·结果第52-55页
     ·pET28a(+)-PorA、pET28a(+)-PorB、pET28a(+)-Class 4 重组质粒在E. coli 中表达、纯化第52-53页
     ·Western-blotting 鉴定表达的重组蛋白第53页
     ·小鼠血清总 IgG 水平的检测结果第53-54页
     ·小鼠血清 IgA 和呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA 的测定结果第54-55页
   ·讨论第55-56页
   ·小结第56-57页
结论第57-58页
参考文献第58-64页
附录第64-66页
缩略语英文对照表第66-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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