| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 精原干细胞生物学特性概述 | 第11-15页 |
| ·精原干细胞增殖与分化 | 第11-13页 |
| ·精原干细胞凋亡 | 第13-15页 |
| 第二章 精原干细胞的体外培养及冻存 | 第15-20页 |
| ·精原干细胞分离与纯化 | 第15-16页 |
| ·精原干细胞鉴定 | 第16页 |
| ·影响精原干细胞体外增殖与分化的因素 | 第16-19页 |
| ·基本培养基 | 第16-17页 |
| ·添加剂的应用 | 第17页 |
| ·血清 | 第17页 |
| ·激素和维生素的应用 | 第17-18页 |
| ·生长因子 | 第18页 |
| ·饲养层 | 第18-19页 |
| ·温度对精原干细胞体外培养的影响 | 第19页 |
| ·精原干细胞的冻存 | 第19-20页 |
| 第三章 精原干细胞移植研究及应用前景 | 第20-25页 |
| ·精原干细胞移植技术发展概述 | 第20-21页 |
| ·受体动物移植前处理 | 第21页 |
| ·精原干细胞移植方法 | 第21页 |
| ·精原干细胞的应用前景 | 第21-25页 |
| ·应用精原干细胞研究精子的发生及机制 | 第21-22页 |
| ·保存生育能力 | 第22-23页 |
| ·治疗雄性不育 | 第23页 |
| ·转基因动物 | 第23-25页 |
| 第四章 新生牛精原干细胞的分离、纯化与鉴定 | 第25-34页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·睾丸组织 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·新生牛精原干细胞分离 | 第26页 |
| ·新生牛精原干细胞 Percoll 密度梯度纯化 | 第26页 |
| ·新生牛精原干细胞原代培养及生长特性观察 | 第26页 |
| ·新生牛精原干细胞鉴定 | 第26-28页 |
| ·统计分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·两步酶消化法分离新生牛精原干细胞效果 | 第28页 |
| ·新生牛精原干细胞在 Percoll 梯度中的分布 | 第28-29页 |
| ·新生牛精原干细胞在 Percoll 梯度3 中的纯度 | 第29页 |
| ·新生牛精原干细胞的培养特性 | 第29-30页 |
| ·新生牛精原干细胞鉴定 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·牛年龄对牛精原干细胞分离的影响 | 第31-32页 |
| ·关于新生牛精原干细胞的分离 | 第32页 |
| ·牛精原干细胞的纯化效果 | 第32页 |
| ·新生牛精原干细胞的鉴定 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第五章 新生牛精原干细胞体外培养体系优化 | 第34-43页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·睾丸组织 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·新生牛精原干细胞的分离纯化同4.2.1 和4.2.2 | 第35页 |
| ·不同血清浓度对新生牛精原干细胞体外增殖的影响 | 第35页 |
| ·不同生长因子对新生牛精原干细胞体外增殖的影响 | 第35页 |
| ·不同密度饲养层对新生牛精原干细胞体外增殖的影响 | 第35-36页 |
| ·统计分析 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·不同血清浓度对新生牛精原干细胞集落数的影响 | 第36-37页 |
| ·不同生长因子对新生牛精原干细胞体外增殖的影响 | 第37-39页 |
| ·不同密度饲养层对新生牛精原干细胞集落数的影响 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·关于血清对精原干细胞的作用 | 第40页 |
| ·关于生长因子对精原干细胞的作用 | 第40-41页 |
| ·关于支持细胞的作用 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第六章 新生牛精原干细胞转染PCL-NEO-HTERT 及检测 | 第43-52页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·pCl-Neo- hTERT 载体的转化扩增及鉴定 | 第44-46页 |
| ·新生牛精原干细胞阳离子脂质体转染 | 第46页 |
| ·pCl-Neo-hTERT 转染阳性细胞生长特性观察 | 第46页 |
| ·pCl-Neo-hTERT 转染阳性细胞端粒酶活性检测 | 第46页 |
| ·pCl-Neo-hTERT 转染阳性细胞生长曲线绘制 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-50页 |
| ·pCl-Neo-hTERT 载体的转化扩增及鉴定 | 第47-48页 |
| ·pCl-Neo-hTERT 转染阳性新生牛精原干细胞的生长特性 | 第48-49页 |
| ·pCl-Neo-hTERT 转染阳性新生牛精原干细胞端粒酶活性检测 | 第49-50页 |
| ·pCl-Neo- hTERT 转染阳性新生牛精原干细胞生长曲线 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附:常用溶液配制 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
