摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
前言 | 第9页 |
1 文献综述 | 第9-15页 |
·犬恶丝虫抗原 | 第9-11页 |
·免疫应答 | 第11-12页 |
·非特异性免疫应答 | 第11页 |
·特异性免疫应答 | 第11-12页 |
·犬恶丝虫病的诊断 | 第12-15页 |
·ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay) | 第12-13页 |
·其它免疫学方法 | 第13页 |
·诊断试剂盒 | 第13-14页 |
·常规诊断方法 | 第14-15页 |
2 材料和方法 | 第15-23页 |
·实验材料 | 第15-17页 |
·实验动物 | 第15-16页 |
·血清 | 第16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·方法 | 第17-23页 |
·犬恶丝虫诊断抗原的制备 | 第17页 |
·阳性血清和阴性血清的制备 | 第17页 |
·Dot-ELISA方法的建立 | 第17-18页 |
·最佳反应条件的选择 | 第18-19页 |
·特异性试验 | 第19-20页 |
·重复性试验 | 第20页 |
·平行对照实验 | 第20页 |
·膜片保存期试验 | 第20页 |
·Dot-ELISA检测犬恶丝虫抗体的初步应用 | 第20页 |
·免疫接种兔的抗体消长水平检测 | 第20-21页 |
·SDS-PAGE检测犬恶丝虫粗抗原蛋白 | 第21-22页 |
·粗抗原蛋白的免疫印迹(半干式转移) | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-29页 |
·粗提犬恶丝虫抗原含量的测定 | 第23页 |
·Dot-ELISA的最佳工作条件 | 第23-25页 |
·最佳包被缓冲液和抗原浓度的选择结果 | 第23页 |
·最佳血清稀释液的选择结果 | 第23页 |
·HRP-SPA最佳工作浓度和时间的选择结果 | 第23页 |
·最佳包被温度和时间的选择结果 | 第23页 |
·最佳封闭液和封闭时间的选择结果 | 第23-24页 |
·最适底物作用时间的选择结果 | 第24-25页 |
·最适反应温度和反应时间的选择结果 | 第25页 |
·最适洗涤剂的选择结果 | 第25页 |
·特异性实验 | 第25页 |
·交叉实验 | 第25页 |
·特异性阻断实验 | 第25页 |
·重复性实验 | 第25页 |
·平行对照实验 | 第25-27页 |
·膜片保存期试验 | 第27页 |
·Dot-ELISA检测待检犬血清抗体水平的实验结果 | 第27页 |
·对50份未出现犬恶丝虫临床症状、剖检后未发现虫体的待检犬血清进行Dot-ELISA检测的结果 | 第27页 |
·对50份未出现犬恶丝虫临床症状的待检犬血清进行Dot-ELISA检测的结果 | 第27页 |
·对2只免疫兔免疫前后用Dot-ELISA检测其抗体消长规律 | 第27页 |
·犬恶丝虫可溶性抗原的分析 | 第27-29页 |
·犬恶丝虫粗抗原提取物蛋白的SDS-PAGE电泳结果 | 第27-29页 |
·犬恶丝虫可溶性抗原蛋白的免疫印迹结果 | 第29页 |
4 讨论 | 第29-39页 |
·实验方法 | 第29-33页 |
·Dot-ELISA技术 | 第31页 |
·SDS-PAGE | 第31-33页 |
·免疫印迹技术(Western-Blot) | 第33页 |
·Dot-EISA最佳条件的研究 | 第33-34页 |
·Dot-ELISA方法阳性、阴性标准的初步确定 | 第34-35页 |
·待检犬血清抗体检测结果的分析 | 第35-36页 |
·犬恶丝虫可溶性抗原的分析 | 第36页 |
·免疫印迹在诊断中的应用 | 第36-37页 |
·对犬恶丝虫免疫机制的初步探讨 | 第37-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
附录 主要试剂的配置 | 第48-49页 |
在读期间发表论文情况 | 第49页 |