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Dot-ELISA检测犬恶丝虫抗体方法的建立及犬恶丝虫可溶性蛋白的抗原性研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
前言第9页
1 文献综述第9-15页
   ·犬恶丝虫抗原第9-11页
   ·免疫应答第11-12页
     ·非特异性免疫应答第11页
     ·特异性免疫应答第11-12页
   ·犬恶丝虫病的诊断第12-15页
     ·ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)第12-13页
     ·其它免疫学方法第13页
     ·诊断试剂盒第13-14页
     ·常规诊断方法第14-15页
2 材料和方法第15-23页
   ·实验材料第15-17页
     ·实验动物第15-16页
     ·血清第16页
     ·主要仪器第16页
     ·主要试剂第16-17页
   ·方法第17-23页
     ·犬恶丝虫诊断抗原的制备第17页
     ·阳性血清和阴性血清的制备第17页
     ·Dot-ELISA方法的建立第17-18页
     ·最佳反应条件的选择第18-19页
     ·特异性试验第19-20页
     ·重复性试验第20页
     ·平行对照实验第20页
     ·膜片保存期试验第20页
     ·Dot-ELISA检测犬恶丝虫抗体的初步应用第20页
     ·免疫接种兔的抗体消长水平检测第20-21页
     ·SDS-PAGE检测犬恶丝虫粗抗原蛋白第21-22页
     ·粗抗原蛋白的免疫印迹(半干式转移)第22-23页
3 结果第23-29页
   ·粗提犬恶丝虫抗原含量的测定第23页
   ·Dot-ELISA的最佳工作条件第23-25页
     ·最佳包被缓冲液和抗原浓度的选择结果第23页
     ·最佳血清稀释液的选择结果第23页
     ·HRP-SPA最佳工作浓度和时间的选择结果第23页
     ·最佳包被温度和时间的选择结果第23页
     ·最佳封闭液和封闭时间的选择结果第23-24页
     ·最适底物作用时间的选择结果第24-25页
     ·最适反应温度和反应时间的选择结果第25页
     ·最适洗涤剂的选择结果第25页
   ·特异性实验第25页
     ·交叉实验第25页
     ·特异性阻断实验第25页
   ·重复性实验第25页
   ·平行对照实验第25-27页
   ·膜片保存期试验第27页
   ·Dot-ELISA检测待检犬血清抗体水平的实验结果第27页
     ·对50份未出现犬恶丝虫临床症状、剖检后未发现虫体的待检犬血清进行Dot-ELISA检测的结果第27页
     ·对50份未出现犬恶丝虫临床症状的待检犬血清进行Dot-ELISA检测的结果第27页
   ·对2只免疫兔免疫前后用Dot-ELISA检测其抗体消长规律第27页
   ·犬恶丝虫可溶性抗原的分析第27-29页
     ·犬恶丝虫粗抗原提取物蛋白的SDS-PAGE电泳结果第27-29页
     ·犬恶丝虫可溶性抗原蛋白的免疫印迹结果第29页
4 讨论第29-39页
   ·实验方法第29-33页
     ·Dot-ELISA技术第31页
     ·SDS-PAGE第31-33页
     ·免疫印迹技术(Western-Blot)第33页
   ·Dot-EISA最佳条件的研究第33-34页
   ·Dot-ELISA方法阳性、阴性标准的初步确定第34-35页
   ·待检犬血清抗体检测结果的分析第35-36页
   ·犬恶丝虫可溶性抗原的分析第36页
   ·免疫印迹在诊断中的应用第36-37页
   ·对犬恶丝虫免疫机制的初步探讨第37-39页
5 结论第39-40页
参考文献第40-47页
致谢第47-48页
附录 主要试剂的配置第48-49页
在读期间发表论文情况第49页

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