中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
文献综述 | 第10-17页 |
1 来源和生理生化特性 | 第10-12页 |
2 基因结构 | 第12页 |
3 表达及调节 | 第12页 |
4 生物学活性 | 第12-13页 |
5 IL-8受体 | 第13-14页 |
6 IL-8的实验室检测 | 第14页 |
7 IL-8的临床意义 | 第14-15页 |
8 本实验的目的和意义 | 第15-17页 |
实验部分 | 第17-49页 |
第一章 荣昌猪及内江猪IL-8基因的克隆及序列分析 | 第17-31页 |
1 材料 | 第17-19页 |
·试剂 | 第17页 |
·菌种和质粒 | 第17页 |
·实验动物 | 第17页 |
·溶液配制 | 第17-18页 |
·主要仪器设备 | 第18-19页 |
2 实验方法 | 第19-25页 |
·猪外周血淋巴细胞的分离、培养及猪白细胞介素-8的诱导 | 第19页 |
·猪外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
·荣昌猪及内江猪白细胞介素-8基因的RT-PCR扩增 | 第20-21页 |
·猪白细胞介素-8基因的克隆 | 第21-24页 |
·pMD18-T-PIL-8质粒的鉴定 | 第24-25页 |
·荣昌猪及内江猪白细胞介素-8基因生物信息学分析 | 第25页 |
3 结果 | 第25-29页 |
·荣昌猪及内江猪白细胞介素-8基因的RT-PCR扩增 | 第25-26页 |
·pMD18-T-PIL-8质粒的PCR鉴定 | 第26-27页 |
·pMD18-T-PIL-8质粒的测序鉴定 | 第27-28页 |
·猪白细胞介素-8基因生物信息学分析 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
·猪外周血淋巴细胞的分离与培养 | 第29-30页 |
·猪外周血淋巴细胞总RNA的提取及防止RNA的降解 | 第30-31页 |
第二章 猪白细胞介素-8在大肠杆菌中的表达及其生物活性分析 | 第31-49页 |
1 材料 | 第31-32页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·菌株与质粒 | 第31页 |
·实验所用溶液及其配制 | 第31-32页 |
·实验仪器 | 第32页 |
2 方法 | 第32-40页 |
·pMD18-T-PIL-8质粒中扩增猪白细胞介素-8基因的ORF | 第32-33页 |
·重组表达质粒pET-PIL-8的构建 | 第33-37页 |
·pET-PIL-8质粒的鉴定 | 第37-38页 |
·pET-PIL-8质粒在大肠杆菌中的表达 | 第38-39页 |
·pET-PIL-8重组表达产物的生物学活性分析 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-45页 |
·pMD18-T-PIL-8′质粒的PCR鉴定 | 第40-41页 |
·pMD18-T-PIL-8′质粒的酶切鉴定 | 第41-42页 |
·pET-PIL-8质粒的双酶切鉴定 | 第42页 |
·SDS-PAGE分析pET-PIL-8质粒在大肠杆菌中的表达 | 第42-43页 |
·目的蛋白的表达量分析 | 第43-44页 |
·重组pET-PIL-8质粒的生物学活性检测 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-49页 |
·PIL-8重组表达载体的构建 | 第45-46页 |
·PIL-8的诱导表达 | 第46-47页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第47页 |
·PIL-8的生物学活性分析 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第55-56页 |
附录 | 第56-57页 |