第一章 引言 | 第1-20页 |
·番茄青枯病研究进展 | 第11-13页 |
·茄科劳尔氏菌的分类地位 | 第11-12页 |
·茄科劳尔氏菌的存活、侵染和传播 | 第12页 |
·番茄青枯病的防治 | 第12-13页 |
·芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用 | 第13-15页 |
·苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis) | 第13页 |
·枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) | 第13-14页 |
·蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus) | 第14页 |
·地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) | 第14页 |
·短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) | 第14-15页 |
·启动子克隆的几种方法 | 第15-19页 |
·利用启动子探针载体克隆启动子 | 第15页 |
·利用PCR技术克隆启动子 | 第15-19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 番茄青枯病拮抗细菌的分离和筛选 | 第20-26页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·土样来源 | 第20页 |
·供试病原菌和供试植物 | 第20-21页 |
·培养基 | 第21页 |
·实验器材 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-23页 |
·致病力茄科劳尔氏菌的筛选和保存 | 第21页 |
·菌株的分离和纯化 | 第21页 |
·拮抗菌的初筛 | 第21-22页 |
·拮抗菌的复筛 | 第22页 |
·育苗土的制备 | 第22页 |
·液体菌剂的制备 | 第22页 |
·固体菌剂吸附基质的制备 | 第22页 |
·固体菌剂的制备 | 第22页 |
·拮抗菌株的温室盆栽试验 | 第22-23页 |
·试验调查和数据的统计分析 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-25页 |
·分离及筛选结果 | 第23-24页 |
·拮抗菌液体菌剂的防治效果 | 第24-25页 |
·拮抗菌固体菌剂的防治效果 | 第25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
第三章 番茄青枯病拮抗细菌X10的鉴定 | 第26-36页 |
·试验材料 | 第26页 |
·菌种和培养基 | 第26页 |
·试剂和克隆载体 | 第26页 |
·试验方法 | 第26-31页 |
·培养特征和形态特征 | 第26-27页 |
·生理生化特征 | 第27-29页 |
·细菌X10的16S rDNA鉴定 | 第29-31页 |
·结果 | 第31-35页 |
·培养特征和形态特性 | 第31-32页 |
·生理生化特征 | 第32-33页 |
·菌株的16S rDNA鉴定 | 第33-34页 |
·16S rDNA序列相似性分析 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
第四章 侧孢短芽孢杆菌X10拮抗物质的提取和特性分析 | 第36-43页 |
·试验材料 | 第36页 |
·供试菌株 | 第36页 |
·培养基 | 第36页 |
·试验方法 | 第36-38页 |
·菌体最适吸收波长和生长曲线的测定 | 第36页 |
·拮抗物质抑菌活性测定 | 第36-37页 |
·无菌滤液的制备 | 第37页 |
·拮抗物质的提取 | 第37页 |
·拮抗物质的稳定性测定 | 第37-38页 |
·实验数据的统计分析 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-42页 |
·菌体最适吸收波长和生长曲线 | 第38-39页 |
·无菌滤液对番茄青枯病原菌的拮抗作用 | 第39页 |
·侧孢短芽孢杆菌X10无菌滤液盐析得到物质的拮抗作用 | 第39页 |
·侧孢短芽孢杆菌X10无菌滤液乙醚萃取物的拮抗作用 | 第39-40页 |
·拮抗物质对热的稳定性 | 第40页 |
·拮抗物质对蛋白酶的稳定性 | 第40-41页 |
·拮抗物质对氯仿的稳定性 | 第41页 |
·拮抗物质对紫外线的稳定性 | 第41页 |
·拮抗物质活性的有效时间 | 第41-42页 |
·无菌滤液酸碱稳定性测定 | 第42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第五章 侧孢短芽孢杆菌X10田间应用效果评价 | 第43-49页 |
·材料 | 第43页 |
·供试菌株和培养基 | 第43页 |
·田间小区试验地点和番茄品种 | 第43页 |
·固体生防菌剂吸附基质 | 第43页 |
·方法 | 第43-45页 |
·固体菌剂的制备 | 第43-44页 |
·山东莱阳露地小区试验 | 第44页 |
·山东肥城蔬菜大棚小区试验 | 第44页 |
·实验数据的统计分析 | 第44-45页 |
·结果 | 第45-48页 |
·山东莱阳露地小区试验结果 | 第45-46页 |
·山东肥城蔬菜大棚小区试验结果 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
第六章 启动子的克隆和GFP标记载体的构建 | 第49-65页 |
·试验材料 | 第49-50页 |
·菌株与质粒 | 第49-50页 |
·培养基 | 第50页 |
·抗生素及其工作浓度 | 第50页 |
·酶和试剂 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-55页 |
·质粒DNA的大量提取 | 第50-51页 |
·质粒DNA的小量提取 | 第51页 |
·质粒DNA酶切体系的建立 | 第51页 |
·酶切片段的回收 | 第51-52页 |
·启动子探针pUC19-GFP Bam H I酶切片段的脱磷酸化 | 第52页 |
·X10总DNA的制备 | 第52-53页 |
·X10总DNA Sau3A I酶切反应体系的建立 | 第53页 |
·X10总DNA Sau3A I酶切片断与脱磷载体pUC19-GFP的粘端连接 | 第53页 |
·大肠杆菌DHSa高效感受态细胞的制各 | 第53-54页 |
·转化 | 第54页 |
·阳性克隆子的筛选 | 第54页 |
·克隆片段的序列测定 | 第54页 |
·克隆片断的序列分析 | 第54页 |
·GFP标记载体的构建 | 第54页 |
·荧光检测与照相 | 第54-55页 |
·结果与分析 | 第55-64页 |
·芽孢杆菌X10总DNA的提取和Sau 3A I酶切 | 第55页 |
·启动子文库的构建和阳性克隆子的筛选 | 第55-57页 |
·启动子测序结果和分析 | 第57-62页 |
·GFP标记载体的构建 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简介 | 第73页 |